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诱导特异性CTL为基础的EBV相关肿瘤免疫治疗策略: 1; 作者彭光勇《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期198-200,共3页; 关键词 EPSTEIN-BARR病毒 LCL CTL DC 免疫治疗肿瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

人类疱疹病毒6、7型体外感染淋巴细胞对CD抗原表达的影响被引量：3: 2; 作者姚堃彭光勇 +2 位作者任强季晓辉周峰《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期255-255,258,共2页; 关键词 β-疱疹病毒 HHV-6 HHV-7 淋巴细胞 CD抗原; 在线阅读下载PDF 职称材料

EB病毒潜伏期膜蛋白2A重组腺病毒的制备及表达被引量：2: 3; 作者彭光勇姚堃 +2 位作者许琳徐江英谢芳艺《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期155-158,161,共5页; 目的 :构建EB病毒潜伏期膜蛋白 2A重组腺病毒 ,研究EB病毒相关肿瘤治疗性疫苗。方法 :利用RT PCR扩增出EB病毒B95 8株潜伏期膜蛋白 2A(LMP2A)全部编码蛋白的基因 ,并克隆至pGEM T载体中。并将LMP2AcDNA插入E1、E3区替代的腺病毒载体pAX... 展开更多; 关键词 EB病毒 LMPSA基因腺病毒载体基因转移基因表达潜伏期 RT-PCR法; 在线阅读下载PDF 职称材料

痘苗病毒载体介导爱泼斯坦-巴尔病毒潜伏期膜蛋白2A基因转染树突状细胞对其功能的影响被引量：3: 4; 作者许继军姚堃 +2 位作者彭光勇谢芳艺丁传林《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期179-182,共4页; 目的:探讨痘苗病毒载体介导爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)潜伏期膜蛋白2A(LMP2A)基因转染树突状细胞(DC)对DC的表型和功能的影响,以及EBV相关肿瘤免疫治疗性疫苗的可行性。方法:用EBV-LMP2A基因重组痘苗病毒(Vac-LMP2A)转染成熟的DC,流式细胞... 展开更多; 关键词痘苗病毒载体树突状细胞 EB病毒潜伏期膜蛋白2A; 在线阅读下载PDF 职称材料

表达Cre重组酶的真核细胞系的建立及在重组伪狂犬病病毒研究中的应用被引量：2: 5; 作者苏鑫铭徐亚林 +3 位作者于春梅曹瑞兵周斌陈溥言《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期114-119,共6页; 根据Cre基因序列设计并合成1对引物,PCR扩增出Cre基因编码区,克隆于pIREShyg载体,得到重组质粒pIREShyg-Cre,转染HEK-293A细胞后经400μg.mL-1 Hygromycin B的筛选,将其中1个阳性克隆命名为293A-Cre。利用伪狂犬病病毒(Pseudorabies vir... 展开更多; 关键词伪狂犬病病毒 PCR CRE重组酶真核细胞系 LOXP; 在线阅读下载PDF 职称材料

爱泼斯坦-巴尔病毒潜伏期膜蛋白2AcDNA的克隆及序列分析被引量：2: 6; 作者彭光勇姚堃 +2 位作者许琳徐江英谢芳艺《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期4-6,9,共4页; 目的 :克隆爱泼斯坦巴尔病毒 (EBV)潜伏期膜蛋白 2A(LMP2A)基因 ,进一步研究其基因工程疫苗。方法 :用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)扩增出EBVB95 8株LMP2A全部编码蛋白的基因 ,并克隆至载体pGEM T中 ,通过α 插入失活、PCR及EcoRⅠ... 展开更多; 关键词爱泼斯坦-巴尔病毒潜伏期膜蛋白基因逆转当-聚合酶链反应克隆鉴定序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

人硫氧还蛋白还原酶cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：2: 7; 作者徐江英许琳 +3 位作者戴荣华超卢是月彭光勇《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期109-111,共3页; 目的:克隆人硫氧还蛋白还原酶(TR)基因并构建原核表达载体,获得TR蛋白。方法:采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从人胚脑组织中扩增出TR cDNA片段,克隆至pGEM-T载体并转化大肠杆菌DH5α,获得重组质粒pGEM-TR;经序列分析证实后,提取... 展开更多; 关键词硫氧还蛋白还原酶序列分析原核表达大肠杆菌克隆 CDNA; 在线阅读下载PDF 职称材料

含绿色荧光蛋白基因与人疱疹病毒8型K12基因重组真核表达载体的构建被引量：2: 8; 作者朱建中卢春《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期453-454,共2页; 目的:构建含绿色荧光蛋白(GFP)基因与人疱疹病毒8型K12基因的重组真核表达载体。方法:将人疱疹病毒8型(HHV-8)K12基因插入到真核表达质粒pCR3.1的EcoRI和XhoI位点,构建重组质粒pCR-K12;PCR扩增GFP基因,将GFP基因插入到重组质粒pCR-K12中... 展开更多; 关键词绿色荧光蛋白人疱疹病毒8型 K12基因重组真核表达载体构建; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名诱导特异性CTL为基础的EBV相关肿瘤免疫治疗策略: 1; 作者彭光勇; 机构南京医科大学微生物与免疫学教研室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期198-200,共3页; 关键词 EPSTEIN-BARR病毒 LCL CTL DC 免疫治疗肿瘤; 分类号 R730.51 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人类疱疹病毒6、7型体外感染淋巴细胞对CD抗原表达的影响被引量：3: 2; 作者姚堃彭光勇任强季晓辉周峰; 机构南京医科大学微生物与免疫学教研室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期255-255,258,共2页; 基金国家及省自然科学基金资助 !(No .392 70 0 34 BK970 5 1); 关键词 β-疱疹病毒 HHV-6 HHV-7 淋巴细胞 CD抗原; 分类号 R373.11 [医药卫生—病原生物学] R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名EB病毒潜伏期膜蛋白2A重组腺病毒的制备及表达被引量：2: 3; 作者彭光勇姚堃许琳徐江英谢芳艺; 机构南京医科大学微生物与免疫学教研室南京军医学院生物基因工程中心; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期155-158,161,共5页; 基金国家自然科学基金 (No .30 170 880 ) 江苏省科委"九五"攻关课题基金资助项目 (No .BJ9810 0 ); 文摘目的 :构建EB病毒潜伏期膜蛋白 2A重组腺病毒 ,研究EB病毒相关肿瘤治疗性疫苗。方法 :利用RT PCR扩增出EB病毒B95 8株潜伏期膜蛋白 2A(LMP2A)全部编码蛋白的基因 ,并克隆至pGEM T载体中。并将LMP2AcDNA插入E1、E3区替代的腺病毒载体pAX1CW ,选择正确的克隆pAX1CW LMP2A与Ad5DNA 末端肽复合体共转染 2 93细胞 ,通过同源重组获得复制缺陷型的重组腺病毒。提取重组腺病毒转染的 2 93细胞DNA ,通过酶切初步鉴定。选择阳性克隆感染CV1细胞 ,通过流式细胞仪和激光共聚集显微镜分析LMP2A蛋白表达情况。结果 :挑选同源重组 17个克隆中有 9个为阳性克隆 ,扩增到的病毒滴度为 2 3× 10 8pfu/ml。用MOI =10 0的重组腺病毒感染CV1细胞 ,48h后在激光共聚焦显微镜下可见LMP2A蛋白表达于CV1细胞膜上 ,经流式细胞仪检测LMP2A蛋白表达阳性细胞数为 94 4 %。结论 :重组腺病毒能有效地介导LMP2A基因的表达 ,为进一步研究该基因功能及其工程疫苗打下了基础。; 关键词 EB病毒 LMPSA基因腺病毒载体基因转移基因表达潜伏期 RT-PCR法; Keywords Epstein-Barr Virus LMP2A gene Adenovirus vector Cloning and identification Sequence analysis; 分类号 R373 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名痘苗病毒载体介导爱泼斯坦-巴尔病毒潜伏期膜蛋白2A基因转染树突状细胞对其功能的影响被引量：3: 4; 作者许继军姚堃彭光勇谢芳艺丁传林; 机构南京医科大学微生物与免疫学教研室; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期179-182,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30170880) 江苏省科委"九五"重大课题基金资助项目(BJ98100); 文摘目的:探讨痘苗病毒载体介导爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)潜伏期膜蛋白2A(LMP2A)基因转染树突状细胞(DC)对DC的表型和功能的影响,以及EBV相关肿瘤免疫治疗性疫苗的可行性。方法:用EBV-LMP2A基因重组痘苗病毒(Vac-LMP2A)转染成熟的DC,流式细胞术(FACS)检测转染前后DC表面分子CD1a、CD83、CD40、CD80、HLA-DR变化;3H-TdR掺入法检测转染前后DC刺激同种异体T淋巴细胞增殖等功能的改变。结果:转染后LMP2A蛋白在DC细胞内高表达。Vac-LMP2A转染成熟DC前后对其表面共刺激分子及特征性表面标志无影响,转染后的DC仍具有较强的刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力。结论:痘苗病毒载体是介导外源基因LMP2A转染DC的有效载体,Vac-LMP2A转染成熟DC对DC表型和功能无明显影响,是EBV相关肿瘤如鼻咽癌免疫治疗的理想载体。; 关键词痘苗病毒载体树突状细胞 EB病毒潜伏期膜蛋白2A; Keywords recombinant vaccinia vector dendritic cells Epstein Barr virus latent membrane protein 2A; 分类号 R329.24 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名表达Cre重组酶的真核细胞系的建立及在重组伪狂犬病病毒研究中的应用被引量：2: 5; 作者苏鑫铭徐亚林于春梅曹瑞兵周斌陈溥言; 机构南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京医科大学微生物与免疫学教研室; 出处《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期114-119,共6页; 文摘根据Cre基因序列设计并合成1对引物,PCR扩增出Cre基因编码区,克隆于pIREShyg载体,得到重组质粒pIREShyg-Cre,转染HEK-293A细胞后经400μg.mL-1 Hygromycin B的筛选,将其中1个阳性克隆命名为293A-Cre。利用伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)S03109株(带有gfp报告基因表达盒及loxP位点)感染293A-Cre细胞,荧光显微镜观察、PCR及Western blot检测gfp基因的表达。结果表明,S03109感染293A-Cre二代后loxP位点间的gfp表达盒被删除,获得重组病毒S0419。将S0419感染已转染pBlulox的293A-Cre细胞,在RK13细胞上筛选得到表达LacZ的重组病毒S06293。S06293在293A-Cre细胞上传代2次,X-Gal原位染色表明LacZ的表达消失。测序结果证实,在Cre重组酶作用下,2个同向loxP序列之间的外源基因序列被正确除去。以上结果表明,本研究构建的稳定表达Cre重组酶的293A-Cre细胞系可以用于在包含有loxP位点的PRV基因组中外源基因的快速删除或整合。; 关键词伪狂犬病病毒 PCR CRE重组酶真核细胞系 LOXP; Keywords Pseudorabies virus PCR Cre recombinase eukaryotic cell lines loxP; 分类号 S852.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名爱泼斯坦-巴尔病毒潜伏期膜蛋白2AcDNA的克隆及序列分析被引量：2: 6; 作者彭光勇姚堃许琳徐江英谢芳艺; 机构南京医科大学微生物与免疫学教研室南京军医学院生物基因工程中心; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期4-6,9,共4页; 基金江苏省科委"九五"攻关课题基金资助 (BJ9810 0 ); 文摘目的 :克隆爱泼斯坦巴尔病毒 (EBV)潜伏期膜蛋白 2A(LMP2A)基因 ,进一步研究其基因工程疫苗。方法 :用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)扩增出EBVB95 8株LMP2A全部编码蛋白的基因 ,并克隆至载体pGEM T中 ,通过α 插入失活、PCR及EcoRⅠ、SmaⅠ限制性内切酶双酶切等鉴定重组质粒 ;采用Sanger双脱氧终止法测定cDNA片段的核苷酸序列。结果 :克隆出LMP2A第 1个外显子到第 8个外显子的全部编码蛋白的cDNA ,测序结果与EB病毒B95 8原型株LMP2AcDNA作同源比较 ,完全一致。结论 :本实验克隆了LMP2A基因的全部编码蛋白的cDNA全长片段。; 关键词爱泼斯坦-巴尔病毒潜伏期膜蛋白基因逆转当-聚合酶链反应克隆鉴定序列分析; Keywords Epstein Barr virus latent infection membrane protein 2A RT PCR cloning and identification sequence analysis; 分类号 R373 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人硫氧还蛋白还原酶cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：2: 7; 作者徐江英许琳戴荣华超卢是月彭光勇; 机构南京军医学院生物基因工程研究中心南京医科大学微生物与免疫学教研室; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期109-111,共3页; 基金中国人民解放军海军后勤部资助项目 (98-3302); 文摘目的:克隆人硫氧还蛋白还原酶(TR)基因并构建原核表达载体,获得TR蛋白。方法:采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从人胚脑组织中扩增出TR cDNA片段,克隆至pGEM-T载体并转化大肠杆菌DH5α,获得重组质粒pGEM-TR;经序列分析证实后,提取pGEM-TR重组体,由双酶切得到目的片段,并插入pET9c原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),获得重组质粒pET-rhTR。异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导pET-rhTR在BL21中表达,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)及免疫蛋白印迹(Western blot)分析重组蛋白。结果:克隆的TR cDNA与人胎盘组织TR cDNA同源性为99％;pET-rhTR在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白占菌体总蛋白量的36％,其分子质量为55 ku。TR cDNA序列被GenBank收录,登录号为AF208018。结论:成功克隆了人脑组织来源的TR基因,该基因在大肠杆菌中得到高表达,为进一步研究其功能奠定基础。; 关键词硫氧还蛋白还原酶序列分析原核表达大肠杆菌克隆 CDNA; Keywords thioredoxin reductase sequence analysis prokaryotic expression human; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名含绿色荧光蛋白基因与人疱疹病毒8型K12基因重组真核表达载体的构建被引量：2: 8; 作者朱建中卢春; 机构南京医科大学微生物与免疫学教研室; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期453-454,共2页; 基金国家自然科学基金资助项目(30100160) 江苏省教育厅科研基金资助项目(99KJB310002); 文摘目的:构建含绿色荧光蛋白(GFP)基因与人疱疹病毒8型K12基因的重组真核表达载体。方法:将人疱疹病毒8型(HHV-8)K12基因插入到真核表达质粒pCR3.1的EcoRI和XhoI位点,构建重组质粒pCR-K12;PCR扩增GFP基因,将GFP基因插入到重组质粒pCR-K12中K12上游的KpnI和EcoRI位点中,获得重组表达质粒pCR-GFP-K12。结果:重组表达质粒pCR-GFP-K12的酶切鉴定符合预期结果,此重组质粒中的K12与GFP融合表达并受上游启动子pCMV控制。结论:重组表达质粒pCR-GFP-K12已构建成功,为研究K12的生物学活性及其作用机制打下基础。; 关键词绿色荧光蛋白人疱疹病毒8型 K12基因重组真核表达载体构建; Keywords human herpesvirus 8 K12 gene green fluoresent protein recombinant expression plasmid; 分类号 R373.11 [医药卫生—病原生物学] Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	诱导特异性CTL为基础的EBV相关肿瘤免疫治疗策略	彭光勇	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人类疱疹病毒6、7型体外感染淋巴细胞对CD抗原表达的影响	姚堃彭光勇任强季晓辉周峰	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2000	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	EB病毒潜伏期膜蛋白2A重组腺病毒的制备及表达	彭光勇姚堃许琳徐江英谢芳艺	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2002	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	痘苗病毒载体介导爱泼斯坦-巴尔病毒潜伏期膜蛋白2A基因转染树突状细胞对其功能的影响	许继军姚堃彭光勇谢芳艺丁传林	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2002	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	表达Cre重组酶的真核细胞系的建立及在重组伪狂犬病病毒研究中的应用	苏鑫铭徐亚林于春梅曹瑞兵周斌陈溥言	《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	爱泼斯坦-巴尔病毒潜伏期膜蛋白2AcDNA的克隆及序列分析	彭光勇姚堃许琳徐江英谢芳艺	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2002	2	在线阅读下载PDF 职称材料
7	人硫氧还蛋白还原酶cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达	徐江英许琳戴荣华超卢是月彭光勇	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2003	2	在线阅读下载PDF 职称材料
8	含绿色荧光蛋白基因与人疱疹病毒8型K12基因重组真核表达载体的构建	朱建中卢春	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2002	2	在线阅读下载PDF 职称材料