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镉诱导HEK293细胞自噬和凋亡
被引量：
3
1
作者
刘宣宣
王文倩
毛伟平
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期569-575,共7页
目的探究镉(二氯化镉,Cd Cl2)能否诱导HEK293细胞自噬与凋亡以及细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2和AKT蛋白在自噬中的作用。方法将绿色荧光蛋白(GFP)-微管相关蛋白Ⅰ轻链3B(LC3B)重组质粒转染至HEK293细胞24 h后,以Cd Cl22,4,8和10μmol...
目的探究镉(二氯化镉,Cd Cl2)能否诱导HEK293细胞自噬与凋亡以及细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2和AKT蛋白在自噬中的作用。方法将绿色荧光蛋白(GFP)-微管相关蛋白Ⅰ轻链3B(LC3B)重组质粒转染至HEK293细胞24 h后,以Cd Cl22,4,8和10μmol·L^(-1)诱导细胞12 h,荧光显微镜观察自噬情况;以Cd Cl22,4,8和10μmol·L^(-1)诱导未转染GFP-LC3B重组质粒的HEK293细胞12 h,透射电子显微镜下观察自噬泡;Western蛋白印迹检测LC3B-Ⅱ/Ⅰ的表达变化,以及ERK1/2和AKT蛋白的磷酸化表达;流式细胞仪检测Cd Cl2(≤10μmol·L^(-1))对HEK293细胞凋亡的影响。用3-MA(自噬抑制剂)预处理Cd Cl210μmol·L^(-1)诱导的HEK293细胞12 h,Western蛋白印迹检测细胞内激活型胱天蛋白酶3的表达。结果 Cd Cl2(≤10μmol·L^(-1))诱导HEK293细胞12 h,荧光显微镜下转染细胞出现绿色荧光点状聚集,电镜下观察到自噬泡,Western蛋白印迹检测到LC3B-Ⅱ/Ⅰ表达量增加(P<0.05,P<0.01),ERK1/2和AKT蛋白磷酸化水平均增加(P<0.05,P<0.01)。流式细胞仪检测出Cd Cl2(≤10μmol·L^(-1))诱导的HEK293细胞发生了细胞凋亡;加入3-MA20μmol·L^(-1)+Cd Cl210μmol·L^(-1)后,细胞自噬被抑制,激活型胱天蛋白酶3表达增加(P<0.01)。结论低浓度Cd Cl2(≤10μmol·L^(-1))能引起细胞自噬,可能通过ERK1/2和AKT蛋白介导细胞自噬;自噬与凋亡相伴发生,自噬可能抑制凋亡。
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关键词
镉
HEK293细胞
自噬
细胞凋亡
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职称材料
pcDNA3.1-GFP-LC3B真核表达载体的构建
2
作者
刘宣宣
王文倩
+3 位作者
毛伟平
严浩
孟素芳
王芳
《安徽农业科学》
CAS
2015年第6期82-84,97,共4页
[目的]构建含GFP-LC3B基因的真核表达载体。[方法]从HEK293细胞中提取总RNA,以反转录得到c DNA为模板,根据Gen Bank公布的人源LC3B基因序列设计引物,通过PCR方式扩增目的基因,将基因和pc DNA3.1-GFP载体双酶切后,通过T4连接酶将基因连接...
[目的]构建含GFP-LC3B基因的真核表达载体。[方法]从HEK293细胞中提取总RNA,以反转录得到c DNA为模板,根据Gen Bank公布的人源LC3B基因序列设计引物,通过PCR方式扩增目的基因,将基因和pc DNA3.1-GFP载体双酶切后,通过T4连接酶将基因连接到pc DNA3.1-GFP载体上,得到pc DNA3.1-GFP-LC3B真核表达载体。[结果]扩增出目的基因,构建了含目的基因的真核表达载体pc DNA3.1-GFP-LC3B。[结论]成功构建了含有人LC3B基因的真核表达载体pc DNA3.1-GFP-LC3B,为研究细胞自噬提供了基础。
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关键词
HEK293
CELLS
LC3B
pcDNA3.1-GFP
真核表达
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职称材料
下丘脑室旁核调控心血管活动的研究进展
被引量：
3
3
作者
刘宣宣
许驭
+2 位作者
王晨辰
綦振宝
韩莹
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2023年第9期1313-1318,共6页
随着中国步入老龄化社会的进程逐渐加快,各种心血管疾病(包括慢性心力衰竭、心肌梗死和高血压等)的发病率逐年上升,目前还缺乏有效的预防手段。越来越多的研究发现,中枢神经系统与心血管生理机能的调控有密不可分的交互作用,其中下丘脑...
随着中国步入老龄化社会的进程逐渐加快,各种心血管疾病(包括慢性心力衰竭、心肌梗死和高血压等)的发病率逐年上升,目前还缺乏有效的预防手段。越来越多的研究发现,中枢神经系统与心血管生理机能的调控有密不可分的交互作用,其中下丘脑室旁核(paraventricular nucleus,PVN)中神经元和多种细胞因子参与调控心血管活动,是心血管活动的关键性调节中枢。本文旨在归纳和总结近年来PVN在调控心血管活动中作用及机制的研究进展。
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关键词
下丘脑室旁核
交感神经
心交感传入反射
心血管活动
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职称材料
题名
镉诱导HEK293细胞自噬和凋亡
被引量：
3
1
作者
刘宣宣
王文倩
毛伟平
机构
南京医科大学康达学院生理学教研室
南京
师范
大学
江苏省分子医学实验室
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期569-575,共7页
文摘
目的探究镉(二氯化镉,Cd Cl2)能否诱导HEK293细胞自噬与凋亡以及细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2和AKT蛋白在自噬中的作用。方法将绿色荧光蛋白(GFP)-微管相关蛋白Ⅰ轻链3B(LC3B)重组质粒转染至HEK293细胞24 h后,以Cd Cl22,4,8和10μmol·L^(-1)诱导细胞12 h,荧光显微镜观察自噬情况;以Cd Cl22,4,8和10μmol·L^(-1)诱导未转染GFP-LC3B重组质粒的HEK293细胞12 h,透射电子显微镜下观察自噬泡;Western蛋白印迹检测LC3B-Ⅱ/Ⅰ的表达变化,以及ERK1/2和AKT蛋白的磷酸化表达;流式细胞仪检测Cd Cl2(≤10μmol·L^(-1))对HEK293细胞凋亡的影响。用3-MA(自噬抑制剂)预处理Cd Cl210μmol·L^(-1)诱导的HEK293细胞12 h,Western蛋白印迹检测细胞内激活型胱天蛋白酶3的表达。结果 Cd Cl2(≤10μmol·L^(-1))诱导HEK293细胞12 h,荧光显微镜下转染细胞出现绿色荧光点状聚集,电镜下观察到自噬泡,Western蛋白印迹检测到LC3B-Ⅱ/Ⅰ表达量增加(P<0.05,P<0.01),ERK1/2和AKT蛋白磷酸化水平均增加(P<0.05,P<0.01)。流式细胞仪检测出Cd Cl2(≤10μmol·L^(-1))诱导的HEK293细胞发生了细胞凋亡;加入3-MA20μmol·L^(-1)+Cd Cl210μmol·L^(-1)后,细胞自噬被抑制,激活型胱天蛋白酶3表达增加(P<0.01)。结论低浓度Cd Cl2(≤10μmol·L^(-1))能引起细胞自噬,可能通过ERK1/2和AKT蛋白介导细胞自噬;自噬与凋亡相伴发生,自噬可能抑制凋亡。
关键词
镉
HEK293细胞
自噬
细胞凋亡
Keywords
cadmium
HEK293 cells
autophagy
apoptosis
分类号
R114 [医药卫生—卫生毒理学]
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职称材料
题名
pcDNA3.1-GFP-LC3B真核表达载体的构建
2
作者
刘宣宣
王文倩
毛伟平
严浩
孟素芳
王芳
机构
南京医科大学康达学院生理学教研室
南京
师范
大学
江苏省分子医学实验室
出处
《安徽农业科学》
CAS
2015年第6期82-84,97,共4页
文摘
[目的]构建含GFP-LC3B基因的真核表达载体。[方法]从HEK293细胞中提取总RNA,以反转录得到c DNA为模板,根据Gen Bank公布的人源LC3B基因序列设计引物,通过PCR方式扩增目的基因,将基因和pc DNA3.1-GFP载体双酶切后,通过T4连接酶将基因连接到pc DNA3.1-GFP载体上,得到pc DNA3.1-GFP-LC3B真核表达载体。[结果]扩增出目的基因,构建了含目的基因的真核表达载体pc DNA3.1-GFP-LC3B。[结论]成功构建了含有人LC3B基因的真核表达载体pc DNA3.1-GFP-LC3B,为研究细胞自噬提供了基础。
关键词
HEK293
CELLS
LC3B
pcDNA3.1-GFP
真核表达
Keywords
HEK293 cells
LC3B
pc DNA3.1-GFP
Eukaryotic expression
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
下丘脑室旁核调控心血管活动的研究进展
被引量：
3
3
作者
刘宣宣
许驭
王晨辰
綦振宝
韩莹
机构
南京医科大学
生理学
系
南京医科大学康达学院生理学教研室
东部战区总医院秦淮医疗区口腔科
齐鲁工业
大学
(山东省科
学院
)工程训练中心
出处
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2023年第9期1313-1318,共6页
基金
国家自然科学基金(82270455)
江苏省高校基础科学(自然科学)研究项目(22KJD180003)
南京医科大学康达学院第二期“科研人才培养计划”项目(KD2022KYRC005)。
文摘
随着中国步入老龄化社会的进程逐渐加快,各种心血管疾病(包括慢性心力衰竭、心肌梗死和高血压等)的发病率逐年上升,目前还缺乏有效的预防手段。越来越多的研究发现,中枢神经系统与心血管生理机能的调控有密不可分的交互作用,其中下丘脑室旁核(paraventricular nucleus,PVN)中神经元和多种细胞因子参与调控心血管活动,是心血管活动的关键性调节中枢。本文旨在归纳和总结近年来PVN在调控心血管活动中作用及机制的研究进展。
关键词
下丘脑室旁核
交感神经
心交感传入反射
心血管活动
Keywords
hypothalamic paraventricular nucleus
sympathetic nerves
cardiac sympathetic afferent reflex
cardiovascular activity
分类号
R331.3 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
镉诱导HEK293细胞自噬和凋亡
刘宣宣
王文倩
毛伟平
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
pcDNA3.1-GFP-LC3B真核表达载体的构建
刘宣宣
王文倩
毛伟平
严浩
孟素芳
王芳
《安徽农业科学》
CAS
2015
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
下丘脑室旁核调控心血管活动的研究进展
刘宣宣
许驭
王晨辰
綦振宝
韩莹
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2023
3
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