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缺氧对骨髓间充质干细胞肾素血管紧张素系统表达的影响
1
作者 肖容容 高景红 +3 位作者 范越 周露 施睿臻 李庆平 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第2期123-126,共4页
目的肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)参与缺氧心肌损伤过程。文中旨在观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)自身主要反应元件血管紧张素受体1(angiotensin II type 1 receptor,AT1-R)、AT2-R和血管紧... 目的肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)参与缺氧心肌损伤过程。文中旨在观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)自身主要反应元件血管紧张素受体1(angiotensin II type 1 receptor,AT1-R)、AT2-R和血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)在缺氧条件下的表达情况。方法分离培养大鼠的MSCs,用倒置相差显微镜观察细胞形态,应用CD29、CD11b/c抗体进行细胞鉴定。实验分为对照组和Hypoxia/SD组:对照组用含10%FBS的L-DMEM培养MSCs,Hypoxia/SD组采用缺氧联合无血清处理24 h诱导缺氧损伤模型。2组分别用锥虫蓝染色、CCK-8检测及流式细胞术,测定细胞活力和凋亡率。应用Real-time Quantitative PCR法检测细胞内AT1-R、AT2-R和ACE的mRNA表达水平;用Western blot检测细胞内AT1-R、AT2-R和ACE蛋白表达的变化。结果 MSCs特异性抗原CD29阳性率>97%,非特异性抗原CD11b/c阳性率<1%,分离培养成功;与对照组相比,Hypoxia/SD组24 h可显著增加MSCs凋亡率[(6.73±0.78)%vs(19.93±4.92)%,P<0.01],降低细胞活力[(78.49±4.94)%vs(37.33±2.91)%,P<0.01]。Hypoxia/SD环境下MSCs自身的RAS主要反应元件AT1-R、AT2-R及ACE的mRNA和蛋白表达量均增加。结论推断缺氧导致MSCs自身RAS激活,从而提高MSCs对缺氧损伤区的心肌修复能力。 展开更多
关键词 肾素血管经张素系统 骨髓间充质干细胞 缺氧/无血清
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埃他卡林对兔肺动脉平滑肌内皮细胞钙浓度的影响 被引量：8
2
作者 齐栩 王虹 +2 位作者 解卫平 胡刚 汪海 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期67-70,共4页
目的观察埃他卡林(IPT)对内皮素1(ET-1)诱导培养的兔肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的影响,并探讨其作用机制。方法应用细胞培养、氚-胸腺嘧啶核苷([3H]-TdR)参入实验、Fluo-3和激光扫描共聚焦显微镜技术评价IPT对ET-1诱导的兔PASMC增殖及... 目的观察埃他卡林(IPT)对内皮素1(ET-1)诱导培养的兔肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的影响,并探讨其作用机制。方法应用细胞培养、氚-胸腺嘧啶核苷([3H]-TdR)参入实验、Fluo-3和激光扫描共聚焦显微镜技术评价IPT对ET-1诱导的兔PASMC增殖及PASMC[Ca2+]i调节的作用。结果ET-1(10-7mol.L-1)使PASMC[3H]-TdR参入量增加146.8%,与对照组比较,差异有显著性(P<0.01);在相同条件下,加入ET-1的同时,分别向培养基中加入IPT10-7、10-6、10-5mol.L-1,细胞[3H]-TdR参入量分别下降(19.8±4.6)%、(41.2±9.5)%、(54.7±10.1)%,与ET-1组比较差异有显著性(P<0.01);对照组PASMC[Ca2+]i荧光强度和荧光光密度值较低;ET-1组中[Ca2+]i荧光光密度值明显增高,从73.7±10.1增加到143.8±28.2,两者比较差异有显著性(P<0.01);而IPT组细胞内荧光光密度值明显降低,仅从74.30±10.2增加到86.03±9.82,与ET-1组比较差异有显著性(P<0.01)。结论IPT可明显抑制ET-1诱导的兔PASMC增殖、DNA合成;减少钙通道的开放时间,抑制细胞内Ca2+浓度增加。 展开更多
关键词 肺动脉高压 ATP敏感性钾通道 钙通道 内皮细胞
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完整大鼠连续间断取血法研究黄芪甲苷的药动学(英文) 被引量：1
3
作者 余俊先 张淳文 +4 位作者 张银娣 孙视 赵人争 韩嘉媛 沈建平 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第6期676-681,共6页
目的:建立黄芪甲苷(astragaloside ,AGS-IV)在完整大鼠体内血药浓度的测定方法及初步的药动学评价。方法:运用液质联用仪(HPLC-MS)测定大鼠血浆AGS-IV浓度。6只雄性SD大鼠,AGS-IV溶液静脉给药(2 .0 mg/kg) ,单只大鼠连续取血法,取血点... 目的:建立黄芪甲苷(astragaloside ,AGS-IV)在完整大鼠体内血药浓度的测定方法及初步的药动学评价。方法:运用液质联用仪(HPLC-MS)测定大鼠血浆AGS-IV浓度。6只雄性SD大鼠,AGS-IV溶液静脉给药(2 .0 mg/kg) ,单只大鼠连续取血法,取血点分别为0 .025、0 .05、0 .1、0 .25、0 .5、1、2、4、6、10、14和24 h。固相萃取小柱提取血浆样品,地高辛为内标(I .S.) ,LC-ESI-MS测定血药浓度。AGS-IV的m/z为807 .5 ,内标地高辛的m/z为803 .5。结果: AGS-IV的标准曲线线性范围为1 ～1 000 ng/mL(r=0 .9992) ,日内和日间精密度分别小于6 %和8 %,血浆样品AGS-IV的回收率为92 .8 %～98 .4 %,内标的回收率为80 .0 %～90 .9 %,最低检测限为0 .5 ng/mL。CAPP软件拟合,AGS-IV的消除符合二室模型,药动学参数t1/2β(h) ,CL(L.kg-1.h) ,Vc(L/kg) ,AUC0 -∞(μg·mL-1.h)分别为:3 .46±0 .52 ,0 .47±0 .02 ,0 .76±0 .16和4274±186。结论:连续间断取血法结合HPLC-MS技术,适用于测定AGS-IV在小动物的血药浓度和药动学评价。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 药动学 HPLC-MS 完整大鼠
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