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靶向黏着斑激酶siRNA表达载体构建及转染Tca8113细胞的沉默效应
被引量：
3
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作者
刘华联
江宏兵
+3 位作者
邢树忠
刘来奎
王子露
郑阳玉
《实用口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第1期13-16,共4页
目的:构建靶向黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)基因的小干涉RNA(small interfering RNA,siRNA)质粒表达载体,转染人舌癌细胞Tca8113后观察其对FAK表达的抑制作用。方法:根据siRNA的设计原则,在人FAK mRNA序列中,设计并合成2条特...
目的:构建靶向黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)基因的小干涉RNA(small interfering RNA,siRNA)质粒表达载体,转染人舌癌细胞Tca8113后观察其对FAK表达的抑制作用。方法:根据siRNA的设计原则,在人FAK mRNA序列中,设计并合成2条特异性靶序列寡核苷酸及2条无关对照序列,经退火成互补双链,再克隆到pGC-SilencerTM-U6/Neo真核表达载体中,构建重组体pSilencer-FAK并进行酶切鉴定;转染重组质粒至Tca8113细胞中,经G418抗性筛选,获得稳定转染细胞系;运用免疫细胞化学和Western-blot鉴定FAK的沉默效应。结果:质粒酶切证实目的寡核苷酸片段已被克隆到pGC-SilencerTM-U6/Neo载体中;pSi-lencer-FAK转染细胞后,FAK基因的表达受到明显抑制。结论:成功构建了针对人FAK的siRNA表达载体,通过转染Tca8113细胞可有效地抑制细胞中FAK的表达。
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关键词
黏着斑激酶
舌癌细胞
RNA干扰
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职称材料
题名
靶向黏着斑激酶siRNA表达载体构建及转染Tca8113细胞的沉默效应
被引量：
3
1
作者
刘华联
江宏兵
邢树忠
刘来奎
王子露
郑阳玉
机构
南京医科大学口腔医学院口腔颌面外科.口腔医学研究所
出处
《实用口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第1期13-16,共4页
基金
南京医科大学科技发展基金重点项目(编号:2006025)
江苏省卫生厅科研项目(编号:H200636)
文摘
目的:构建靶向黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)基因的小干涉RNA(small interfering RNA,siRNA)质粒表达载体,转染人舌癌细胞Tca8113后观察其对FAK表达的抑制作用。方法:根据siRNA的设计原则,在人FAK mRNA序列中,设计并合成2条特异性靶序列寡核苷酸及2条无关对照序列,经退火成互补双链,再克隆到pGC-SilencerTM-U6/Neo真核表达载体中,构建重组体pSilencer-FAK并进行酶切鉴定;转染重组质粒至Tca8113细胞中,经G418抗性筛选,获得稳定转染细胞系;运用免疫细胞化学和Western-blot鉴定FAK的沉默效应。结果:质粒酶切证实目的寡核苷酸片段已被克隆到pGC-SilencerTM-U6/Neo载体中;pSi-lencer-FAK转染细胞后,FAK基因的表达受到明显抑制。结论:成功构建了针对人FAK的siRNA表达载体,通过转染Tca8113细胞可有效地抑制细胞中FAK的表达。
关键词
黏着斑激酶
舌癌细胞
RNA干扰
Keywords
Focal adhesion kinase
Tongue cancer cell
RNA interference
分类号
R739.8 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
靶向黏着斑激酶siRNA表达载体构建及转染Tca8113细胞的沉默效应
刘华联
江宏兵
邢树忠
刘来奎
王子露
郑阳玉
《实用口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
3
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