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抗炭疽PA15单克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立
1
作者
方国平
唐甜
+3 位作者
仇镇宁
冯振卿
朱进
管晓虹
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期734-740,共7页
目的:制备抗炭疽保护性抗原15(protective antigen,PA15)单克隆抗体,初步建立双抗体夹心ELISA检测炭疽感染者血清中的保护性抗原。方法:以纯化的PA63蛋白为免疫原免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备单克隆抗体,SDS-PAGE电泳检测抗体纯度,间接E...
目的:制备抗炭疽保护性抗原15(protective antigen,PA15)单克隆抗体,初步建立双抗体夹心ELISA检测炭疽感染者血清中的保护性抗原。方法:以纯化的PA63蛋白为免疫原免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备单克隆抗体,SDS-PAGE电泳检测抗体纯度,间接ELISA、Western blot、免疫沉淀(IP)和蛋白质谱分析单抗特异性,并建立双抗体夹心ELISA检测方法。结果:制备了2株抗PA15单克隆抗体,命名为3D7和8E9。SDS-PAGE电泳可见抗体的重链和轻链,间接ELISA、Western blot发现单抗3D7和8E9可与PA15、PA63特异性结合,IP和蛋白质谱分析发现单抗3D7可与PA83特异性结合,双抗体夹心ELISA方法检测炭疽感染血清中保护性抗原的最低检出浓度为16 ng/ml。结论:成功制备了抗PA15单克隆抗体,并建立了双抗体夹心ELISA方法检测炭疽感染血清中的保护性抗原。
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关键词
炭疽病
炭疽芽胞杆菌
保护性抗原
单克隆抗体
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职称材料
题名
抗炭疽PA15单克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立
1
作者
方国平
唐甜
仇镇宁
冯振卿
朱进
管晓虹
机构
南京医科大学
卫生部
抗体技术重点实验室
南京医科大学卫生部病理学系
广州
医科大
学附属第二医院
病理
科
南京
军区军事医学研究所
出处
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期734-740,共7页
基金
国家自然科学基金资助(31170884)
文摘
目的:制备抗炭疽保护性抗原15(protective antigen,PA15)单克隆抗体,初步建立双抗体夹心ELISA检测炭疽感染者血清中的保护性抗原。方法:以纯化的PA63蛋白为免疫原免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备单克隆抗体,SDS-PAGE电泳检测抗体纯度,间接ELISA、Western blot、免疫沉淀(IP)和蛋白质谱分析单抗特异性,并建立双抗体夹心ELISA检测方法。结果:制备了2株抗PA15单克隆抗体,命名为3D7和8E9。SDS-PAGE电泳可见抗体的重链和轻链,间接ELISA、Western blot发现单抗3D7和8E9可与PA15、PA63特异性结合,IP和蛋白质谱分析发现单抗3D7可与PA83特异性结合,双抗体夹心ELISA方法检测炭疽感染血清中保护性抗原的最低检出浓度为16 ng/ml。结论:成功制备了抗PA15单克隆抗体,并建立了双抗体夹心ELISA方法检测炭疽感染血清中的保护性抗原。
关键词
炭疽病
炭疽芽胞杆菌
保护性抗原
单克隆抗体
Keywords
anthrax
Bacillus anthracis
protective antigen
monoclonal antibody
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗炭疽PA15单克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立
方国平
唐甜
仇镇宁
冯振卿
朱进
管晓虹
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2014
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