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甲基苯丙胺对大鼠小胶质细胞的损伤及炎性相关基因表达的影响 被引量:4
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作者 程洁 蒋雷 +2 位作者 环飞 黄雨蒙 王军 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第9期1131-1135,1181,共6页
目的:观察甲基苯丙胺(methamphetamine,Meth)对原代小胶质细胞的损伤及炎性相关基因表达的影响。方法:原代培养SD胎鼠小胶质细胞,利用MTT和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)分别检测Meth引起小胶质细胞活力和凋亡的变化。采用实时荧光定... 目的:观察甲基苯丙胺(methamphetamine,Meth)对原代小胶质细胞的损伤及炎性相关基因表达的影响。方法:原代培养SD胎鼠小胶质细胞,利用MTT和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)分别检测Meth引起小胶质细胞活力和凋亡的变化。采用实时荧光定量聚合酶链反应法(real-time PCR)观察Meth对小胶质细胞炎性相关因子mRNA表达的影响。ELISA及试剂盒法检测Meth作用后小胶质细胞白介素(interleukin,IL)-6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)的分泌改变。结果:MTT实验显示,Meth降低小胶质细胞活力,呈浓度依赖性,浓度为200μmol/L时与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。TUNEL实验结果显示200μmol/L Meth可引起细胞凋亡,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。q-PCR结果显示Meth作用于小胶质细胞24 h可降低IL-24、一氧化氮合酶3(nitric oxide synthase 3,NOS3)表达水平,上调Peli3、Sigma受体1(Sigma receptor 1,Sig1-R)、IL-1β、IL-6、Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,蛋白水平亦发现,Meth可促进IL-6和TNF-α的分泌。结论:Meth可降低小胶质细胞活力,诱导小胶质细胞凋亡,并引起IL-1β、IL-1R、IL-6、TLR4等炎性因子mRNA表达变化,促进IL-6和TNF-α的分泌,进而可能损伤中枢神经系统,产生神经毒性。 展开更多
关键词 甲基苯丙胺 小胶质细胞 炎性因子
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趋化因子受体4在神经胶质瘤中的表达及血管生成中的作用 被引量:1
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作者 许余玲 王军 +2 位作者 徐艳 环飞 肖杭 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期598-603,共6页
目的:探讨趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)在神经胶质瘤中的表达及在血管生成中的作用。方法:通过免疫组化法检测正常或神经胶质瘤患者的瘤体组织标本CXCR4、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表... 目的:探讨趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)在神经胶质瘤中的表达及在血管生成中的作用。方法:通过免疫组化法检测正常或神经胶质瘤患者的瘤体组织标本CXCR4、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,其结果做方差分析及相关性分析;采用ELISA观察CXCR4的配体基质细胞衍生因子-1(stromal derived factor-1,SDF-1)对U87胶质瘤细胞系VEGF分泌的影响;同时利用多种处理方式(对照组、SDF-1处理组、CXCR4拮抗剂AMD3100处理组、CXCR4 RNA干扰处理组)作用于U87后,取其条件培养上清与人脐静脉内皮细胞系(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)共培养,比较小管样结构(tubule-like structure,TLS)生成数量的变化。结果:神经胶质瘤中CXCR4、VEGF的表达量随着肿瘤恶性度的升高而增加,且二者呈线性正相关(P<0.01)。ELISA实验表明SDF-1可通过CXCR4促进VEGF的分泌(P<0.01)。成管实验提示CXCR4与胶质瘤血管生成相关。结论:CXCR4与神经胶质瘤恶性度相关,且其配体SDF-1可通过CXCR4影响VEGF的表达,将CXCR4拮抗或干扰明显影响胶质瘤血管增生,提示CXCR4可能为神经胶质瘤的治疗提供相应靶点和思路。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 肿瘤血管 血管内皮生长因子 趋化因子受体4 趋化因子受体7
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围产期双酚A暴露对子代海马组织APP、Tau表达的影响 被引量:1
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作者 周景 朱庆 +4 位作者 刘景丽 钱文溢 高蓉 王军 肖杭 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期909-914,共6页
目的:观察F0代孕鼠围产期不同时期双酚A(bisphenol A,BPA)暴露对子代小鼠海马中淀粉样蛋白前体(amyloid precursor protein,APP)、微管相关蛋白(microtubule-associated protein,Tau)、磷酸化的Tau蛋白(p-Tau)的影响,探讨雌雄小鼠胎儿... 目的:观察F0代孕鼠围产期不同时期双酚A(bisphenol A,BPA)暴露对子代小鼠海马中淀粉样蛋白前体(amyloid precursor protein,APP)、微管相关蛋白(microtubule-associated protein,Tau)、磷酸化的Tau蛋白(p-Tau)的影响,探讨雌雄小鼠胎儿发育阶段BPA暴露的敏感期。方法:利用C57BL/6J胎鼠原代培养的海马神经元共孵BPA;F0代小鼠围产期皮下注射建立BPA暴露小鼠模型,根据不同暴露期分为4组,即对照组、胎儿期(P6-PND0)、哺乳期(PND0-PND21)、胎儿期和哺乳期联合暴露(P6-PND21),取其成年子代海马组织(8月龄)通过Western blot方法检测APP、Tau及p-Tau的表达量。结果:海马神经元细胞与不同浓度BPA共孵后,APP、Tau及p-Tau的表达均上调,呈剂量依赖性。BPA连续暴露后的子代小鼠中,雌性小鼠PND0-PND21组、P6-PND21组海马组织中APP、Tau及p-Tau表达增加,而雄性小鼠仅P6-PND21组3种蛋白的表达上调。结论:围产期BPA连续暴露可引起子代小鼠海马APP、Tau及p-Tau表达改变,从而可能引起神经损伤,而雌性小鼠相较于雄性小鼠可能对BPA引起的神经损伤更敏感。 展开更多
关键词 双酚A 淀粉样蛋白前体 微管相关蛋白
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甲基苯丙胺引起BV2小胶质细胞炎性反应:基于Toll样受体-Peli1信号通路的研究 被引量:3
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作者 须怀沙 王易欣 +3 位作者 陈旭锋 蒋雷 王军 张久平 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期324-330,共7页
目的:探讨Toll样受体(Toll like receptor,TLR)-E3泛素连接酶Pellino 1(Peli1)介导的炎性通路在甲基苯丙胺(methamphetamine,Meth)引起BV2小胶质细胞炎性反应中的作用。方法:利用Western blot观察Meth作用后Toll样家族中多种TLR的表达... 目的:探讨Toll样受体(Toll like receptor,TLR)-E3泛素连接酶Pellino 1(Peli1)介导的炎性通路在甲基苯丙胺(methamphetamine,Meth)引起BV2小胶质细胞炎性反应中的作用。方法:利用Western blot观察Meth作用后Toll样家族中多种TLR的表达及其下游接头蛋白髓样分化因子(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TIR-domaincontaining adaptor inducing interferon-β,TRIF)水平的改变,同时观察上述接头蛋白下游Peli1蛋白的表达,利用ELISA、实时定量PCR(real time-PCR)及Western blot观察Peli1调节的下游炎性因子及信号通路的改变。结果:Meth作用于BV2细胞后,TLR3、TLR4、TLR7、TLR8、TLR11在特定时间内表达明显上调,同时下游MyD88及TRIF蛋白表达显著增加,其中TRIF具有浓度依赖效应。Meth作用后亦可引起泛素化蛋白Peli1的表达,而利用RNA干扰的方法将Peli1下调后,炎性因子诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin-6,IL)-6表达下降,核因子(nuclear factor,NF)-κB的激活明显缓解。结论:TLR介导的炎性信号在Meth引起BV2细胞炎性反应过程中发挥重要作用。因此,基于TLRs-Peli1靶信号轴的干预可能为Meth神经毒性的干预提供靶点,具有潜在的应用意义。 展开更多
关键词 甲基苯丙胺 TOLL样受体家族 Peli1 神经炎性反应 BV2细胞
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双酚A对SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞的影响及机制 被引量:2
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作者 张慧慧 陆海华 +3 位作者 唐思文 王军 肖杭 高蓉 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期587-591,共5页
目的:研究环境内分泌干扰物双酚A(BPA)对SD大鼠血-脑屏障成分表达及星形胶质细胞活力的影响并探讨其损伤机制。方法:通过MTT检测细胞活力,高效液相色谱法(HPLC)检测谷氨酸含量的变化,实时荧光定量PCR检测星形胶质细胞中Claudin-3、Claud... 目的:研究环境内分泌干扰物双酚A(BPA)对SD大鼠血-脑屏障成分表达及星形胶质细胞活力的影响并探讨其损伤机制。方法:通过MTT检测细胞活力,高效液相色谱法(HPLC)检测谷氨酸含量的变化,实时荧光定量PCR检测星形胶质细胞中Claudin-3、Claudin-4、Claudin-5、JAM-1、JAM-2、ZO-1、E-cadherin基因的表达。结果:10-7 mg/ml的BPA与星型胶质细胞孵育24或48 h后即可引起细胞活力的下降,具有统计学差异。在该浓度的暴露下,血-脑屏障紧密连接相关蛋白Claudin-3、Claudin-4、JAM-1、E-cadherin蛋白的mRNA水平下调,而Claudin-5、JAM-2、ZO-1蛋白基因表达上调且具有统计学意义;HPLC结果显示,谷氨酸的浓度上调。结论:环境内分泌干扰物BPA对血-脑屏障的完整性具有潜在的损伤作用。 展开更多
关键词 环境内分泌干扰物 双酚A 星形胶质细胞 血-脑屏障
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TLR/NF-κB信号通路在甲基苯丙胺诱导的原代小胶质细胞炎性反应中的作用
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作者 肖逸 王胜婵 +2 位作者 王易欣 臧松松 张炜 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期970-975,共6页
目的:探讨Toll样受体(Toll like receptor,TLR)/核因子(nuclear factor,NF)-κB信号通路在甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)引起原代小胶质细胞激活及炎性因子释放的作用。方法:分离培养原代小胶质细胞,免疫荧光法鉴定原代小胶质细胞... 目的:探讨Toll样受体(Toll like receptor,TLR)/核因子(nuclear factor,NF)-κB信号通路在甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)引起原代小胶质细胞激活及炎性因子释放的作用。方法:分离培养原代小胶质细胞,免疫荧光法鉴定原代小胶质细胞纯度。细胞予METH(300μmol/L)染毒0 min、15 min、30 min、1 h、3 h、6 h、12 h和24 h,蛋白免疫印迹检测原代小胶质细胞的激活情况及其NF-κB通路激活情况,real-time PCR检测炎性因子[肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)]和TLR1~9、11 m RNA的表达。结果:分离出的原代小胶质细胞纯度达到95%以上。METH暴露后原代小胶质细胞激活,其激活标志物IBA-1水平增高,NF-κB通路被激活,炎性因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)和TLR2、4~5、7~9、11的mRNA水平明显升高,TLR1的mRNA水平明显降低,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论:METH可通过调节TLR/NF-κB信号通路激活原代小胶质细胞并促进其释放炎性因子,因而TLR可作为METH神经炎性反应干预的潜在靶点,具有一定的治疗意义。 展开更多
关键词 甲基苯丙胺 原代小胶质细胞 TLR/NF-κB信号通路
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