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高脂饮食对雄性小鼠生殖功能和睾丸内氧化低密度脂蛋白变化的影响 被引量:9
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作者 靖俊 丁宁 +4 位作者 丁晓萌 彭龙平 胡学春 赵子建 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第2期133-137,共5页
目的脂代谢紊乱可导致雄性不育,但其影响精子发生及睾丸微环境的机制尚不明确。文中旨在探讨高脂饮食对雄性小鼠生殖功能以及睾丸内氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)表达变化的影响。方法 16只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机数字表法分为正常饮食... 目的脂代谢紊乱可导致雄性不育,但其影响精子发生及睾丸微环境的机制尚不明确。文中旨在探讨高脂饮食对雄性小鼠生殖功能以及睾丸内氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)表达变化的影响。方法 16只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机数字表法分为正常饮食组和高脂饮食组,每组8只。分别给予标准饲料与高脂饲料维持饮食干预连续喂养16周。检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)以及睾酮水平;取附睾尾测定精子数量和活力,HE染色观察睾丸结构变化,免疫组织化学分析小鼠睾丸组织中Ox-LDL的免疫定位和表达变化。结果与正常饮食组相比,高脂饮食组小鼠体重显著增加(P<0.05),血清TG差异无统计学意义(P>0.05),高脂饮食组较正常饮食组血清TC升高[(2.31±0.33)mmol/L vs(6.54±0.31)mmol/L,P<0.01],血清Ox-LDL升高[(0.32±0.03)mg/L vs(0.44±0.06)mg/L,P<0.01],血清睾酮降低[(3.64±0.43)mg/L vs(0.40±0.14)mg/L,P<0.01],小鼠精子浓度降低[(9.95±0.75)106/m L vs(5.66±1.51)106/m L,P<0.01]和精子活动率降低[(54.69±17.84)%vs(32.48±5.80)%,P<0.01]。HE染色显示高脂饮食组较正常饮食组睾丸间质细胞、睾丸生精细胞与腔内精子数量明显减少,同时免疫组织化学显示Ox-LDL定位于睾丸间质细胞周围且表达明显升高(P<0.01)。结论睾丸局部微环境中,Ox-LDL升高可能抑制了Leydig细胞的睾酮合成,进而影响了睾丸生精功能。 展开更多
关键词 高脂饮食 OX-LDL 睾酮 精子
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紫外线及黄芪甲苷对人皮肤成纤维细胞E3连接酶Hrd1表达的影响 被引量:5
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作者 钱雯 陈斌 +1 位作者 蒋辉莉 苏东明 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期201-205,共5页
目的:探讨紫外线(UV)对人皮肤成纤维细胞中E3连接酶Hrd1表达的影响及黄芪甲苷的干预作用。方法:分离培养人原代成纤维细胞,分别以10J/cm^2UVA和30mJ/cm^2 UVB进行照射,黄芪甲苷进行干预处理。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓... 目的:探讨紫外线(UV)对人皮肤成纤维细胞中E3连接酶Hrd1表达的影响及黄芪甲苷的干预作用。方法:分离培养人原代成纤维细胞,分别以10J/cm^2UVA和30mJ/cm^2 UVB进行照射,黄芪甲苷进行干预处理。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的黄芪甲苷对成纤维细胞增殖活性的影响;荧光定量PCR法检测成纤维细胞中Hrd1的mRNA表达;免疫组化法观察成纤维细胞Hrd1的蛋白表达。结果:MTT结果示:在适宜浓度下,黄芪甲苷对体外培养的成纤维细胞有显著的促增殖作用,药物浓度为10、20、30mg/L时最为明显(P<0.001);荧光定量PCR结果示:UVA、UVB照射组成纤维细胞Hrd1 mRNA表达量明显高于正常对照组,而黄芪甲苷可显著抑制UV辐射后成纤维细胞中Hrd1的表达(P<0.001);免疫组化结果示:UV照射(UVA或UVB)可增加Hrd1的蛋白表达,黄芪甲苷可显著抑制UV照射后成纤维细胞中Hrd1的蛋白表达。结论:UV辐射可以上调人皮肤成纤维细胞中E3连接酶Hrd1的表达,而黄芪甲苷对这一现象具有逆转作用。 展开更多
关键词 紫外线 人皮肤成纤维细胞 E3连接酶 羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1 黄芪甲苷
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Ghrelin对小鼠不同来源胚胎体外发育的影响及其受体的表达模式
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作者 李运生 杨宏星 +3 位作者 刘晓蕊 习海涛 方富贵 刘亚 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期78-83,共6页
为探明Ghrelin及其受体Ghsr-1a在早期胚胎发育中的作用,以小鼠体内受精、体外受精和孤雌激活胚胎为研究对象,在其体外发育过程中添加不同浓度Ghrelin,观察胚胎发育效率;通过免疫荧光染色和荧光定量PCR,观察不同时期胚胎中Ghsr-1a的变化... 为探明Ghrelin及其受体Ghsr-1a在早期胚胎发育中的作用,以小鼠体内受精、体外受精和孤雌激活胚胎为研究对象,在其体外发育过程中添加不同浓度Ghrelin,观察胚胎发育效率;通过免疫荧光染色和荧光定量PCR,观察不同时期胚胎中Ghsr-1a的变化。结果表明,体内受精胚体外发育中添加0.1 ng/m L Ghrelin显著降低了囊胚率(P<0.05),添加1 ng/m L的Ghrelin显著降低了小鼠体外受精胚的囊胚率(P<0.05)。在体内受精胎中,Ghsr-1a的mRNA表达水平在4细胞显著高于其他时期(P<0.05);体外受精胚中,Ghsr-1a的mRNA水平在8细胞前无明显差异,桑椹胚和囊胚显著下降(P<0.05)。在孤雌激活胚胎中,Ghsr-1a的mRNA表达水平从2细胞到8细胞显著降低,之后到囊胚期开始显著升高,其蛋白表达模式与mRNA表达模式相反。Ghsr-1a在体内受精和体外受精胚胎中的表达相似,囊胚期表达量最低。结果提示,Ghrelin能够抑制体内和体外受精胚的体外发育,不同来源胚胎Ghsr-1a mRNA和蛋白表达模式均不相同。研究结果为进一步探索Ghrelin在胚胎发育中的作用机制提供了试验基础。 展开更多
关键词 GHRELIN Ghsr-1a 小鼠 胚胎
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mTOR信号通路中上游调控蛋白Rheb在脂肪细胞分化中的作用 被引量:7
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作者 刘微 邹俊杰 +2 位作者 李晓曦 赵子建 刘志民 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期697-702,共6页
目的观察mTOR信号通路中上游调控蛋白Rheb对脂肪细胞分化的影响。方法构建Rheb(Ras homologenriched in brain)的重组质粒(pCAG-Insulator-Rheb),并将其注射到B6小鼠的胚胎内,产生全身高表达Rheb的转基因小鼠。提取怀孕雌鼠第13.5天的... 目的观察mTOR信号通路中上游调控蛋白Rheb对脂肪细胞分化的影响。方法构建Rheb(Ras homologenriched in brain)的重组质粒(pCAG-Insulator-Rheb),并将其注射到B6小鼠的胚胎内,产生全身高表达Rheb的转基因小鼠。提取怀孕雌鼠第13.5天的胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast cells,MEFs),PCR鉴定基因型之后进行成脂诱导分化。通过检测分化第12天MEFs内三酰甘油的含量、油红O染色的结果、实时定量PCR方法检测脂肪细胞特异性转录因子PPARγ和C/EBPα的表达情况,来观察Rheb在脂肪细胞分化过程中的作用。结果成功构建了全身高表达Rheb的转基因小鼠模型,并且检测到在高表达Rheb后,可以促进MEFs内脂滴的生成,三酰甘油含量增高,油红O染色有明显区别,并且脂肪细胞特异性转录因子PPARγ和C/EBPα的表达量均升高。结论 Rheb过表达以后可以促进脂肪细胞的分化。 展开更多
关键词 RHEB MTOR 脂肪细胞 细胞分化
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