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El-Tor生物型霍乱弧菌可溶性血凝素的性质分析 被引量:1
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作者 宋兰珍 林厚怡 +1 位作者 陈慎宝 丁如宁 《南京医学院学报》 CSCD 1992年第3期291-294,共4页
用改进的 Finkelstein 方法从 Wg2(El-Tor 生物型)弧菌菌株中制备了可溶性血凝素(SHA)和细胞结合血凝素,并对其性质进行了研究。SHA 具有两种功能,它既能凝集鸡的红细胞又能降解某些蛋白质,具蛋白酶的活性。SHA 的最大活性需要 Ca^(2+)... 用改进的 Finkelstein 方法从 Wg2(El-Tor 生物型)弧菌菌株中制备了可溶性血凝素(SHA)和细胞结合血凝素,并对其性质进行了研究。SHA 具有两种功能,它既能凝集鸡的红细胞又能降解某些蛋白质,具蛋白酶的活性。SHA 的最大活性需要 Ca^(2+),活性不被 D-甘露糖、D-果糖、L-果糖和 L-岩藻糖等单糖抑制。在4℃时其活性最稳定。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 血凝素类 单糖类
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大肠杆菌L-天门冬酰胺酶Ⅱ基因的高效表达 被引量:19
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作者 刘景晶 李晶 +1 位作者 吴梧桐 胡梅清 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第11期696-700,共5页
用一对与大肠杆菌天门冬酰胺酶Ⅱ基因(AnsB)两侧序列互补的寡核苷酸E1,E2作引物,以大肠杆菌野生株CPU210009的染色体DNA为模板,通过PCR扩增得到约1.2kb的DNA片段,将此片段插入pKK233-2的... 用一对与大肠杆菌天门冬酰胺酶Ⅱ基因(AnsB)两侧序列互补的寡核苷酸E1,E2作引物,以大肠杆菌野生株CPU210009的染色体DNA为模板,通过PCR扩增得到约1.2kb的DNA片段,将此片段插入pKK233-2的tac启动子下游,转化不同的大肠杆菌宿主菌株,结果表明以CPU210009为宿主菌时,转化子的酶表达量最高,重组L-天门冬酰胺酶占菌体总蛋白48.3%,发酵液酶活力达400IU/ml;比活为48IU/mg蛋白,SDS-PAGE显示纯化后的重组L-天门冬酰胺酶分子量与天然酶相同,均为140KD。 展开更多
关键词 药物 大肠杆菌 天门冬酰胺酶 基因表达
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人肝谷胱甘肽过氧化物酶纯化及性质研究 被引量:5
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作者 徐蘅 裘奇 +1 位作者 胡梅清 魏涌 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第2期210-213,共4页
经硫酸铵分级沉淀,离子交换层析和凝胶过滤等步骤,从人肝中获得了PAGE单一条带的谷胱甘肽过氧化物酶,比活提高120倍,得率为25%。凝胶过滤法测得分子量为90980,SDS-PAGE测定亚基分子量为22423.原子吸... 经硫酸铵分级沉淀,离子交换层析和凝胶过滤等步骤,从人肝中获得了PAGE单一条带的谷胱甘肽过氧化物酶,比活提高120倍,得率为25%。凝胶过滤法测得分子量为90980,SDS-PAGE测定亚基分子量为22423.原子吸收法测得每分子酶含有四个硒原子。等电聚焦显示该酶等电点为5.0.酶活力的最适pH为8.5,最适温度为37℃。动力学实验提示该酶作用机理属于乒乓机制型。 展开更多
关键词 谷胱甘肽 过氧化物酶 性质 提纯
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大鼠肥大细胞组胺释放试验及方法学的探讨 被引量:6
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作者 马建吟 陈丙莺 +1 位作者 范振青 黄钦田 《南京医学院学报》 CSCD 1989年第4期262-265,共4页
从卵清蛋白免疫的SD大鼠胸腹腔中采集的肥大细胞,当以相同的变应原触发时引起肥大细胞释放组胺。用改良的荧光法测定组胺量,计算肥大细胞组胺释放率,实验结果表明,卵清蛋白免疫大鼠第3周肥大细胞组胺释放率达到高峰,在一定范围内,组胺... 从卵清蛋白免疫的SD大鼠胸腹腔中采集的肥大细胞,当以相同的变应原触发时引起肥大细胞释放组胺。用改良的荧光法测定组胺量,计算肥大细胞组胺释放率,实验结果表明,卵清蛋白免疫大鼠第3周肥大细胞组胺释放率达到高峰,在一定范围内,组胺释放率随变应原浓度增加而升高。绵羊抗大鼠IgE抗血清对正常大鼠肥大细胞亦有触发作用。这一试验可用于速发型过敏反应和抗过敏药物的研究。 展开更多
关键词 组胺释放 肥大细胞 免疫 光谱测定
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固定化脲素酶的活化载体制备的方法 被引量:1
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作者 汪瑾 朱连奎 《南京医学院学报》 CSCD 1989年第2期143-145,共3页
酶是参与机体多种化学反应的生物催化剂。在近代生物化学的发展中,酶的应用更加广泛,但酶对热、强酸、强碱、有机溶媒不稳定,很快失活。近年来通过载体活化制备固定化酶,它具有酶特有的催化活性,不溶于水和高的稳定性。因此在研究酶的利... 酶是参与机体多种化学反应的生物催化剂。在近代生物化学的发展中,酶的应用更加广泛,但酶对热、强酸、强碱、有机溶媒不稳定,很快失活。近年来通过载体活化制备固定化酶,它具有酶特有的催化活性,不溶于水和高的稳定性。因此在研究酶的利用,特别是制作生物化学传染器上是非常有利的。本实验是以光谱纯SiO_2颗粒及含SiO_260%的玻璃纤维膜作为固定脲素酶载体。采用氨基硅烷化和戊二醛交联的方法制备了固定脲素酶的活化载体。经固定化效果检验。 展开更多
关键词 固定化脲素酶 活化载体 制备
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检测人LDL不同表位McAb的方法改进
6
作者 潘芝芳 朱敏天 +1 位作者 陈琪 蔡海江 《南京医学院学报》 CSCD 1989年第2期151-153,共3页
对单克隆抗体识别大分子抗原上不同表位的检测,较好的方法是1983年Frigue所创建的ELISA叠加试验(ELISA addi-tivity test)。由于单克隆抗体与其抗原在通常条件下不发生沉淀反应,故多数学者都未应用免疫沉淀反应来检测单克隆抗体的结合位... 对单克隆抗体识别大分子抗原上不同表位的检测,较好的方法是1983年Frigue所创建的ELISA叠加试验(ELISA addi-tivity test)。由于单克隆抗体与其抗原在通常条件下不发生沉淀反应,故多数学者都未应用免疫沉淀反应来检测单克隆抗体的结合位点,只有抗人Ig单克隆抗体(McAb)可以与其抗原发生免疫沉淀反应。1985年Marcovina报道,用双向免疫扩散试验检测小鼠抗人低密度脂蛋白(LDL)McAb,单个McAb不出现沉淀线,至少要用二种McAb加合在一起才有沉淀线。 展开更多
关键词 McAb LDL 免疫双扩散法
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草酸钙结石病人尿液糖蛋白的研究
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作者 宁丹谛 冯善章 尤国才 《南京医学院学报》 CSCD 1990年第2期138-140,共3页
报告正常人14例草酸钙结石患者12例尿液糖蛋白的种类、数量和等电点。两组尿糖蛋白的等电点值在p18.75~3.97,各区段上有显著差异(P<0.01)。3例患者PAGE-PAS_(α1)位出现特征性区带。这些结果启示尿石症可能是一种与糖蛋白代谢紊乱... 报告正常人14例草酸钙结石患者12例尿液糖蛋白的种类、数量和等电点。两组尿糖蛋白的等电点值在p18.75~3.97,各区段上有显著差异(P<0.01)。3例患者PAGE-PAS_(α1)位出现特征性区带。这些结果启示尿石症可能是一种与糖蛋白代谢紊乱相关的疾病。 展开更多
关键词 尿石症 草酸钙 糖蛋白
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氨基酸单向纸层析教学实验的改进 被引量:1
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作者 沈凤新 《南京医学院学报》 CSCD 1991年第4期331-332,共2页
Day(1859-1925)与Tsuett(1872—1919)首创层析法,大大地推动了生物化学发展。1944年Consden等首先应用纸层析分离氨基酸。此法虽已沿用达46年之久,然而医学院生物化学实验对此法的介绍尚未臻完善,下面介绍本实验室改进方法。1 材料与方... Day(1859-1925)与Tsuett(1872—1919)首创层析法,大大地推动了生物化学发展。1944年Consden等首先应用纸层析分离氨基酸。此法虽已沿用达46年之久,然而医学院生物化学实验对此法的介绍尚未臻完善,下面介绍本实验室改进方法。1 材料与方法氨基酸:甘氨酸,中国科学院上海生物化学研究所;L-亮氨酸,上海人发综合利用厂;dL-蛋氨酸,E.MERCK DARMSTADT均化学纯。氨基酸溶液均用水配制。 展开更多
关键词 色谱法 氨基酸 数学实验
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人血清补体Cl_r亚基的分离
9
作者 丁国英 徐愤 《南京医学院学报》 CSCD 1989年第4期255-258,共4页
人血清中补体第1成分业基的分离及抗血清的制备曾于前文报道,作者在分离了人Cl_s扩亚基制备了抗人Cl_s抗血清的基础上,设计了一个较简便的分离Cl_r亚基的方法,将抗人Cl_s抗血清经DEAE-纤维素层析纯化后,偶联到过碘酸活化的不溶性载体Sep... 人血清中补体第1成分业基的分离及抗血清的制备曾于前文报道,作者在分离了人Cl_s扩亚基制备了抗人Cl_s抗血清的基础上,设计了一个较简便的分离Cl_r亚基的方法,将抗人Cl_s抗血清经DEAE-纤维素层析纯化后,偶联到过碘酸活化的不溶性载体SephadexG-75上,制备成抗Cl_s免疫吸附剂,在Ca^(2+)存在下吸附人血清中的Cl_(rs)成分,再用EDTA螯合掉Ca^(2+),使Cl_r解离下来,从而获得了电泳纯的活性Cl_r亚基成分。 展开更多
关键词 补体 血清 分离
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