[目的]研究不同的胚龄、移植季节以及胚胎数量对转人乳铁蛋白基因(hLF)体细胞克隆山羊生产效率的影响.[方法]用奶山羊的转hLF基因成纤维细胞为供体细胞生产克隆胚胎,并以不同的胚龄、胚胎数量,在不同的季节移植给同期的受体山羊.[结果...[目的]研究不同的胚龄、移植季节以及胚胎数量对转人乳铁蛋白基因(hLF)体细胞克隆山羊生产效率的影响.[方法]用奶山羊的转hLF基因成纤维细胞为供体细胞生产克隆胚胎,并以不同的胚龄、胚胎数量,在不同的季节移植给同期的受体山羊.[结果]移植1细胞期和2-8细胞期胚胎受体羊的妊娠率(分别是17.95%和28.57%)、产羔率(分别是12.82%和14.29%)显著高于移植桑椹胚、囊胚的受体羊(3.70%和0,P〈0.05);转hLF基因克隆胚胎在秋季移植效率最高,虽然秋季和春季受体羊妊娠率(分别是19.57%和18.18%)与冬季(10.34%)差异不显著,但秋季受体羊产羔率(13.04%)显著高于冬季(1.72%,P〈0.05);虽然移植10-20枚克隆胚胎的受体羊妊娠率(18.18%)显著高于移植5-9枚胚胎的受体羊(7.89%),但是由于其流产率高,两者产羔率差异并不显著(7.89% vs 6.36%,P〉0.05).[结论]转基因克隆山羊胚胎移植试验的最适季节是秋季,最好移植激活后体外培养2 d内的胚胎.展开更多
[目的]本试验旨在探究PPARGC1A/NRF1/TFAM通路核心基因在湖羊性成熟前后的表达变化。[方法]选取体况良好和系谱清楚的雄性湖羊18只(3和9月龄,各9只),颈静脉采血后进行阉割处理。ELISA检测血样中睾酮(T)、瘦素、胰岛素及胰岛素样生长因子...[目的]本试验旨在探究PPARGC1A/NRF1/TFAM通路核心基因在湖羊性成熟前后的表达变化。[方法]选取体况良好和系谱清楚的雄性湖羊18只(3和9月龄,各9只),颈静脉采血后进行阉割处理。ELISA检测血样中睾酮(T)、瘦素、胰岛素及胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)的浓度;免疫组化法检测睾丸组织中PPARGC1A/NRF1/TFAM通路相关蛋白的表达定位; RT-qPCR和Western blot检测睾丸组织中PPARGC1A/NRF1/TFAM通路相关基因与蛋白的表达变化。[结果]与3月龄湖羊相比,9月龄湖羊外周血中T、瘦素、胰岛素及IGF-Ⅰ的浓度显著升高(P<0.05)。免疫组化法检测发现PPARGC1A、NRF1和TFAM蛋白在3月龄和9月龄湖羊睾丸组织的多种细胞内均呈时空特异性表达。此外,与3月龄湖羊相比,9月龄湖羊睾丸组织中PPARGC1A、NRF1和TFAM m RNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。[结论]PPARGC1A/RNF1/TFAM通路相关基因可能与湖羊睾丸发育和性成熟过程密切相关。展开更多
文摘[目的]研究不同的胚龄、移植季节以及胚胎数量对转人乳铁蛋白基因(hLF)体细胞克隆山羊生产效率的影响.[方法]用奶山羊的转hLF基因成纤维细胞为供体细胞生产克隆胚胎,并以不同的胚龄、胚胎数量,在不同的季节移植给同期的受体山羊.[结果]移植1细胞期和2-8细胞期胚胎受体羊的妊娠率(分别是17.95%和28.57%)、产羔率(分别是12.82%和14.29%)显著高于移植桑椹胚、囊胚的受体羊(3.70%和0,P〈0.05);转hLF基因克隆胚胎在秋季移植效率最高,虽然秋季和春季受体羊妊娠率(分别是19.57%和18.18%)与冬季(10.34%)差异不显著,但秋季受体羊产羔率(13.04%)显著高于冬季(1.72%,P〈0.05);虽然移植10-20枚克隆胚胎的受体羊妊娠率(18.18%)显著高于移植5-9枚胚胎的受体羊(7.89%),但是由于其流产率高,两者产羔率差异并不显著(7.89% vs 6.36%,P〉0.05).[结论]转基因克隆山羊胚胎移植试验的最适季节是秋季,最好移植激活后体外培养2 d内的胚胎.
文摘[目的]本试验旨在探究PPARGC1A/NRF1/TFAM通路核心基因在湖羊性成熟前后的表达变化。[方法]选取体况良好和系谱清楚的雄性湖羊18只(3和9月龄,各9只),颈静脉采血后进行阉割处理。ELISA检测血样中睾酮(T)、瘦素、胰岛素及胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)的浓度;免疫组化法检测睾丸组织中PPARGC1A/NRF1/TFAM通路相关蛋白的表达定位; RT-qPCR和Western blot检测睾丸组织中PPARGC1A/NRF1/TFAM通路相关基因与蛋白的表达变化。[结果]与3月龄湖羊相比,9月龄湖羊外周血中T、瘦素、胰岛素及IGF-Ⅰ的浓度显著升高(P<0.05)。免疫组化法检测发现PPARGC1A、NRF1和TFAM蛋白在3月龄和9月龄湖羊睾丸组织的多种细胞内均呈时空特异性表达。此外,与3月龄湖羊相比,9月龄湖羊睾丸组织中PPARGC1A、NRF1和TFAM m RNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。[结论]PPARGC1A/RNF1/TFAM通路相关基因可能与湖羊睾丸发育和性成熟过程密切相关。