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猪嗜血支原体PCR及荧光定量PCR检测方法的建立和比较
被引量：
4
1
作者
张长莹
张莉莉
+4 位作者
李玉峰
李文良
刘捷
陈闻
姜平
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期443-447,共5页
为了解猪嗜血支原体(Mycoplasma haemosuis)对猪群的感染情况并建立该病的检测方法,本研究根据GenBank登录的M.haemosuis 16S rRNA基因序列(FJ263944)设计合成PCR引物以及荧光定量PCR(FQ-PCR)引物和探针。以含16S rRNA基因的重组质粒为...
为了解猪嗜血支原体(Mycoplasma haemosuis)对猪群的感染情况并建立该病的检测方法,本研究根据GenBank登录的M.haemosuis 16S rRNA基因序列(FJ263944)设计合成PCR引物以及荧光定量PCR(FQ-PCR)引物和探针。以含16S rRNA基因的重组质粒为模板,通过对PCR反应条件的优化,建立检测M.haemosuis的PCR和FQ-PCR检测方法。结果表明,这两种检测方法均具有较好的敏感性和特异性,与常规方法相比,FQ-PCR方法的敏感性高1 000倍;用这两种PCR方法检测20份临床样品,常规PCR方法的阳性率为60%(12/20),而FQ-PCR方法的阳性率为75%(15/20)。这两种检测方法的建立为确定M.haemosuis在我国猪群的感染情况和建立该病动物模型提供有效的检测手段。
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关键词
猪嗜血支原体
常规PCR
荧光定量PCR
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职称材料
猪嗜血支原体酶标单抗阻断ELISA检测方法的建立
被引量：
3
2
作者
张长莹
李玉峰
姜平
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第11期1591-1597,共7页
为确定猪嗜血支原体(M.suis)在临床的感染情况和进行流行病学调查提供检测方法,本研究以纯化的猪嗜血支原体重组MSG1蛋白和辣根过氧化酶标记的MSG1蛋白单抗建立了检测猪嗜血支原体的阻断ELISA方法。经筛选确定,抗原最佳包被浓度为0.5μg...
为确定猪嗜血支原体(M.suis)在临床的感染情况和进行流行病学调查提供检测方法,本研究以纯化的猪嗜血支原体重组MSG1蛋白和辣根过氧化酶标记的MSG1蛋白单抗建立了检测猪嗜血支原体的阻断ELISA方法。经筛选确定,抗原最佳包被浓度为0.5μg.mL-1,待检血清最佳稀释度为1∶1,作用时间为37℃1.5h,酶标单抗最佳稀释度为1∶10 000,作用时间为37℃1h。通过对100份M.suis阴性血清阻断ELISA检测结果进行统计学分析,确定本方法的判定标准为当阻断率PI≥23.71%时判为阳性,PI≤36.35%时判为阴性,23.71%<PI<36.36%时判为可疑。敏感性、特异性和重复性试验证明该检测方法敏感性高、特异性强、可重复性好,可用于M.suis流行病学调查和疾病诊断。
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关键词
猪嗜血支原体
MSG1蛋白
酶标单抗
阻断ELISA
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职称材料
猪嗜血支原体猪体感染试验
被引量：
5
3
作者
王帅彪
李玉峰
+3 位作者
常晨
程王琨
马培培
邹垚
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期1645-1653,共9页
为研究猪嗜血支原体致病机制,将其感染健康猪和切脾猪,从临床症状、血液学和生物化学指标、菌血症、抗体水平以及细胞因子、病理剖检和组织学检查等方面系统研究猪嗜血支原体病的发病过程。结果显示,与不切脾猪相比,切脾猪体内的猪嗜血...
为研究猪嗜血支原体致病机制,将其感染健康猪和切脾猪,从临床症状、血液学和生物化学指标、菌血症、抗体水平以及细胞因子、病理剖检和组织学检查等方面系统研究猪嗜血支原体病的发病过程。结果显示,与不切脾猪相比,切脾猪体内的猪嗜血支原体含量(血液中含量1.0×108拷贝·mL-1)更高,维持时间更长。猪嗜血支原体血液中含量和白细胞计数、血细胞比容、红细胞计数和铁等指标显著相关。仅1头猪产生猪嗜血支原体抗体,3组猪血清中均没有检测到细胞因子IL-4和IFN-γ。本研究复制出猪嗜血支原体病病例,记录了该病的发展过程,为该病的病理机制、预防、诊断等方面的研究奠定基础。
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关键词
猪嗜血支原体
猪嗜血支原体病
致病机制
相关性
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职称材料
题名
猪嗜血支原体PCR及荧光定量PCR检测方法的建立和比较
被引量：
4
1
作者
张长莹
张莉莉
李玉峰
李文良
刘捷
陈闻
姜平
机构
南京农业大学动物疫病诊断与免疫重点开放实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期443-447,共5页
基金
公益性行业(农业)科研专项(200903036-10)
文摘
为了解猪嗜血支原体(Mycoplasma haemosuis)对猪群的感染情况并建立该病的检测方法,本研究根据GenBank登录的M.haemosuis 16S rRNA基因序列(FJ263944)设计合成PCR引物以及荧光定量PCR(FQ-PCR)引物和探针。以含16S rRNA基因的重组质粒为模板,通过对PCR反应条件的优化,建立检测M.haemosuis的PCR和FQ-PCR检测方法。结果表明,这两种检测方法均具有较好的敏感性和特异性,与常规方法相比,FQ-PCR方法的敏感性高1 000倍;用这两种PCR方法检测20份临床样品,常规PCR方法的阳性率为60%(12/20),而FQ-PCR方法的阳性率为75%(15/20)。这两种检测方法的建立为确定M.haemosuis在我国猪群的感染情况和建立该病动物模型提供有效的检测手段。
关键词
猪嗜血支原体
常规PCR
荧光定量PCR
Keywords
Mycoplasma haemosuis
conventional PCR
FQ-PCR
分类号
S852.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
猪嗜血支原体酶标单抗阻断ELISA检测方法的建立
被引量：
3
2
作者
张长莹
李玉峰
姜平
机构
南京农业大学动物疫病诊断与免疫重点开放实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第11期1591-1597,共7页
基金
公益性行业(农业)科研专项项目(200903036-10)
文摘
为确定猪嗜血支原体(M.suis)在临床的感染情况和进行流行病学调查提供检测方法,本研究以纯化的猪嗜血支原体重组MSG1蛋白和辣根过氧化酶标记的MSG1蛋白单抗建立了检测猪嗜血支原体的阻断ELISA方法。经筛选确定,抗原最佳包被浓度为0.5μg.mL-1,待检血清最佳稀释度为1∶1,作用时间为37℃1.5h,酶标单抗最佳稀释度为1∶10 000,作用时间为37℃1h。通过对100份M.suis阴性血清阻断ELISA检测结果进行统计学分析,确定本方法的判定标准为当阻断率PI≥23.71%时判为阳性,PI≤36.35%时判为阴性,23.71%<PI<36.36%时判为可疑。敏感性、特异性和重复性试验证明该检测方法敏感性高、特异性强、可重复性好,可用于M.suis流行病学调查和疾病诊断。
关键词
猪嗜血支原体
MSG1蛋白
酶标单抗
阻断ELISA
Keywords
Mycoplasma suis
MSG1 protein
monoclonal antibody
blocking ELISA
分类号
S852.62 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
猪嗜血支原体猪体感染试验
被引量：
5
3
作者
王帅彪
李玉峰
常晨
程王琨
马培培
邹垚
机构
南京农业大学动物疫病诊断与免疫重点开放实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期1645-1653,共9页
基金
公益性行业(农业)科研专项项目(200903036-10)
文摘
为研究猪嗜血支原体致病机制,将其感染健康猪和切脾猪,从临床症状、血液学和生物化学指标、菌血症、抗体水平以及细胞因子、病理剖检和组织学检查等方面系统研究猪嗜血支原体病的发病过程。结果显示,与不切脾猪相比,切脾猪体内的猪嗜血支原体含量(血液中含量1.0×108拷贝·mL-1)更高,维持时间更长。猪嗜血支原体血液中含量和白细胞计数、血细胞比容、红细胞计数和铁等指标显著相关。仅1头猪产生猪嗜血支原体抗体,3组猪血清中均没有检测到细胞因子IL-4和IFN-γ。本研究复制出猪嗜血支原体病病例,记录了该病的发展过程,为该病的病理机制、预防、诊断等方面的研究奠定基础。
关键词
猪嗜血支原体
猪嗜血支原体病
致病机制
相关性
Keywords
Mycoplasma suis
porcine eperythrozoonosis
pathomechanism
correlations
分类号
S852.62 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪嗜血支原体PCR及荧光定量PCR检测方法的建立和比较
张长莹
张莉莉
李玉峰
李文良
刘捷
陈闻
姜平
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
猪嗜血支原体酶标单抗阻断ELISA检测方法的建立
张长莹
李玉峰
姜平
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
猪嗜血支原体猪体感染试验
王帅彪
李玉峰
常晨
程王琨
马培培
邹垚
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
5
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职称材料
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