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基于猪体外仿生消化技术研究聚乙二醇对高单宁高粱养分降解效率的影响
1
作者 李旺 顾晓明 +2 位作者 安冬 朱伟云 潘龙 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期907-912,共6页
[目的]本文旨在探究聚乙二醇对高粱养分降解效率的影响,并筛选聚乙二醇的适宜添加剂量。[方法]通过体外仿生消化技术模拟高粱原料在猪前肠道的化学酶消化作用和后肠道的微生物发酵过程,设计完全随机试验,在高单宁高梁(单宁含量为50 mg&#... [目的]本文旨在探究聚乙二醇对高粱养分降解效率的影响,并筛选聚乙二醇的适宜添加剂量。[方法]通过体外仿生消化技术模拟高粱原料在猪前肠道的化学酶消化作用和后肠道的微生物发酵过程,设计完全随机试验,在高单宁高梁(单宁含量为50 mg·g^(-1)儿茶素当量)原料中添加0、25、50、100和250 mg·g^(-1)的聚乙二醇为试验处理,每个处理5个重复,测定养分降解效率。[结果]聚乙二醇显著降低高粱原料中可检测的缩合单宁含量(P<0.05)。在胃蛋白酶、胃蛋白酶-胰液素或胃蛋白酶-胰液素-微生物发酵作用下,随着聚乙二醇添加比例的增加,高粱的风干物质、总能和氮素的消失率均呈现线性增加(P<0.05);其中25 mg·g^(-1)聚乙二醇处理组的养分消失率显著高于对照组(P<0.05),但是显著低于其他处理组(P<0.05);除胃蛋白酶处理过程中的氮素消失率外,50、100和250 mg·g^(-1)的聚乙二醇(聚乙二醇添加量/高粱单宁含量比值分别为1、2和5)处理组之间的高粱养分消失率无显著差异(P>0.05)。[结论]基于体外仿生消化技术模拟猪的化学酶和微生物降解2种消化方式,聚乙二醇可以显著提高高单宁高粱养分的体外消失率,且在本试验条件下,聚乙二醇添加量应与高粱中单宁含量等比例为宜。 展开更多
关键词 高单宁高粱 聚乙二醇 养分消失率 化学酶消化 微生物降解
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2′-岩藻糖基乳糖缓解LPS诱导的细胞炎症应答和屏障损伤的功能研究 被引量：2
2
作者 孙伟乐 李轩 +1 位作者 慕春龙 朱伟云 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1130-1138,共9页
[目的]本文旨在探究2′-岩藻糖基乳糖(2′-FL)对脂多糖(LPS)诱导的仔猪小肠上皮J2细胞系(IPEC-J2)炎症和屏障功能的影响。[方法]以IPEC-J2为细胞模型,先通过预试验对LPS和2′-FL的处理浓度分别进行筛选,最终选择100μg·mL^(-1)LPS... [目的]本文旨在探究2′-岩藻糖基乳糖(2′-FL)对脂多糖(LPS)诱导的仔猪小肠上皮J2细胞系(IPEC-J2)炎症和屏障功能的影响。[方法]以IPEC-J2为细胞模型,先通过预试验对LPS和2′-FL的处理浓度分别进行筛选,最终选择100μg·mL^(-1)LPS诱导细胞促炎反应,然后通过不同浓度(20和100μg·mL^(-1))2′-FL干预来探究其对LPS诱导IPEC-J2的促炎反应和屏障功能受损的调节作用。试验分为6组:对照组(CON)、LPS组(100μg·mL^(-1)LPS)、FL20组(20μg·mL^(-1)2′-FL)、FL100组(100μg·mL^(-1)2′-FL)、SF20组(100μg·mL^(-1)LPS+20μg·mL^(-1)2′-FL)和SF100组(100μg·mL^(-1)LPS+100μg·mL^(-1)2′-FL)。试验处理24 h后测定各组细胞活力、紧密连接蛋白、炎症因子和炎症相关通路基因的表达水平,通过Western blot检测NF-κB、Myd88、Claudin-1和Occludin蛋白的相对表达水平。[结果]与CON组相比,LPS组显著降低IPEC-J2细胞活力(P<0.05),显著上调促炎因子IL-6、IL-8及炎症通路NF-κB、Myd88和CD14基因的表达(P<0.05),显著下调抗炎因子IL-4基因的表达(P<0.05),显著下调紧密连接蛋白Claudin-1、Claudin-3、Claudin-4、ZO-1、ZO-2和Occludin基因的表达(P<0.05)。与CON组相比,FL20组还显著提高Claudin-1、Claudin-3、Claudin-4和ZO-2基因的表达水平(P<0.05)。与LPS组相比,SF20组和SF100组显著提高IPEC-J2细胞活力(P<0.05),显著下调IL-8及上调IL-4和IL-10基因的表达(P<0.05),显著下调NF-κB、Myd88和CD14基因的表达(P<0.05),显著上调Claudin-1、Claudin-3、Claudin-4、ZO-1、ZO-2、Occludin基因的表达(P<0.05)。Western blot结果显示,与CON组相比,只有LPS组的NF-κB蛋白显著上调(P<0.05)。与LPS组相比,SF20组的NF-κB、Myd88蛋白表达量降低,Claudin-1和Occludin蛋白表达量升高,但差异均不显著。[结论]LPS处理促进IPEC-J2细胞的促炎反应并造成屏障功能受损,2′-FL干预减弱了LPS刺激的促炎信号通路,改善了LPS引起的屏障功能受损。 展开更多
关键词 2′-岩藻基乳糖 猪小肠上皮细胞 紧密连接蛋白 炎症因子
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不同尿素添加水平对育肥湖羊瘤胃发酵及微生物菌群结构的影响 被引量：12
3
作者 孙美杰 姜君 +3 位作者 徐诣轩 李志鹏 申军士 朱伟云 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期323-332,共10页
[目的]本试验旨在研究低蛋白日粮添加不同水平尿素对育肥湖羊瘤胃发酵及微生物菌群结构的影响。[方法]70只育肥公湖羊(23.6~26.0 kg)随机分为5组,分别饲喂以下日粮:正常豆粕(SBM,170 g·kg^(-1)),低豆粕(40 g·kg^(-1))基础上添... [目的]本试验旨在研究低蛋白日粮添加不同水平尿素对育肥湖羊瘤胃发酵及微生物菌群结构的影响。[方法]70只育肥公湖羊(23.6~26.0 kg)随机分为5组,分别饲喂以下日粮:正常豆粕(SBM,170 g·kg^(-1)),低豆粕(40 g·kg^(-1))基础上添加0、10、20和30 g·kg^(-1)尿素(U0、U10、U20、U30)。试验预饲期1周,正试期8周。采集瘤胃液测定发酵参数和功能菌群数量,同时扩增细菌16S rRNA基因V3—V4区进行Illumina-MiSeq测序。[结果]与U10组相比,U20和U30组瘤胃液pH值显著升高(P<0.05)。氨态氮(NH_(3)-N)浓度随尿素添加量的增加显著升高(P<0.05)。与U0和U30组相比,SBM、U10和U20组总菌、甲烷菌和原虫数量显著升高(P<0.05)。Illumina-MiSeq测序结果显示U30组Shannon指数显著高于U0和U10组(P<0.05),但Chao1指数没有差异(P>0.05)。U10组Bacteroidetes的丰度显著高于SBM、U20和U30组(P<0.05),但Firmicutes却显著降低(P<0.05)。各组的主要优势菌属为Prevotella 1、Muribaculaceae norank、Rikenellaceae RC9 gut group和Christensenellaceae R-7 group。U10组Prevotella 1的丰度显著高于U20和U30组(P<0.05),而Rikenellaceae RC9 gut group、Christensenellaceae R-7 group和Ruminococcaceae NK4A214 group显著低于U30组(P<0.05)。RDA结果显示pH值、NH_(3)-N和总挥发性脂肪酸(TVFA)对瘤胃不同菌属的影响程度存在差异,其中pH值的影响最显著(P<0.05)。[结论]在低蛋白日粮中添加适量尿素(10 g·kg^(-1))可增加育肥湖羊瘤胃功能菌群数量,促进相关代谢产物的产生与利用,但日粮氮不足或尿素添加水平过高则会降低瘤胃功能菌群数量和改变细菌群落组成。 展开更多
关键词 尿素 育肥 湖羊 瘤胃发酵 功能菌群 菌群结构
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极低蛋白日粮补充不同形式氮营养素对生长猪回肠食糜菌群、代谢产物和屏障功能的影响 被引量：10
4
作者 刘壮 慕春龙 +3 位作者 彭宇 彭燮 车炼强 朱伟云 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期526-534,共9页
[目的]本试验旨在研究极低蛋白(ELP)日粮下,补充不同形式氮营养素(氨基酸或酪蛋白)对生长猪回肠微生物、代谢产物和屏障功能的影响。[方法]试验选用80头PIC阉公猪(体质量约15.57 kg,48日龄),随机分为4组:中等蛋白组(MP)、低蛋白组(LP)... [目的]本试验旨在研究极低蛋白(ELP)日粮下,补充不同形式氮营养素(氨基酸或酪蛋白)对生长猪回肠微生物、代谢产物和屏障功能的影响。[方法]试验选用80头PIC阉公猪(体质量约15.57 kg,48日龄),随机分为4组:中等蛋白组(MP)、低蛋白组(LP)、极低蛋白+氨基酸组(ELP-AA)和极低蛋白+酪蛋白组(ELP-CAS),日粮粗蛋白(CP)水平分别为17%、15%、13%和13%。每个处理5个重复,每个重复4头仔猪。试验期28 d。MP和LP两组添加必需氨基酸(AA),ELP-AA组添加非必需AA以达到LP组日粮水平,ELP-CAS组使用3%酪蛋白部分替代ELP-AA组的单体AA,使其满足营养需要。于第29天每个重复挑选1头接近栏平均体质量的猪屠宰,采集回肠食糜和肠道组织样品,用于各项指标测定。[结果]与MP组相比,ELP-AA组回肠食糜中双歧杆菌属(Bifidobacterium)、乳酸杆菌属(Lactobacillus)和消化链球菌属(Peptostreptococcus)的数量显著降低(P<0.05),短链脂肪酸、氨态氮和生物胺的含量均显著下降(P<0.05),而补充酪蛋白后,乙酸、丁酸、氨态氮、腐胺和精胺的含量得到显著恢复(P<0.05)。基因表达方面,与LP组相比,ELP-AA组部分肠道屏障功能相关基因(MUC-1、MUC-2和Occludin)的表达量均显著下调(P<0.05),而MUC-1和Occludin的表达量在ELP-CAS组和MP或LP组之间无显著差异(P>0.05)。相关性分析结果表明,Lactobacillus数量与丁酸和生物胺含量、MUC-1、MUC-2和Occludin基因表达量显著正相关。[结论]饲喂极低蛋白日粮补充单体氨基酸对回肠微生物数量、代谢以及肠道组织屏障均产生不利影响,而补充酪蛋白能部分改善回肠有益微生物的生长并恢复部分肠道屏障相关基因的表达,提示在极低蛋白质水平下,补充酪蛋白对维持机体正常氮利用、肠道微生物生长代谢和肠道屏障功能具有重要作用。 展开更多
关键词 蛋白水平 氮营养素 肠道微生物 屏障功能
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不同浓度硫化氢对肠上皮细胞炎症、线粒体功能和氧化应激的影响 被引量：4
5
作者 张夏薇 慕春龙 朱伟云 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期157-163,共7页
[目的]本试验使用硫氢化钠(NaHS,硫化氢供体)处理Caco-2细胞,研究硫化氢(H2S)对肠上皮细胞炎症、氧化应激和线粒体硫化物代谢功能的影响,探究H 2S影响肠道健康的可能机制。[方法]试验分为4个组,分别为对照组、低(0.1 mmol·L^-1)、... [目的]本试验使用硫氢化钠(NaHS,硫化氢供体)处理Caco-2细胞,研究硫化氢(H2S)对肠上皮细胞炎症、氧化应激和线粒体硫化物代谢功能的影响,探究H 2S影响肠道健康的可能机制。[方法]试验分为4个组,分别为对照组、低(0.1 mmol·L^-1)、中(1 mmol·L^-1)、高(2 mmol·L^-1)浓度的NaHS组,处理24 h后测定各组细胞活力、炎症细胞因子基因表达、硫化物代谢酶基因表达和氧化应激指标。[结果]与对照组相比,NaHS能够增强肠上皮细胞活力,2 mmol·L^-1 NaHS显著上调肿瘤坏死因子α(TNF-α)的基因表达水平(P<0.05),0.1 mmol·L^-1 NaHS上调线粒体硫化物代谢酶硫醌氧化还原酶(SQR)、硫代硫酸盐硫转移酶(TST)、硫双加氧酶(ETHE1)和亚硫酸氧化酶(SUOX)的基因表达,而2mmol·L-1 NaHS下调SQR的基因表达,显著提高丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性(P<0.05),显著降低超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05),0.1mmol·L^-1 NaHS显著提高MDA含量(P<0.05),1mmol·L^-1 NaHS则显著降低SOD活性(P<0.05)。[结论]低浓度H 2S能增强细胞活力,提高线粒体硫化物代谢能力和氧化应激水平。高浓度H 2S能促进炎症反应,提高氧化应激水平,影响线粒体硫化物代谢能力,可能对肠道健康产生不利影响。 展开更多
关键词 硫化氢 氧化应激 炎症 线粒体
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日粮添加尿素对育肥湖羊空肠菌群结构及氨和尿素转运蛋白表达的影响 被引量：1
6
作者 孙美杰 郑文金 +1 位作者 申军士 朱伟云 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期345-353,共9页
[目的]本试验旨在探究日粮添加尿素对育肥湖羊空肠发酵、菌群结构以及氨和尿素转运蛋白表达的影响。[方法]将42只3月龄育肥公湖羊(约24.3 kg)随机均分为3个处理组,在饲喂基础日粮的基础上分别添加0 g·kg-1(U0组)、10 g·kg-1(... [目的]本试验旨在探究日粮添加尿素对育肥湖羊空肠发酵、菌群结构以及氨和尿素转运蛋白表达的影响。[方法]将42只3月龄育肥公湖羊(约24.3 kg)随机均分为3个处理组,在饲喂基础日粮的基础上分别添加0 g·kg-1(U0组)、10 g·kg-1(U10组)、30 g·kg^(-1)(U30组)尿素。试验预饲期1周,正试期10周。试验结束每组随机选取6只屠宰,采集空肠内容物,测定发酵参数和定量总菌,并利用Illumina MiSeq测序分析空肠细菌组成;采集空肠上皮组织样品检测氨转运蛋白b(Rhbg)、氨转运蛋白c(Rhcg)和尿素转运蛋白B(UT-B)基因mRNA表达。[结果]与U0组相比,U10和U30组空肠氨态氮含量显著升高(P<0.05)。与U0组相比,U10组总挥发性脂肪酸和乙酸含量显著降低,U30组丁酸和异戊酸含量相较于U10组显著升高(P<0.05)。相较于U0组,U10和U30组的总菌数量显著升高(P<0.05)。Illumina-MiSeq测序结果显示,添加尿素并未影响空肠Chao 1、ACE、Shannon和Simpson指数(P>0.05),PCoA分析结果显示各组间空肠细菌群落组成明显区分。添加尿素对湖羊空肠中细菌门水平相对丰度无显著影响,但细菌属水平相对丰度存在差异。各处理组主要优势菌属为Lachnospiraceae NK3A20 group、Ruminococcus 2、Acetitomaculum和Bifidobacteriaceae unclassified,其中Lachnospiraceae NK3A20 group和Ruminococcus 2的相对丰度均在U10组中最高。此外,U10组Ruminococcus gauvreauii group和Olsenella的相对丰度相较于U30组显著升高(P<0.05)。与U0和U30组相比,U10组空肠上皮Rhbg基因mRNA表达水平显著上调(P<0.05);Rhcg基因和UT-B基因表达水平随尿素添加水平的升高逐渐降低,但差异不显著(P>0.05)。[结论]日粮补充适宜尿素(10 g·kg^(-1))可提高空肠内氨态氮含量,促进氮利用细菌的生长定殖,改善菌群结构。此外,添加尿素会影响空肠上皮Rhbg基因的表达,但不影响Rhcg基因和UT-B基因的表达。 展开更多
关键词 湖羊 尿素 菌群结构 氨转运蛋白 尿素转运蛋白
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