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题名猪圆环病毒3型LAMP检测方法的建立与应用
被引量：16
- 1
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作者
姜辰龙
严秀文
张日腾
李勇
姜平
白娟
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机构
南京农业大学生命科学学院
南京农业大学动物医学院农业部动物细菌学重点实验室
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出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期1314-1319,共6页
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基金
国家自然科学基金(31672565
31502082)
+1 种基金
中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(KJQN201616)
国家生猪现代产业体系建设专项(CARS-36)
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文摘
为快速诊断和检测猪圆环病毒3型(PCV3),本研究根据其ORF2基因保守序列,设计特异性引物,并通过Bst DNA聚合酶、引物最佳浓度比例、Mg^(2+)、dNTPs和甜菜碱浓度及反应条件优化,建立了环介导等温核酸扩增(LAMP)检测方法。结果显示,59℃恒温扩增36min即可出现梯形条带,且产物亦可通过SYBR GreenⅠ染色进行判断。该方法最低检测限为1.0×10~1copies·μL^(-1),与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)及猪圆环病毒1型和2型(PCV1、PCV2)等均无交叉反应。检测68份呼吸道病猪淋巴结样品,PCV3阳性率占30.9%,与PCR检测结果符合率为95.6%(65/68)。相对传统PCR方法而言,该方法敏感特异,简便快速,可用于PCV3检测和临床诊断。
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关键词
猪圆环病毒3型
RT-LAMP
检测
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Keywords
PCV3
RT-LAMP
detection
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分类号
S852.659.2
[农业科学—基础兽医学]
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题名猪链球菌LuxS/AI-2型密度感应系统研究进展
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作者
王瑜欣
汪洋
易力
陆承平
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机构
河南科技大学动物科技学院
洛阳师范学院生命科学学院
南京农业大学动物医学院农业部动物细菌学重点实验室
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出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期223-230,共8页
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基金
国家自然科学基金(31772761
31540095
+2 种基金
31201910)
河南省高校创新人才基金(14HASTIT024)
河南省自然科学基金(162300410067)
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文摘
密度感应(quorum sensing,QS)系统在细菌中普遍存在,能够通过一种或多种信号分子来影响多个基因的转录表达,从而协调多种细菌病原体的群体反应。该系统存在多种类型,其中LuxS/AI-2型是研究最热的系统之一,luxS作为一个高度保守的基因,参与调控多种基因的表达,从而调节细菌的生长和毒力等多种生命活动,使其适应不同的环境。LuxS蛋白分解形成同型半胱氨酸和4,5-二羟基-2,3-戊二酮(4,5-dihydroxy-2,3-pentanedione,DPD),DPD通过自环化形成自诱导分子autoinducer 2(AI-2)。猪链球菌(Streptococcus suis,SS)作为一种重要的人兽共患病原菌,研究其LuxS/AI-2型密度感应系统,利用LuxS/AI-2系统对猪链球菌病进行预防和治疗,具有重要意义。本文着重从SS的QS系统一般机制以及LuxS/AI-2系统的发现、结构、代谢作用、表达调控等方面对该菌的相关研究进行了综述。
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关键词
密度感应系统
LuxS/AI-2系统
猪链球菌
调控
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Keywords
quorum sensing system
LuxS/AI-2 system
Streptococcus suis
regulation
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分类号
S852.611
[农业科学—基础兽医学]
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题名副猪格拉瑟菌6个候选抗原对小鼠的免疫特性分析
被引量：1
- 3
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作者
伭婷
杨凯一
蔡金双
耿琰
李玉峰
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机构
南京农业大学动物医学院农业部动物细菌学重点实验室
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出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期2073-2082,共10页
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基金
“十四五”国家重点研发计划(2022YFD1800902)。
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文摘
旨在获得具有良好免疫效果的候选抗原,本研究原核表达了副猪格拉瑟菌6个具有潜在保护力的蛋白,对小鼠免疫后进行攻毒,以期筛选获得具有免疫保护效果较好的候选抗原,从而为开发具有交叉保护作用的副猪格拉瑟菌亚单位疫苗奠定基础。63只BALB/c小鼠随机平均分为9组:HPSNAG-1330、CyaY、HPSNAG-0978、HPSNAG-0140、AfuA以及Fe^(3+)ABC-tbp 6个亚单位疫苗组、G.parasuis-5灭活苗组、攻毒对照组和空白组;亚单位疫苗组每种对应蛋白各免疫50μg·只^(-1),灭活苗组免疫4×10^(9)CFU,一免与二免间隔14 d,二免14 d后攻毒,副猪格拉瑟菌Nakasaki菌株攻毒剂量为1.26×10^(9)CFU。在二免14 d后检测特异性抗体水平、淋巴细胞增殖和IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ和TNF-α的表达,攻毒后观察小鼠的临床症状并观察肺、脾的组织病理变化。免疫组小鼠均能产生体液免疫反应;淋巴细胞增殖试验显示:除rAfuA外,其它重组蛋白均能刺激灭活苗组中小鼠淋巴细胞显著增殖(P<0.05),而6个重组蛋白对相应的亚单位疫苗组和空白组小鼠淋巴细胞增殖均不显著;同时,CyaY组和HPSNAG-1330组小鼠机体的炎性反应和脾、肺的损伤程度相对温和,综合评价效果优于灭活苗组。本研究通过小鼠免疫保护试验筛选出CyaY和HPSNAG-1330两个具有免疫保护性的候选抗原,为后续开展多个抗原的联合免疫和猪体试验提供了素材。
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关键词
副猪格拉瑟菌
亚单位疫苗
免疫效果评价
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Keywords
Glaesserella parasuis
recombinant subunit vaccine
evaluation of the immune effect
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分类号
S858.285.1
[农业科学—临床兽医学]
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