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题名制备大肠杆菌菌蜕的方法比较
被引量：2
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作者
袁橙
郭长明
左伟勇
郝福星
左沁丹
蔺辉星
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机构
江苏农牧科技职业学院动物医学院
南京农业大学动物医学院/教育部动物健康与食品安全国际合作联合实验室/农业部动物细菌学重点实验室
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出处
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2020年第2期410-416,共7页
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基金
江苏省高等学校自然科学研究面上项目(17KJB230003)
江苏省高校优秀科技创新团队项目(201753)
江苏农牧科技职业学院科研项目(NSF201605)。
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文摘
为进一步研究大肠杆菌菌蜕的制备技术,以pBV221、pCold IV和pETDuet1载体为基础构建了表达噬菌体E基因的溶菌质粒,并利用pETDuet1的2个多克隆位点构建了同时表达E基因和金黄色葡萄球菌核酸酶A的双表达溶菌质粒。经检测,pBV221-E/DH5α组和pCold-E/BL21组的裂解效率最高,但pCold-E/BL21组的裂解起始时间晚于其他几组。诱导剂的浓度对pETDuet1-E-SNA/BL21(DE3)的裂解效率有较大影响。电泳结果显示,随着E基因的表达,细菌DNA逸出膜外,同时金黄色葡萄球菌核酸酶A将DNA降解为250 bp以下的小片段。除pBV221-E/BL21组外,β-丙内酯可实现对其他试验组菌蜕的完全灭活。电镜观察发现,几组菌蜕在结构上并无明显差别。与对照菌相比,菌蜕结构完整,电子密度低且不均匀,细胞膜有不同程度的皱缩。
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关键词
菌蜕
大肠杆菌
E基因
金黄色葡萄球菌核酸酶A
裂解效率
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Keywords
bacterial ghost
Escherichia coli
gene E
Staphylococcus aureus nuclease A
lysis efficiency
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分类号
S852.52
[农业科学—基础兽医学]
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