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天蚕素类抗菌肽CLP的设计及其活性测定 被引量:7
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作者 王臣 张巫凡 +3 位作者 牛明福 郭香玲 李德元 陈溥言 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期600-604,共5页
为设计研发新型天蚕素类抗菌肽(Cecropin-like antibacterial peptide,CLP),本研究参照抗菌肽Cecropin P1的作用机理和氨基酸组成,通过人工方法设计合成CLP,并分别测定其体外和体内抗菌活性。体外抑菌试验结果显示,新型CLP对金黄色葡... 为设计研发新型天蚕素类抗菌肽(Cecropin-like antibacterial peptide,CLP),本研究参照抗菌肽Cecropin P1的作用机理和氨基酸组成,通过人工方法设计合成CLP,并分别测定其体外和体内抗菌活性。体外抑菌试验结果显示,新型CLP对金黄色葡萄球菌(ATCC29213)、禽多杀性巴氏杆菌(CVCC474)、鸡白痢沙门氏菌(ATCC10398)、鸡致病性大肠杆菌O1均具有良好的抑菌活性,对这4种细菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为6.25μg/mL、1.56μg/mL、3.12μg/mL和6.25μg/mL。酸稳定性试验显示,新型CLP在pH值为6-8时活性最高,热稳定性试验显示新型CLP于100℃加热2 h后仍具有抑菌活性。在对鸡白痢沙门氏菌感染雏鸡的体内疗效试验中,新型CLP显示了良好的治疗效果。本研究为临床上设计有效的天蚕素类抗菌肽提供了参考数据。 展开更多
关键词 抗菌肽 CECROPIN P1 抑菌活性 热酸稳定性 体内疗效
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江苏省猪伪狂犬病病毒强毒株的部分基因进化分析与致病性研究 被引量:5
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作者 孙海凤 董静 +3 位作者 姜辰龙 孙涛 白娟 姜平 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期283-287,共5页
为研究目前引起江苏省免疫猪场暴发的伪狂犬病病原的毒力变化,本研究通过细胞分离从江苏某猪场发病猪病料样品中获得一株病毒株,将其命名为PRV NJ02,该病毒株的gC和gD基因推导的氨基酸序列与之前报道的病毒株相比分别有7个与2个氨基酸... 为研究目前引起江苏省免疫猪场暴发的伪狂犬病病原的毒力变化,本研究通过细胞分离从江苏某猪场发病猪病料样品中获得一株病毒株,将其命名为PRV NJ02,该病毒株的gC和gD基因推导的氨基酸序列与之前报道的病毒株相比分别有7个与2个氨基酸的插入,且g C和g D基因进化树结果显示,该分离株位于相对独立的分支,与传流病毒株PRV LA亲缘关系较远,而与亚洲分离株亲缘关系较近。将PRV NJ02与PRV LA病毒株分别以相同剂量感染100日龄健康猪,结果显示,PRV NJ02分离株滴鼻感染组猪出现明显临床症状,且于感染后6d内全部死亡,其组织病理变化明显,而PRV LA株感染组猪仅表现轻微体温变化和呼吸道症状,其组织病理变化轻微,表明PRV NJ02分离株具有较强的致病性。感染猪各脏器组织中PRV病毒载量结果显示,NJ02株感染猪脑、肺脏和肝脏组织中的病毒含量均高于LA株感染猪的相应组织。以上结果表明,分离株PRV NJ02较传统病毒株PRV LA来说,致病性增强,毒力明显增加。该研究可为江苏省PRV流行株病原学研究提供参考,提示须重视PRV的变异监测。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 分离 鉴定
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2016年江苏省部分猪场猪伪狂犬病血清流行病学调查 被引量:15
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作者 杨珊珊 徐璇 +3 位作者 孙涛 白娟 李玉峰 姜平 《中国动物检疫》 CAS 2017年第8期17-19,共3页
2011年底,我国再次暴发猪伪狂犬病疫情,并造成严重经济损失。本研究采集2016年江苏省13个地市56个规模猪场的1 741份猪血清,采用伪狂犬病病毒(PRV)gE-ELISA、gB-ELISA抗体检测试剂盒进行血清学流行病学调查。调查结果显示:猪场PRV野毒... 2011年底,我国再次暴发猪伪狂犬病疫情,并造成严重经济损失。本研究采集2016年江苏省13个地市56个规模猪场的1 741份猪血清,采用伪狂犬病病毒(PRV)gE-ELISA、gB-ELISA抗体检测试剂盒进行血清学流行病学调查。调查结果显示:猪场PRV野毒抗体阳性率为94.6%(53/56),血清gE抗体阳性率为43.2%,其中苏北地区显著高于苏中和苏南地区;公猪野毒感染阳性率为55%,后备母猪野毒感染阳性率高达69.4%;经产母猪野毒感染阳性率为44%,gE抗体阳性率与母猪胎次密切相关。结果表明:猪伪狂犬病在江苏省流行依然广泛,野毒感染较为严重,尤其是苏北地区;应重点关注种猪群,并加强伪狂犬病的疫苗免疫和抗体检测,从而更好地防控该病。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 流行病学调查 血清学 江苏省
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法氏囊活性五肽BP5特异性结合肽的筛选及鉴定 被引量:3
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作者 王臣 郭香玲 +5 位作者 李小康 汪洋 张春杰 吴庭才 李德元 陈溥言 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期966-970,共5页
为鉴定与具有免疫调节功能和抗肿瘤潜能的法氏囊活性五肽(BP5)特异性结合的多肽,本研究利用噬菌体展示技术,以BP5-BSA为靶分子,对噬菌体随机12肽库进行4轮亲和筛选,结合ELISA鉴定和竞争抑制试验,筛选出3个能够特异性与BP5结合的噬菌体... 为鉴定与具有免疫调节功能和抗肿瘤潜能的法氏囊活性五肽(BP5)特异性结合的多肽,本研究利用噬菌体展示技术,以BP5-BSA为靶分子,对噬菌体随机12肽库进行4轮亲和筛选,结合ELISA鉴定和竞争抑制试验,筛选出3个能够特异性与BP5结合的噬菌体阳性克隆。测序结果显示,其编码的12肽序列分别为:PINMQTLNCMAA(P2-12)、GCTLNPMSDLLG(P6-12)和MSSTLNGMLNSL(P7-12),其核心基序为TLNXM。通过人工合成P2-12、P6-12、P7-12多肽,并采用MTT法检测其对BP5抗肿瘤细胞增殖能力的影响,结果显示,P2-12和P7-12肽在0.2μg/m L^20μg/m L浓度下,P6-12肽在2μg/m L^20μg/m L浓度下均能够抑制BP5抗小鼠WEHI-231 B淋巴瘤细胞增殖作用,其中P2-12在20μg/m L浓度下抑制作用最为显著(p<0.01)。此外,p53荧光素酶活性检测结果显示,这3种BP5结合肽在实验浓度下均能够下调BP5促p53基因转录的活性。以上结果表明,这3种BP5特异性结合肽具有下调BP5抗肿瘤活性。本研究为进一步研究BP5抗肿瘤细胞增殖作用的机制提供了相关的实验依据。 展开更多
关键词 法氏囊 活性五肽 噬菌体随机肽库 抗肿瘤 结合肽
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重组免疫融合肽Tα1-BP5的表达及其免疫佐剂特性研究 被引量:2
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作者 王臣 张巫凡 +3 位作者 杨静 郭香玲 李德元 陈溥言 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期326-330,共5页
胸腺素α1(Tα1)和法氏囊活性五肽(BP5)均具有重要的免疫学功能,但二者在蛋白水平上的联合应用尚未见报道。为探究重组表达融合肽Tα1-BP5(r Tα1-BP5)是否具有免疫佐剂特性,本实验设计合成融合肽Tα1-BP5基因,将其克隆至p ET-32a中进... 胸腺素α1(Tα1)和法氏囊活性五肽(BP5)均具有重要的免疫学功能,但二者在蛋白水平上的联合应用尚未见报道。为探究重组表达融合肽Tα1-BP5(r Tα1-BP5)是否具有免疫佐剂特性,本实验设计合成融合肽Tα1-BP5基因,将其克隆至p ET-32a中进行原核表达,并采用MTT法检测其体外活性。同时以rTα1-BP5联合H9N2型禽流感病毒(AIV)灭活疫苗免疫小鼠,检测免疫后小鼠的HI抗体、IgG抗体亚型和细胞因子(IL-4和IFN-γ)的分泌水平,并通过攻毒试验评价其对小鼠的免疫保护作用。结果显示,rTα1-BP5在大肠杆菌中获得可溶性表达;rTα1-BP5能够增强机体免疫后HI抗体、平衡IgG1和IgG2a抗体、提高Th2型(IFN-γ)和Th1(IL-4)型细胞因子的分泌水平,表明rTα1-BP5能够同时增强机体体液和细胞免疫应答。动物免疫保护试验结果显示rTα1-BP5有助于鼠肺脏中H9N2型AIV的清除。以上结果提示,rTα1-BP5具有良好的免疫佐剂的潜能。本研究为新型疫苗佐剂的研究开发奠定了基础。 展开更多
关键词 胸腺素Tα1 法氏囊活性五肽BP5 融合表达 免疫佐剂
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法氏囊新分离活性肽种类及生物学功能研究进展 被引量:3
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作者 张聪 王臣 陈溥言 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1888-1890,1895,共4页
法氏囊( Bursa of fabricius ,BF)是禽类特有的体液免疫的中枢淋巴器,是B淋巴细胞增殖分化的场所. 其中,三肽囊素( BS) Lys-His-Gly-NH2 是法氏囊组织中提取的第一个活性肽,是法氏囊的重要活性组成成分,能提高机体免疫系统功能,而... 法氏囊( Bursa of fabricius ,BF)是禽类特有的体液免疫的中枢淋巴器,是B淋巴细胞增殖分化的场所. 其中,三肽囊素( BS) Lys-His-Gly-NH2 是法氏囊组织中提取的第一个活性肽,是法氏囊的重要活性组成成分,能提高机体免疫系统功能,而且对哺乳动物也具有重要的免疫学活性及生理作用[1-4]. 以往的研究主要集中在囊素的研究,近年来,随着质谱技术在蛋白质分离鉴定方面的广泛应用,法氏囊组织中陆续分离鉴定出多条生物活性肽,在免疫学活性功能及作用机制方面均有重大突破. 本文旨在对新分离法氏囊活性肽的种类及免疫学功能做一个综述,并对应用前景进行展望. 展开更多
关键词 生物活性肽 分离鉴定 生物学功能 种类 机体免疫系统功能 免疫学活性 细胞增殖分化 免疫学功能
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法氏囊活性肽-Ⅱ对肿瘤细胞增殖的抑制作用及其可能机制 被引量:1
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作者 郭香玲 王臣 +3 位作者 李小康 汪洋 吴庭才 陈溥言 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期22-27,共6页
目的:研究法氏囊活性肽(Bursal-derived pentapeptide,BPP)-Ⅱ对肿瘤细胞增殖的抑制作用及其可能的作用机制。方法:采用不同质量浓度(0.02、0.2、2、20μg/ml)的BPP-Ⅱ分别处理小鼠B细胞淋巴瘤细胞WEHI-231、人鼻咽癌细胞CNE、大鼠肝癌... 目的:研究法氏囊活性肽(Bursal-derived pentapeptide,BPP)-Ⅱ对肿瘤细胞增殖的抑制作用及其可能的作用机制。方法:采用不同质量浓度(0.02、0.2、2、20μg/ml)的BPP-Ⅱ分别处理小鼠B细胞淋巴瘤细胞WEHI-231、人鼻咽癌细胞CNE、大鼠肝癌细胞RH-35和正常细胞系人胚肾细胞293、猪肾细胞PK15、中国仓鼠卵巢细胞CHO,48 h后采用MTT法检测细胞增殖情况;以双荧光素酶报告系统和Western blotting方法检测BPP-Ⅱ对荧光素酶标记的p53-Luc质粒转染的Vero细胞中p53转录活性和P53蛋白表达的影响;利用噬菌体随机12肽库筛选BPP-Ⅱ特异性结合肽,人工合成BPP-Ⅱ结合肽,采用MTT法检测BPP-Ⅱ结合肽对BPP-Ⅱ抗WEHI-231细胞增殖能力的影响。结果:2和20μg/ml的BPP-Ⅱ对肿瘤细胞WEHI-231、CNE、RH-35的增殖均有抑制作用(均P<0.05),而对正常细胞系293、PK15、CHO的增殖均不表现出抑制作用。BPP-Ⅱ明显激活p53基因的转录,并上调P53蛋白的表达。应用噬菌体展示技术筛选获得3个BPP-Ⅱ结合肽P3-12、P5-12、P6-12,其中2和20μg/ml的P3-12能显著抑制BPP-Ⅱ的抗WEHI-231细胞增殖能力[(97.5±3.4)%、(98.9±3.5)%vs(86.3±1.9)%,P<0.05];20μg/ml的P5-12和P6-12均能显著抑制BPP-Ⅱ的抗WEHI-231细胞增殖能力[(96.7±3.1)%、(95.4±3.8)%vs(86.3±1.9)%,P<0.05]。结论:BPP-Ⅱ可特异性抑制WEHI-231、CNE、RH-35等肿瘤细胞增殖,其机制可能与激动p53信号通路有关。 展开更多
关键词 法氏囊活性肽-Ⅱ 肿瘤细胞 抗肿瘤 结合肽 p53信号通路
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法氏囊活性肽BP5免疫生物学功能研究进展 被引量:1
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作者 张聪 王臣 +1 位作者 李德元 陈溥言 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1039-1042,共4页
法氏囊(Bursa of fabricius,BF)是禽类特有的中枢体液免疫器官,相当于哺乳动物的骨髓。B淋巴细胞在此发育分化成熟并且参与机体体液免疫应答。三肽囊素(Bursin,BS)是从BF组织中分离的第一个活性肽。作为BF的重要活性组成成分,不仅... 法氏囊(Bursa of fabricius,BF)是禽类特有的中枢体液免疫器官,相当于哺乳动物的骨髓。B淋巴细胞在此发育分化成熟并且参与机体体液免疫应答。三肽囊素(Bursin,BS)是从BF组织中分离的第一个活性肽。作为BF的重要活性组成成分,不仅可以提高禽类免疫功能, 展开更多
关键词 BP5 生物学功能 法氏囊活性肽 研究进展
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