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Dot-ELISA法检测致病性嗜水气单胞菌
被引量:
5
1
作者
任燕
潘子豪
+2 位作者
陆承平
姚火春
吴淑勤
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期1409-1415,共7页
在鱼类致病性气单胞菌诊断试剂盒的基础上,用斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)胞外蛋白酶ECPase54,同时用脱脂奶平板、PCR特异性扩增气溶素基因aer和16SrRNA基因检测72株气单胞菌分离...
在鱼类致病性气单胞菌诊断试剂盒的基础上,用斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)胞外蛋白酶ECPase54,同时用脱脂奶平板、PCR特异性扩增气溶素基因aer和16SrRNA基因检测72株气单胞菌分离株。结果显示致病性嗜水气单胞菌检测阳性率分别如下:Dot-ELISA法90.3%(65/72)、脱脂奶平板法75%(54/72)、aer基因PCR法94.4%(68/72)、16SrRNA PCR法81.9%(59/72),Dot-ELISA与其他3种方法的符合率分别为79.2%(57/72)、91.6%(66/72)、81.9%(59/72)。在ECPase54兔抗血清制备后的2、4、6、12、18个月,用Dot-ELISA检测72株分离株,检测结果重复性好。结果表明Dot-ELISA法敏感、特异、实用,可用于鱼类致病性Ah的临床诊断。
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关键词
嗜水气单胞菌
胞外蛋白酶
斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)
检测
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职称材料
鲟鱼嗜水气单胞菌的分离与鉴定
被引量:
24
2
作者
储卫华
于勇
《淡水渔业》
CSCD
北大核心
2003年第2期16-17,共2页
关键词
致病性
药物敏感性
鲟鱼
嗜水气单胞菌
分离
鉴定
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职称材料
伪狂犬病病毒上海株的gI基因的克隆和序列分析
被引量:
1
3
作者
姜焱
侯玉峰
+3 位作者
陈德胜
黄伟坚
范伟兴
陈溥言
《动物医学进展》
CSCD
2002年第2期63-65,共3页
参考 Genebank发表的伪狂犬病病毒( Pseudorabies Virus,PRV)的 g I糖蛋白基因序列 ,自行设计合成一对引物 ,对 PRV上海株( PRV-SH)进行 PCR扩增 ,产物经琼脂糖电泳分析 ,呈现一条约 960 bp的条带 ,将其克隆入p GEM-T-easy载体中 ,并进...
参考 Genebank发表的伪狂犬病病毒( Pseudorabies Virus,PRV)的 g I糖蛋白基因序列 ,自行设计合成一对引物 ,对 PRV上海株( PRV-SH)进行 PCR扩增 ,产物经琼脂糖电泳分析 ,呈现一条约 960 bp的条带 ,将其克隆入p GEM-T-easy载体中 ,并进行序列测定 ,与PRV Rice株 g I基因比较发现 ,核苷酸的同源性为 94.7% ,氨基酸的同源性为 91 .3 % ,证实为g
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关键词
伪狂犬病病毒
GI基因
序列分析
上海株
基因克隆
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职称材料
基因组步移技术扩增嗜水气单胞菌J-1株脂酶基因全长及原核表达
被引量:
1
4
作者
巢伟
刘永杰
陆承平
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010年第9期1-6,共6页
根据已发表的引物序列合成一对引物,以嗜水气单胞菌J-1株基因组为模板扩增脂酶基因,得到一个保守的383 bp基因片段。进一步应用基因组步移技术扩增其两侧未知序列,分别以DraⅠ,EcoRⅤ,PvuⅡ,ScaⅠ,StuⅠ,SmaⅠ6个内切酶酶切的基因组构建...
根据已发表的引物序列合成一对引物,以嗜水气单胞菌J-1株基因组为模板扩增脂酶基因,得到一个保守的383 bp基因片段。进一步应用基因组步移技术扩增其两侧未知序列,分别以DraⅠ,EcoRⅤ,PvuⅡ,ScaⅠ,StuⅠ,SmaⅠ6个内切酶酶切的基因组构建6个不同的基因组步移文库,再以基因组步移文库为模板,设计引物向已获得的保守片段两侧进行PCR扩增,将扩增到的两侧序列与保守片段拼接后得到一个3 476 bp的片段,通过DNA Star软件分析,找到一个2 415 bp的开放阅读框,经Blast软件分析,其与嗜水气单胞菌ATCC 7966脂酶、嗜水气单胞菌AH-3磷脂酶A1、嗜水气单胞菌H3脂酶、嗜水气单胞菌Mcc-2脂酶、嗜水气单胞菌J MP636磷脂酶C的序列同源性分别为97%、97%、88%、83%和82%。将DNA序列翻译成氨基酸序列后,发现其包含一个多肽序列(VHFLGHSLGA),这个序列在脂酶中高度保守。
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关键词
嗜水气单胞菌
基因组步移
脂酶
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职称材料
题名
Dot-ELISA法检测致病性嗜水气单胞菌
被引量:
5
1
作者
任燕
潘子豪
陆承平
姚火春
吴淑勤
机构
中国水产科学研究院珠江水产研究所
南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期1409-1415,共7页
基金
现代农业产业技术体系建设专项资金资助(CARS-46-09)
江苏省攻关(三药)项目(BE2004609)
文摘
在鱼类致病性气单胞菌诊断试剂盒的基础上,用斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)胞外蛋白酶ECPase54,同时用脱脂奶平板、PCR特异性扩增气溶素基因aer和16SrRNA基因检测72株气单胞菌分离株。结果显示致病性嗜水气单胞菌检测阳性率分别如下:Dot-ELISA法90.3%(65/72)、脱脂奶平板法75%(54/72)、aer基因PCR法94.4%(68/72)、16SrRNA PCR法81.9%(59/72),Dot-ELISA与其他3种方法的符合率分别为79.2%(57/72)、91.6%(66/72)、81.9%(59/72)。在ECPase54兔抗血清制备后的2、4、6、12、18个月,用Dot-ELISA检测72株分离株,检测结果重复性好。结果表明Dot-ELISA法敏感、特异、实用,可用于鱼类致病性Ah的临床诊断。
关键词
嗜水气单胞菌
胞外蛋白酶
斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)
检测
Keywords
Aeromonas hydrophila
extracecullar protease(ECPase)
Dot-ELISA
detect
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
鲟鱼嗜水气单胞菌的分离与鉴定
被引量:
24
2
作者
储卫华
于勇
机构
南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室
出处
《淡水渔业》
CSCD
北大核心
2003年第2期16-17,共2页
关键词
致病性
药物敏感性
鲟鱼
嗜水气单胞菌
分离
鉴定
分类号
S947.12 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
伪狂犬病病毒上海株的gI基因的克隆和序列分析
被引量:
1
3
作者
姜焱
侯玉峰
陈德胜
黄伟坚
范伟兴
陈溥言
机构
南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室
南京
出入境检验检疫局
出处
《动物医学进展》
CSCD
2002年第2期63-65,共3页
文摘
参考 Genebank发表的伪狂犬病病毒( Pseudorabies Virus,PRV)的 g I糖蛋白基因序列 ,自行设计合成一对引物 ,对 PRV上海株( PRV-SH)进行 PCR扩增 ,产物经琼脂糖电泳分析 ,呈现一条约 960 bp的条带 ,将其克隆入p GEM-T-easy载体中 ,并进行序列测定 ,与PRV Rice株 g I基因比较发现 ,核苷酸的同源性为 94.7% ,氨基酸的同源性为 91 .3 % ,证实为g
关键词
伪狂犬病病毒
GI基因
序列分析
上海株
基因克隆
Keywords
pseudorabies virus
gI gene
sequencing analysis
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
基因组步移技术扩增嗜水气单胞菌J-1株脂酶基因全长及原核表达
被引量:
1
4
作者
巢伟
刘永杰
陆承平
机构
南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010年第9期1-6,共6页
文摘
根据已发表的引物序列合成一对引物,以嗜水气单胞菌J-1株基因组为模板扩增脂酶基因,得到一个保守的383 bp基因片段。进一步应用基因组步移技术扩增其两侧未知序列,分别以DraⅠ,EcoRⅤ,PvuⅡ,ScaⅠ,StuⅠ,SmaⅠ6个内切酶酶切的基因组构建6个不同的基因组步移文库,再以基因组步移文库为模板,设计引物向已获得的保守片段两侧进行PCR扩增,将扩增到的两侧序列与保守片段拼接后得到一个3 476 bp的片段,通过DNA Star软件分析,找到一个2 415 bp的开放阅读框,经Blast软件分析,其与嗜水气单胞菌ATCC 7966脂酶、嗜水气单胞菌AH-3磷脂酶A1、嗜水气单胞菌H3脂酶、嗜水气单胞菌Mcc-2脂酶、嗜水气单胞菌J MP636磷脂酶C的序列同源性分别为97%、97%、88%、83%和82%。将DNA序列翻译成氨基酸序列后,发现其包含一个多肽序列(VHFLGHSLGA),这个序列在脂酶中高度保守。
关键词
嗜水气单胞菌
基因组步移
脂酶
Keywords
Aeromonas hydrophila
genome walking
lipase
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Dot-ELISA法检测致病性嗜水气单胞菌
任燕
潘子豪
陆承平
姚火春
吴淑勤
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
5
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下载PDF
职称材料
2
鲟鱼嗜水气单胞菌的分离与鉴定
储卫华
于勇
《淡水渔业》
CSCD
北大核心
2003
24
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
伪狂犬病病毒上海株的gI基因的克隆和序列分析
姜焱
侯玉峰
陈德胜
黄伟坚
范伟兴
陈溥言
《动物医学进展》
CSCD
2002
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
基因组步移技术扩增嗜水气单胞菌J-1株脂酶基因全长及原核表达
巢伟
刘永杰
陆承平
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010
1
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职称材料
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