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Dot-ELISA法检测致病性嗜水气单胞菌被引量：5: 1; 作者任燕潘子豪 +2 位作者陆承平姚火春吴淑勤《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1409-1415,共7页; 在鱼类致病性气单胞菌诊断试剂盒的基础上,用斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)胞外蛋白酶ECPase54,同时用脱脂奶平板、PCR特异性扩增气溶素基因aer和16SrRNA基因检测72株气单胞菌分离... 展开更多; 关键词嗜水气单胞菌胞外蛋白酶斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA) 检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

鲟鱼嗜水气单胞菌的分离与鉴定被引量：24: 2; 作者储卫华于勇《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2003年第2期16-17,共2页; 关键词致病性药物敏感性鲟鱼嗜水气单胞菌分离鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

禽流感病毒M2e基因与鸡IgG Fc基因在巴斯德毕赤酵母中的融合表达被引量：3: 3; 作者尚书文侯继波 +5 位作者徐公豹牛明福王秀清何家惠陈溥言姜平《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2008年第1期17-22,共6页; 【目的】得到融合蛋白M2e-Fc,并检测其免疫学特性,为研制禽流感通用疫苗奠定基础。【方法】根据禽流感病毒H5N1的M2e蛋白氨基酸序列设计2条长互补引物,通过重叠区互补扩增基因法扩增出目的基因M2e,然后与鸡IgGFc片段基因一起克隆入毕赤... 展开更多; 关键词禽流感病毒 M2e基因鸡IGG Fc基因巴斯德毕赤酵母; 在线阅读下载PDF 职称材料

嗜水气单胞菌胞外蛋白酶的化学修饰被引量：8: 4; 作者储卫华陆承平《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期372-375,共4页; 蛋白酶是嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)的重要致病因子 .为研究其结构与功能之间的关系 ,用DEPC、EDC、PMSF、N AI等 9种化学修饰剂处理嗜水气单胞菌J 1株胞外蛋白酶ECPase54,然后检测残余酶活力 ,借以研究酶分子中氨基酸侧链基... 展开更多; 关键词嗜水气单胞菌包外蛋白酶化学修饰酶活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

马链球菌兽疫亚种中国株的类M蛋白基因抗原表位片段的克隆与表达被引量：6: 5; 作者苏良科陆承平《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第7期633-636,共4页; 目的　构建马链球菌兽疫亚种 (Streptococcusequisubsp zooepidemicus)中国株的类M蛋白基因抗原表位片段的重组表达质粒 (pET -Szp) ,并检测表达产物的免疫反应性。方法　根据GenBank登录的马链球菌兽疫亚种纽约分离株w6 0类M蛋白基因... 展开更多; 关键词马链球菌兽疫亚种类M基因克隆表达重组表达质粒免疫反应性; 在线阅读下载PDF 职称材料

伪狂犬病病毒上海株的gI基因的克隆和序列分析被引量：1: 6; 作者姜焱侯玉峰 +3 位作者陈德胜黄伟坚范伟兴陈溥言《动物医学进展》 CSCD 2002年第2期63-65,共3页; 参考 Genebank发表的伪狂犬病病毒( Pseudorabies Virus,PRV)的 g I糖蛋白基因序列 ,自行设计合成一对引物 ,对 PRV上海株( PRV-SH)进行 PCR扩增 ,产物经琼脂糖电泳分析 ,呈现一条约 960 bp的条带 ,将其克隆入p GEM-T-easy载体中 ,并进... 展开更多; 关键词伪狂犬病病毒 GI基因序列分析上海株基因克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

鱼用基因工程疫苗研究与应用被引量：2: 7; 作者储卫华陆承平《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期24-26,共3页; 关键词鱼基因工程疫苗免疫预防疾病预防; 在线阅读下载PDF 职称材料

伪狂犬病病毒上海株gE和gI基因的克隆及序列分析被引量：2: 8; 作者姜焱陈溥言《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期245-248,共4页; 参考Genebank发表的伪狂犬病病毒 (PseudorabiesVirus,PRV)的gI和gE基因序列 ,自行设计并合成了两对引物 ,对PRV上海株 (PRV_SH)进行PCR扩增 ,产物经琼脂糖电泳分析 ,均呈现一条约 96 0bp和 174 0bp的条带 ,将其克隆入pGEM_T_easy载体... 展开更多; 关键词伪狂犬病病毒 GI基因 GE基因序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

基因组步移技术扩增嗜水气单胞菌J-1株脂酶基因全长及原核表达被引量：1: 9; 作者巢伟刘永杰陆承平《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第9期1-6,共6页; 根据已发表的引物序列合成一对引物,以嗜水气单胞菌J-1株基因组为模板扩增脂酶基因,得到一个保守的383 bp基因片段。进一步应用基因组步移技术扩增其两侧未知序列,分别以DraⅠ,EcoRⅤ,PvuⅡ,ScaⅠ,StuⅠ,SmaⅠ6个内切酶酶切的基因组构建... 展开更多; 关键词嗜水气单胞菌基因组步移脂酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Dot-ELISA法检测致病性嗜水气单胞菌被引量：5: 1; 作者任燕潘子豪陆承平姚火春吴淑勤; 机构中国水产科学研究院珠江水产研究所南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1409-1415,共7页; 基金现代农业产业技术体系建设专项资金资助(CARS-46-09) 江苏省攻关(三药)项目(BE2004609); 文摘在鱼类致病性气单胞菌诊断试剂盒的基础上,用斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)胞外蛋白酶ECPase54,同时用脱脂奶平板、PCR特异性扩增气溶素基因aer和16SrRNA基因检测72株气单胞菌分离株。结果显示致病性嗜水气单胞菌检测阳性率分别如下:Dot-ELISA法90.3%(65/72)、脱脂奶平板法75%(54/72)、aer基因PCR法94.4%(68/72)、16SrRNA PCR法81.9%(59/72),Dot-ELISA与其他3种方法的符合率分别为79.2%(57/72)、91.6%(66/72)、81.9%(59/72)。在ECPase54兔抗血清制备后的2、4、6、12、18个月,用Dot-ELISA检测72株分离株,检测结果重复性好。结果表明Dot-ELISA法敏感、特异、实用,可用于鱼类致病性Ah的临床诊断。; 关键词嗜水气单胞菌胞外蛋白酶斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA) 检测; Keywords Aeromonas hydrophila extracecullar protease（ECPase） Dot-ELISA detect; 分类号 S852.612 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鲟鱼嗜水气单胞菌的分离与鉴定被引量：24: 2; 作者储卫华于勇; 机构南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室; 出处《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2003年第2期16-17,共2页; 关键词致病性药物敏感性鲟鱼嗜水气单胞菌分离鉴定; 分类号 S947.12 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名禽流感病毒M2e基因与鸡IgG Fc基因在巴斯德毕赤酵母中的融合表达被引量：3: 3; 作者尚书文侯继波徐公豹牛明福王秀清何家惠陈溥言姜平; 机构南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室江苏省农业科学院兽医研究所; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2008年第1期17-22,共6页; 基金江苏省科技厅高技术项目(BG2006324); 文摘【目的】得到融合蛋白M2e-Fc,并检测其免疫学特性,为研制禽流感通用疫苗奠定基础。【方法】根据禽流感病毒H5N1的M2e蛋白氨基酸序列设计2条长互补引物,通过重叠区互补扩增基因法扩增出目的基因M2e,然后与鸡IgGFc片段基因一起克隆入毕赤酵母表达质粒中,构建酵母表达载体。将阳性质粒线性化后电转化入感受态毕赤酵母X-33中,再经甲醇诱导后,通过Tricine-SDS-PAGE电泳及Western-blotting鉴定融合蛋白。之后用其免疫非免疫鸡,检验其免疫原性。【结果】成功构建了表达M2e和Fc融合蛋白的酵母表达载体pPICZαA-M2-Fc,并通过Zeocin筛选及PCR鉴定出了阳性重组子;阳性重组子经甲醇诱导后得到融合蛋白,Tricine-SDS-PAGE电泳及Western-blotting鉴定证实,融合蛋白得到正确表达,并且可以与M2e阳性血清反应。动物免疫试验证实,该融合蛋白可以诱导鸡产生抗M2e抗体,具有良好的免疫原性。【结论】融合蛋白M2e-Fc在巴斯德毕赤酵母表达系统中得到了成功表达,该融合蛋白具有较好的免疫原性,为后期进行其他免疫试验奠定了基础。; 关键词禽流感病毒 M2e基因鸡IGG Fc基因巴斯德毕赤酵母; Keywords influenza virus matrix 2 protein ectodomain segments （M2e） avain IgG Fc Pichia pastoris; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名嗜水气单胞菌胞外蛋白酶的化学修饰被引量：8: 4; 作者储卫华陆承平; 机构南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期372-375,共4页; 文摘蛋白酶是嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)的重要致病因子 .为研究其结构与功能之间的关系 ,用DEPC、EDC、PMSF、N AI等 9种化学修饰剂处理嗜水气单胞菌J 1株胞外蛋白酶ECPase54,然后检测残余酶活力 ,借以研究酶分子中氨基酸侧链基团与酶活性中心的关系 .结果表明 ,羧基、丝氨酸、ε 氨基、胍基等残基与酶活性无关 ;半胱氨酸残基与酶活性也无直接关系 ;而色氨酸、组氨酸、酪氨酸残基侧链以及二硫键的化学修饰引起酶活性的大幅度的下降 ,说明色氨酸、组氨酸。; 关键词嗜水气单胞菌包外蛋白酶化学修饰酶活性; Keywords Aeromonas hydrophila, extracellular protease,chemical modification,enzyme activity; 分类号 Q936 [生物学—微生物学] S941.42 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马链球菌兽疫亚种中国株的类M蛋白基因抗原表位片段的克隆与表达被引量：6: 5; 作者苏良科陆承平; 机构南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室; 出处《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第7期633-636,共4页; 基金国家 973项目子课题基金赞助 (G19990 1190 6); 文摘目的　构建马链球菌兽疫亚种 (Streptococcusequisubsp zooepidemicus)中国株的类M蛋白基因抗原表位片段的重组表达质粒 (pET -Szp) ,并检测表达产物的免疫反应性。方法　根据GenBank登录的马链球菌兽疫亚种纽约分离株w6 0类M蛋白基因序列设计和合成引物 ,以该菌中国分离株ATCC35 2 4 6的基因组DNA为模板 ,扩增类M蛋白基因 5’端第 5 83～ 10 6 8bp片段 ,并按正确的阅读框架定向克隆到表达载体pET - 32a(+)中 ,将重组质粒转化大肠杆菌BL2 1株 ,用IPTG诱导表达 ,并通过SDS -PAGE和免疫印迹对表达蛋白进行初步分析。结果　扩增出 4 86bp的马链球菌兽疫亚种ATCC35 2 4 6的类M蛋白基因片段 ,该基因在大肠杆菌表达系统中经诱导 ,得到分子量为 5 0 0 0 0的表达产物 ,免疫印迹表明该产物具有特异的免疫反应性。结论　成功构建了表达马链球菌兽疫亚种中国株类M蛋白片段的重组表达质粒 ,并实现在大肠杆菌中表达 ,为重组类M蛋白亚单位疫苗的研制奠定了基础。; 关键词马链球菌兽疫亚种类M基因克隆表达重组表达质粒免疫反应性; Keywords Streptococcus equi subsp.zooepidemicus M-like protein Cloning and expression; 分类号 R378.99 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名伪狂犬病病毒上海株的gI基因的克隆和序列分析被引量：1: 6; 作者姜焱侯玉峰陈德胜黄伟坚范伟兴陈溥言; 机构南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室南京出入境检验检疫局; 出处《动物医学进展》 CSCD 2002年第2期63-65,共3页; 文摘参考 Genebank发表的伪狂犬病病毒( Pseudorabies Virus,PRV)的 g I糖蛋白基因序列 ,自行设计合成一对引物 ,对 PRV上海株( PRV-SH)进行 PCR扩增 ,产物经琼脂糖电泳分析 ,呈现一条约 960 bp的条带 ,将其克隆入p GEM-T-easy载体中 ,并进行序列测定 ,与PRV Rice株 g I基因比较发现 ,核苷酸的同源性为 94.7% ,氨基酸的同源性为 91 .3 % ,证实为g; 关键词伪狂犬病病毒 GI基因序列分析上海株基因克隆; Keywords pseudorabies virus gI gene sequencing analysis; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鱼用基因工程疫苗研究与应用被引量：2: 7; 作者储卫华陆承平; 机构南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室; 出处《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期24-26,共3页; 关键词鱼基因工程疫苗免疫预防疾病预防; 分类号 S942.5 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名伪狂犬病病毒上海株gE和gI基因的克隆及序列分析被引量：2: 8; 作者姜焱陈溥言; 机构南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期245-248,共4页; 文摘参考Genebank发表的伪狂犬病病毒 (PseudorabiesVirus,PRV)的gI和gE基因序列 ,自行设计并合成了两对引物 ,对PRV上海株 (PRV_SH)进行PCR扩增 ,产物经琼脂糖电泳分析 ,均呈现一条约 96 0bp和 174 0bp的条带 ,将其克隆入pGEM_T_easy载体中 ,进行了序列测定。将PRV_SH株的gI基因与Rice株gI基因比较发现 ,核苷酸的同源性为 94 .7% ,氨基酸的同源性为91.3% ,证实为gI基因。将PRV_SHgE基因序列与Ea株、Ruce株gE基因序列进行比较 ,结果显示 ,该序列与PRVEa株、Rice株gE基因的同源性分别为 98.5 %、97.5 % ;推导的氨基酸序列与Ea株 ,Rice株和I型单纯疱疹病毒 (HSV_1) 17株gE的同源性分别为 97.2 %、94 .8%和 15 .6 %。; 关键词伪狂犬病病毒 GI基因 GE基因序列分析; Keywords Pseudorabies virus gI gene gE gene Sequencing analysis; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学] S852.655 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基因组步移技术扩增嗜水气单胞菌J-1株脂酶基因全长及原核表达被引量：1: 9; 作者巢伟刘永杰陆承平; 机构南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第9期1-6,共6页; 文摘根据已发表的引物序列合成一对引物,以嗜水气单胞菌J-1株基因组为模板扩增脂酶基因,得到一个保守的383 bp基因片段。进一步应用基因组步移技术扩增其两侧未知序列,分别以DraⅠ,EcoRⅤ,PvuⅡ,ScaⅠ,StuⅠ,SmaⅠ6个内切酶酶切的基因组构建6个不同的基因组步移文库,再以基因组步移文库为模板,设计引物向已获得的保守片段两侧进行PCR扩增,将扩增到的两侧序列与保守片段拼接后得到一个3 476 bp的片段,通过DNA Star软件分析,找到一个2 415 bp的开放阅读框,经Blast软件分析,其与嗜水气单胞菌ATCC 7966脂酶、嗜水气单胞菌AH-3磷脂酶A1、嗜水气单胞菌H3脂酶、嗜水气单胞菌Mcc-2脂酶、嗜水气单胞菌J MP636磷脂酶C的序列同源性分别为97%、97%、88%、83%和82%。将DNA序列翻译成氨基酸序列后,发现其包含一个多肽序列(VHFLGHSLGA),这个序列在脂酶中高度保守。; 关键词嗜水气单胞菌基因组步移脂酶; Keywords Aeromonas hydrophila genome walking lipase; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	Dot-ELISA法检测致病性嗜水气单胞菌	任燕潘子豪陆承平姚火春吴淑勤	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	鲟鱼嗜水气单胞菌的分离与鉴定	储卫华于勇	《淡水渔业》 CSCD 北大核心	2003	24	在线阅读下载PDF 职称材料
3	禽流感病毒M2e基因与鸡IgG Fc基因在巴斯德毕赤酵母中的融合表达	尚书文侯继波徐公豹牛明福王秀清何家惠陈溥言姜平	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2008	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	嗜水气单胞菌胞外蛋白酶的化学修饰	储卫华陆承平	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	8	在线阅读下载PDF 职称材料
5	马链球菌兽疫亚种中国株的类M蛋白基因抗原表位片段的克隆与表达	苏良科陆承平	《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心	2004	6	在线阅读下载PDF 职称材料
6	伪狂犬病病毒上海株的gI基因的克隆和序列分析	姜焱侯玉峰陈德胜黄伟坚范伟兴陈溥言	《动物医学进展》 CSCD	2002	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	鱼用基因工程疫苗研究与应用	储卫华陆承平	《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心	2003	2	在线阅读下载PDF 职称材料
8	伪狂犬病病毒上海株gE和gI基因的克隆及序列分析	姜焱陈溥言	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2002	2	在线阅读下载PDF 职称材料
9	基因组步移技术扩增嗜水气单胞菌J-1株脂酶基因全长及原核表达	巢伟刘永杰陆承平	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料