期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
1
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
家畜冷冻精液DNA的纯化及影响因素分析
被引量：
2
1
作者
郭玛丽
张晓婷
+5 位作者
彭珍珍
蔡亚非
陆汉希
黄文佳
刘蓉
张威
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期309-317,共9页
[目的]基于人精液DNA试剂盒提取法,优化家畜冷冻精液DNA纯化方法,探讨冷冻精液中影响DNA提取质量的因素。[方法]使用摩拉水牛冷冻精液,按100μL(或200μL)样品初始量,以及0.5、1、1.5、2、3和5 h的蛋白酶解时间,用试剂盒法纯化DNA。从DN...
[目的]基于人精液DNA试剂盒提取法,优化家畜冷冻精液DNA纯化方法,探讨冷冻精液中影响DNA提取质量的因素。[方法]使用摩拉水牛冷冻精液,按100μL(或200μL)样品初始量,以及0.5、1、1.5、2、3和5 h的蛋白酶解时间,用试剂盒法纯化DNA。从DNA产物浓度、A 260/A 280和A 260/A 230值3方面,结合琼脂糖凝胶电泳和PCR检测进行分析,最终确定DNA纯化的最佳精液初始量以及最佳蛋白质酶解时间。在此基础上,纯化67份来源于牛、马、驴等不同家畜品种的冷冻精液DNA,同时测定每份精液中蛋白质、甘油/甘油三酯和果糖的含量,结合精液样品的冻存时间,研究以上4种因素对DNA纯化质量的影响。[结果]使用100μL冷冻精液,蛋白酶解3 h的纯化效果最好,而且酶解2和3 h的DNA产物,均可以满足后续核基因组和线粒体基因组常规PCR的要求。家畜冷冻精液中蛋白质、甘油/甘油三酯和果糖含量与提取DNA浓度、A 260/A 280和A 260/A 230值(纯度)在不同程度上呈斯皮尔曼负相关,其中果糖是干扰DNA纯化的关键因素,同时样品的冻存时间与DNA质量存在显著正相关关系。虽然冷冻精液中蛋白质、甘油/甘油三酯和果糖等成分可以减轻冷冻复苏对精子的损伤,但这些成分的增加,会对DNA纯化质量产生一定的负面影响,即使它们随着冻存时间及DNA纯化时酶解时间的延长而有所消耗。[结论]优化后的人精液DNA试剂盒法可完全适用于家畜冷冻精液DNA的纯化。
展开更多
关键词
冷冻精液
DNA纯化
蛋白质
甘油/甘油三酯
果糖
冻存时间
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
家畜冷冻精液DNA的纯化及影响因素分析
被引量：
2
1
作者
郭玛丽
张晓婷
彭珍珍
蔡亚非
陆汉希
黄文佳
刘蓉
张威
机构
南京农业大学
食品科学技术学院
南京农业大学
动物科技学院
南京农业大学
动物科学类国家级实验教学示范
中心
南京农业大学
农业
农村部
牛
冷冻
精液
质量
监督
检验
测试中心
(
南京
)
出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期309-317,共9页
基金
国家重点研发计划项目(2018YFC1200201)
江苏省自然科学基金项目(BK20160722)
+1 种基金
国家自然科学基金项目(31701229)
中央高校基本科研业务费专项资金(KYZ201723,KJQN201829)
文摘
[目的]基于人精液DNA试剂盒提取法,优化家畜冷冻精液DNA纯化方法,探讨冷冻精液中影响DNA提取质量的因素。[方法]使用摩拉水牛冷冻精液,按100μL(或200μL)样品初始量,以及0.5、1、1.5、2、3和5 h的蛋白酶解时间,用试剂盒法纯化DNA。从DNA产物浓度、A 260/A 280和A 260/A 230值3方面,结合琼脂糖凝胶电泳和PCR检测进行分析,最终确定DNA纯化的最佳精液初始量以及最佳蛋白质酶解时间。在此基础上,纯化67份来源于牛、马、驴等不同家畜品种的冷冻精液DNA,同时测定每份精液中蛋白质、甘油/甘油三酯和果糖的含量,结合精液样品的冻存时间,研究以上4种因素对DNA纯化质量的影响。[结果]使用100μL冷冻精液,蛋白酶解3 h的纯化效果最好,而且酶解2和3 h的DNA产物,均可以满足后续核基因组和线粒体基因组常规PCR的要求。家畜冷冻精液中蛋白质、甘油/甘油三酯和果糖含量与提取DNA浓度、A 260/A 280和A 260/A 230值(纯度)在不同程度上呈斯皮尔曼负相关,其中果糖是干扰DNA纯化的关键因素,同时样品的冻存时间与DNA质量存在显著正相关关系。虽然冷冻精液中蛋白质、甘油/甘油三酯和果糖等成分可以减轻冷冻复苏对精子的损伤,但这些成分的增加,会对DNA纯化质量产生一定的负面影响,即使它们随着冻存时间及DNA纯化时酶解时间的延长而有所消耗。[结论]优化后的人精液DNA试剂盒法可完全适用于家畜冷冻精液DNA的纯化。
关键词
冷冻精液
DNA纯化
蛋白质
甘油/甘油三酯
果糖
冻存时间
Keywords
frozen semen
DNA purification
protein
glycerol/triglyceride
fructose
frozen time
分类号
S813.1 [农业科学—畜牧学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
家畜冷冻精液DNA的纯化及影响因素分析
郭玛丽
张晓婷
彭珍珍
蔡亚非
陆汉希
黄文佳
刘蓉
张威
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
