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ALM-ASA法鉴别人参和西洋参ITS及5.8s基因上单核苷酸多态性位点 被引量:5
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作者 宋沁馨 张心悦 +2 位作者 卜莹 周国华 冯芳 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期274-278,共5页
目的:查找并发现参类药材的单核苷酸多态性(SNP)位点,利用SNP的准确测定来鉴别人参和西洋参。方法:根据ITS及5.8s基因上人参和西洋参的SNP位点设计特异性引物,利用适配器连接介导的等位基因特异性扩增法(ALM-ASA)进行检测。结果:PCR反... 目的:查找并发现参类药材的单核苷酸多态性(SNP)位点,利用SNP的准确测定来鉴别人参和西洋参。方法:根据ITS及5.8s基因上人参和西洋参的SNP位点设计特异性引物,利用适配器连接介导的等位基因特异性扩增法(ALM-ASA)进行检测。结果:PCR反应体系优化后,能在同一反应中同时鉴别人参、西洋参。根据凝胶电泳中扩增片段的大小判断SNP的类型,出现294bp条带的为人参,111bp条带的为西洋参。结论:ALM-ASA法极大提高了PCR反应的特异性,结果准确,可同时测定多个SNP位点。采用该方法测定ITS及5.8s基因上的SNP位点能有效地对参类品种进行鉴别和质量控制。 展开更多
关键词 人参 西洋参 单核苷酸多态性(SNP) ITS及5.8s基因 ALM-ASA法
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高效液相色谱法同时测定四逆汤中6个指标性成分 被引量:8
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作者 刘敏 张海 +2 位作者 蔡亚梅 张国庆 柴逸峰 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期682-686,共5页
目的采用高效液相色谱法同时测定四逆汤中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰乌头次碱、异甘草素、甘草酸和6-姜酚6个成分的含量。方法采用Waters Terra C18色谱柱(3.0mm×100mm,3.5μm),检测波长:除异甘草素外的5种成分采用... 目的采用高效液相色谱法同时测定四逆汤中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰乌头次碱、异甘草素、甘草酸和6-姜酚6个成分的含量。方法采用Waters Terra C18色谱柱(3.0mm×100mm,3.5μm),检测波长:除异甘草素外的5种成分采用235nm检测,异甘草素采用370nm的检测波长;流动相为A:95%乙腈和5%水的混合溶液(0.1%甲酸+5mmol/L醋酸铵),B:0.1%甲酸水溶液(5mmol/L醋酸铵),梯度洗脱,A相随时间的变化:25%~35%(0~5min),35%~50%(5~15min),50%~85%(15~20min);流速0.5mL/min;柱温25℃;进样量5μL。四逆汤按照传统煎煮方法提取。结果 6个指标性成分苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰乌头次碱、异甘草素、甘草酸、6-姜酚分别在5.600~112.0、6.560~131.2、6.130~122.6、4.590~91.8、31.00~620.0、4.920~98.4μg/mL范围内线性良好(r>0.999 0),在15min内实现完全分离。方法学考察表明,日内及日间精密度RSD<5%,加样回收率(n=6)分别为101.07%(RSD=1.3%)、98.72%(RSD=1.1%)、101.57%(RSD=1.8%)、101.71%(RSD=3.6%)、102.12%(RSD=2.3%)、99.58%(RSD=3.8%)。结论该方法简便、准确、实用性强,可用于四逆汤中6个指标性成分的含量测定。 展开更多
关键词 四逆汤 高压液相色谱法 中药理化鉴定
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哒嗪酮类化合物的合成及其抗血小板聚集活性 被引量:5
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作者 章杰兵 柴晓云 +2 位作者 俞世冲 古卓良 周国华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期821-824,共4页
目的:研究不同取代氨基侧链的引入对哒嗪酮类化合物抗血小板聚集活性的影响。方法:以乙酰基为连接片段,引入不同的取代氨基,设计合成一系列化合物;体外药理实验参考Born方法进行。结果:设计合成了10个目标化合物,其中8个未见报道,所有... 目的:研究不同取代氨基侧链的引入对哒嗪酮类化合物抗血小板聚集活性的影响。方法:以乙酰基为连接片段,引入不同的取代氨基,设计合成一系列化合物;体外药理实验参考Born方法进行。结果:设计合成了10个目标化合物,其中8个未见报道,所有化合物均经过1HNMR等确证;所有化合物都具有抗血小板聚集的活性,其中化合物(6f)、(6g)、(6h)和(6j)的抗血小板聚集活性较强,化合物(6g)和(6j)的活性是6-[4-(吡啶基-4-氨基)苯基]-4,5-二氢-3(2H)哒嗪酮(MCI-154)的5倍。结论:引入不同的取代氨基对哒嗪酮类化合物抗血小板聚集的活性有影响。 展开更多
关键词 化学合成 哒嗪酮类 血小板聚集抑制剂 体外研究
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低成本基因多态性检测方法及其应用研究 被引量:2
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作者 周国华 宋沁馨 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期193-199,共7页
单核苷酸多态性(SNP)是基因多态性的主要来源,其数量极其庞大,因此有必要开发一种通量高、速度快、价格低的SNP检测方法。本课题组针对基因多态性测定中的技术瓶颈,提出了一整套解决方案,包括全血直接PCR扩增技术、基于DNA适配器介导的... 单核苷酸多态性(SNP)是基因多态性的主要来源,其数量极其庞大,因此有必要开发一种通量高、速度快、价格低的SNP检测方法。本课题组针对基因多态性测定中的技术瓶颈,提出了一整套解决方案,包括全血直接PCR扩增技术、基于DNA适配器介导的多重等位基因特异性扩增法、单管基因多态性检测法以及微板阵列平行凝胶电泳和微流控芯片检测等方法。在药物基因组学、疾病相关性研究、药材真伪鉴别等方面得到了成功应用,具有高特异性、高灵敏度、操作简便快速、低成本的优点,应用前景广阔。本文对该基因多态性检测平台的研究及其应用作了详细介绍。 展开更多
关键词 单核苷酸多态性(SNP) 基因分型平台 应用
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高效液相色谱手性流动相法测定盐酸肾上腺素注射液中S-对映体含量
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作者 金丽 周建丽 +2 位作者 张晓丹 古卓良 卜莹 《医药导报》 CAS 2015年第6期799-801,共3页
目的:建立肾上腺素光学异构体中 S-对映体的高效液相色谱手性流动相检测方法。方法 Purospher STAR RP-18色谱柱(4.6 mmx250 mm,5μm),流动相:10 mmol·L-1磷酸二氢钠缓冲液(含10 mmol·L-1手性添加剂磺丁基-b-环糊精,磷... 目的:建立肾上腺素光学异构体中 S-对映体的高效液相色谱手性流动相检测方法。方法 Purospher STAR RP-18色谱柱(4.6 mmx250 mm,5μm),流动相:10 mmol·L-1磷酸二氢钠缓冲液(含10 mmol·L-1手性添加剂磺丁基-b-环糊精,磷酸调节 pH 至3.0)-乙腈(98.5:1.5),流速0.8 mL·min-1,柱温30℃,检测波长280 nm。结果肾上腺素 S-对映体在浓度5.02-501.50μg · mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数0.9997,检测限0-05μg·mL-1。结论该方法重复性、耐用性好,适用于盐酸肾上腺素注射液中 S-对映体杂质含量的测定。 展开更多
关键词 肾上腺素注射液 盐酸 色谱法 高效液相 手性流动相 添加剂 S-对映体
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