南京地区肺炎链球菌的耐药变迁及喹诺酮耐药机制研究 被引量：11

1

作者 刘青 苏欣 +4 位作者 张明 邵海枫 高卫卫 樊有 施毅 《中国感染与化疗杂志》 CAS 北大核心 2014年第1期1-6,共6页

目的了解南京地区肺炎链球菌临床分离株的耐药性变迁及对喹诺酮类的耐药机制。方法收集2010—2012年南京7所教学医院共147株肺炎链球菌,琼脂稀释法测定9种抗菌药物的MIC,与南京2006—2007年分离的肺炎链球菌耐药情况进行比较。并对氟喹... 目的了解南京地区肺炎链球菌临床分离株的耐药性变迁及对喹诺酮类的耐药机制。方法收集2010—2012年南京7所教学医院共147株肺炎链球菌,琼脂稀释法测定9种抗菌药物的MIC,与南京2006—2007年分离的肺炎链球菌耐药情况进行比较。并对氟喹诺酮耐药株的gyrA、gyrB、parE和parC基因喹喏酮耐药决定区域(QRDR)进行PCR扩增及测序。结果 147株肺炎链球菌中,对红霉素的耐药率为89.1%;青霉素不敏感肺炎链球菌(MIC≥4 mg/L)占3.4%;对头孢呋辛、头孢曲松、美罗培南、左氧氟沙星、莫西沙星的耐药率分别为26.5%、1.4%、3.4%、1.4%、0.7%;所有分离株对万古霉素、利奈唑胺敏感。与2006—2007年分离株相比,2010—2012年临床分离株对青霉素、头孢呋辛耐药率下降,对红霉素、头孢曲松耐药率变化不大,出现了少数左氧氟沙星及莫西沙星耐药株。对喹诺酮耐药株进行基因测序发现1菌株有gyrA突变(Asn167—Ile)和ParE突变(Ile 460—Val);另1菌株则有ParC突变(Ser 81—Gly;Asn 94—Asp)。结论南京地区肺炎链球菌对红霉素耐药率居高不下,对青霉素仍较敏感,出现了少数莫西沙星、左氧氟沙星耐药株。喹诺酮耐药株有gyrA、parE和parC的QRDR突变。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 耐药 抗菌药物 氟喹诺酮 喹诺酮耐药决定区域

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南京地区肺炎链球菌耐药情况分析 被引量：11

2

作者 樊有 丁晶晶 +2 位作者 施毅 宋应建 邵海枫 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2008年第5期383-386,共4页

目的了解南京地区肺炎链球菌对常用抗菌药物的耐药性。方法琼脂稀释法测定14种抗菌药物对130株肺炎链球菌MIC。结果130株肺炎链球菌中,耐青霉素肺炎链球菌(PRSP,MIC≥2mg/L)占51.5%;对阿莫西林、头孢呋辛、头孢噻肟和头孢曲松的耐药率... 目的了解南京地区肺炎链球菌对常用抗菌药物的耐药性。方法琼脂稀释法测定14种抗菌药物对130株肺炎链球菌MIC。结果130株肺炎链球菌中,耐青霉素肺炎链球菌(PRSP,MIC≥2mg/L)占51.5%;对阿莫西林、头孢呋辛、头孢噻肟和头孢曲松的耐药率依次为6.2%、69.2%、17.7%和3.1%;对红霉素、阿奇霉素、克林霉素和四环素耐药率分别为92.3%、90.8%、89.2%和93.8%;对万古霉素、左氧氟沙星、莫西沙星、替加环素和利奈唑胺均敏感。结论南京地区肺炎链球菌对青霉素、红霉素、阿奇霉素、克林霉素、四环素和头孢呋辛等抗生素耐药性高,应注意合理选择用药。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 耐药性 抗菌药物

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产ESBLs肠杆菌科细菌的检测及耐药性分析 被引量：6

3

作者 张小卫 李珍大 +1 位作者 邵海枫 王卫萍 《医学研究生学报》 CAS 2002年第4期371-371,共1页

关键词 肠菌科细菌 超广谱Β-内酰胺酶 抗生素耐药性 K-B纸片扩散法 合理用药

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临床科室灭菌物品无菌情况调查 被引量：3

4

作者 张春玉 王桂玲 +3 位作者 张爱琴 朱剑萍 张锋 邵海枫 《医学研究生学报》 CAS 2002年第5期466-466,共1页

关键词 临床科室 调查 灭菌物品 无菌保存 灭菌法

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胰岛素不同配置时间和方法对其有效浓度的影响 被引量：12

5

作者 叶向红 张中书 +2 位作者 王新颖 彭南海 李维勤 《肠外与肠内营养》 CAS 2005年第1期17-19,共3页

目的 :研究危重病人营养支持期间胰岛素注射剂配置的最佳时间和方法。　方法 :将临床常用的胰岛素注射剂配置方法分为两组 :①TPN组 :胰岛素直接加入完全胃肠外营养 (TPN)液中 ,连续输注 2 0～ 2 4h ;②对照组 :胰岛素加入等渗盐水 (NS)... 目的 :研究危重病人营养支持期间胰岛素注射剂配置的最佳时间和方法。　方法 :将临床常用的胰岛素注射剂配置方法分为两组 :①TPN组 :胰岛素直接加入完全胃肠外营养 (TPN)液中 ,连续输注 2 0～ 2 4h ;②对照组 :胰岛素加入等渗盐水 (NS)中 ,用 5 0ml注射器经微量泵持续静脉输注 ,并观察两种方法胰岛素浓度的改变 ,将 10U胰岛素分别加入TPN 10ml和NS 10ml中 ,每组 10例。在配置后 0、4、8、12、2 0和 2 4h的六个时相点 ,采用化学发光法分别测定TPN和NS中的胰岛素有效浓度。　结果 :对照组胰岛素配置后 0h的浓度为 (5 1.11± 11.6 3)mU/L ,12h时下降为 (2 8.5 7± 5 .39)mU/L ,到 2 4h已下降为 (2 0 .88± 4 .18)mU/L ,是配置当时的 4 0 .85 % ,与 0h比明显下降 (P <0 .0 5 ) ;TPN组胰岛素配置后 0h的浓度为 (6 9.6 3± 8.5 6 )mU/L ,12h时下降为 (38.72± 4 .99)mU/L ,到 2 4h已下降为(2 4 .73± 3.19)mU/L ,是配置当时的 35 .5 2 % ,与 0h比明显下降 (P <0 .0 5 )。　结论 :胰岛素配置后有效浓度随时间的延长而下降。将胰岛素直接加入TPN中输注 ,方法简便 。 展开更多

关键词 胰岛素 TPN 有效浓度 输注 对照组 微量泵 注射剂 结论 方法 下降

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自制肝素亲和柱分离纯化载脂蛋白H及其抗体制备与鉴定 被引量：7

6

作者 王相栋 张春妮 +1 位作者 汪俊军 田迎 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期931-934,942,共5页

目的:自制肝素-琼脂糖6B亲和柱提纯人血清载脂蛋白H(apoH),免疫制备多克隆抗体,为大量制备与进一步研究做准备。方法:利用间接还原胺化法制备亲和层析柱,并优化反应条件。运用高氯酸沉淀、离子交换及亲和层析从人血清中纯化抗原,制备兔... 目的:自制肝素-琼脂糖6B亲和柱提纯人血清载脂蛋白H(apoH),免疫制备多克隆抗体,为大量制备与进一步研究做准备。方法:利用间接还原胺化法制备亲和层析柱,并优化反应条件。运用高氯酸沉淀、离子交换及亲和层析从人血清中纯化抗原,制备兔源多克隆抗体。结果:自制亲和柱肝素结合量约5mg/g(介质体积)。纯化的抗原经SDS-PAGE鉴定分子量约50kD,无杂带;16种氨基酸组成分析结果与报道一致。多克隆抗体与购置的国外抗体一样,在进行ELISA与dot-ELISA时与小牛血清白蛋白有交叉反应;但在变性且还原的条件下,Western blot结果显示无交叉反应。结论:自制亲和柱成本低、亲和性好、肝素结合稳定,用之分离纯化得到了高纯度apoH;兔多克隆抗体用于检测血清中载脂蛋白H含量时需进一步纯化。 展开更多

关键词 亲和层析 肝素 载脂蛋白H 抗体 纯化与鉴定

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检测血清β_2-GPI/ox-LDL复合物对系统性红斑狼疮的临床诊断价值 被引量：6

7

作者 张春妮 史蓓蕾 +3 位作者 王相栋 汪俊军 刘小传 李克 《医学研究生学报》 CAS 2009年第5期476-479,共4页

目的:低密度脂蛋白(LDL)的氧化修饰在自身免疫疾病早发动脉粥样硬化过程中起重要作用。国外研究发现,在循环血和动脉斑块中氧化LDL(ox-LDL)能与抗心磷脂抗体的主要自身抗体β2-糖蛋白I(β2-GPI)结合成稳定的复合物。文中通过检测中国SL... 目的:低密度脂蛋白(LDL)的氧化修饰在自身免疫疾病早发动脉粥样硬化过程中起重要作用。国外研究发现,在循环血和动脉斑块中氧化LDL(ox-LDL)能与抗心磷脂抗体的主要自身抗体β2-糖蛋白I(β2-GPI)结合成稳定的复合物。文中通过检测中国SLE患者血清β2-GPI/ox-LDL复合物水平,进一步探讨该复合物的临床诊断价值。方法:用ELISA法对47例系统性红斑狼疮(SLE)患者(SLE组)和42例健康对照者(对照组)检测比较。结果:SLE患者β2-GPI/ox-LDL水平显著高于对照组[(1.05±0.14)U/mlvs(0.79±0.11)U/ml,P<0.0001]。若以1 U/ml为临界值,SLE组中28例高于临界值(敏感性59.6%),对照组中仅4例异常(特异性90.5%)。2组β2-GPI/ox-LDL水平均与apoB和LDL呈显著正相关。结论:β2-GPI/ox-LDL对SLE有较高的敏感性与特异性,提示其潜在的临床诊断价值。 展开更多

关键词 低密度脂蛋白 氧化修饰 Β2-糖蛋白I 系统性红斑狼疮 动脉粥样硬化

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反相高效液相色谱法测定人血浆中曲尼司特浓度 被引量：5

8

作者 赵飞浪 袁倚盛 +1 位作者 谭力 张昕 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期78-79,共2页

报道了用反相高效液相色谱法测定人血浆中曲尼司特浓度。以甲醇－磷酸二氢钾缓冲液（６０∶４０，Ｖ／Ｖ；ｐＨ４．２）为流动相，色谱柱采用ＹＷＧ－Ｃ１８不锈钢柱，紫外３３３ｎｍ波长检测，血浆样品经甲醇沉淀蛋白后直接进样测定。... 报道了用反相高效液相色谱法测定人血浆中曲尼司特浓度。以甲醇－磷酸二氢钾缓冲液（６０∶４０，Ｖ／Ｖ；ｐＨ４．２）为流动相，色谱柱采用ＹＷＧ－Ｃ１８不锈钢柱，紫外３３３ｎｍ波长检测，血浆样品经甲醇沉淀蛋白后直接进样测定。血浆浓度在０．６５～４０ｍｇ／Ｌ范围内线性良好，方法的平均回收率为１００．０％±４．１％。血浆最低检测浓度为０．２ｍｇ／Ｌ。对１０名健康志愿者口服２００ｍｇ曲尼司特后不同时间的血药浓度进行了测定。 展开更多

关键词 曲尼司特 血浆浓度 利喘贝 HPLC

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人体内卡托普利的药物动力学及其生物利用度 被引量：5

9

作者 谭力 周继红 +2 位作者 李克 罗楠 袁倚盛 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期274-276,共3页

１０名健康志愿者随机交叉口服单剂量３０ｍｇ两种国产卡托普利片后，用对溴苯乙酰基溴（ｐ－ＢＰＢ）作为化学稳定剂以及衍生化试剂，采用ＨＰＬＣ法测得血浆中药物浓度达峰时间分别在０．５７±０．１２ｈ（样品）和０．５６±... １０名健康志愿者随机交叉口服单剂量３０ｍｇ两种国产卡托普利片后，用对溴苯乙酰基溴（ｐ－ＢＰＢ）作为化学稳定剂以及衍生化试剂，采用ＨＰＬＣ法测得血浆中药物浓度达峰时间分别在０．５７±０．１２ｈ（样品）和０．５６±０．１７ｈ（对照品），峰值（Ｃｍａｘ）分别为２８９．２±１０１．３和２６６．５±８３．８ｎｇ／ｍｌ，药时曲线下面积（ＡＵＣ０－∞）分别为３９３．８±６３．７（样品）和３８３．０±４９．４ｎｇ·ｈ／ｍｌ（对照品）。血药浓度－时间曲线符合一级吸收的二房室模型。以常州制药厂复方卡托普利片为标准算得汕头金石制药总厂复方卡托普利片中卡托普利的相对生物利用度（Ｆ）为１０２．８±１．２９。 展开更多

关键词 卡托普利 药物动力学 生物利用度

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加替沙星序贯给药治疗下呼吸道细菌性感染 被引量：6

10

作者 肖永营 施毅 +5 位作者 邵海枫 赵蓓蕾 曹鄂洪 辛晓峰 肖鑫武 宋勇 《医学研究生学报》 CAS 2003年第8期596-599,共4页

目的 :评价加替 (Gatifloxacin)沙星先静脉、后口服序贯给药治疗社区获得性肺炎 (CAP)为主的下呼吸道感染的疗效与安全性。　方法 :采用随机对照盲法平行试验设计 ,入选并完成病例 5 2例 ,其中CAP 5 1例 ,慢性支气管炎急性发作 (AECB) ... 目的 :评价加替 (Gatifloxacin)沙星先静脉、后口服序贯给药治疗社区获得性肺炎 (CAP)为主的下呼吸道感染的疗效与安全性。　方法 :采用随机对照盲法平行试验设计 ,入选并完成病例 5 2例 ,其中CAP 5 1例 ,慢性支气管炎急性发作 (AECB) 1例。试验组 (2 6例 )给予加替沙星注射液 4 0 0mg ,每天 1次静脉滴注 ,共 3～ 5天 ,继以加替沙星片 4 0 0mg ,每天 1次口服 ;对照组 (2 6例 )给予左旋氧氟沙星注射液 4 0 0mg/d ,分 2次静脉滴注 ,共 3～ 5天 ,继续以每天左旋氧氟沙星片 4 0 0mg/d ,分 2次服用 ,总疗程均为 7～ 1 4天。　 结果 :试验组和对照组临床可评价的病例均为 2 6例 ,有效率分别为 1 0 0 % (2 6 /2 6 )和 96 .2 % (2 5 /2 6 )。痊愈率分别为 76 .9% (2 0 /2 6 )和 6 5 .4 % (1 7/2 6 ) ,差异均不显著 (P >0 .0 5 )。试验组和对照组可作细菌学评价病例分别为 1 8例和 1 9例 ,细菌清除率分别为 94 .4 %(1 7/1 8)和 6 8.4 % (1 3/1 9) (P >0 .0 5 )。试验组和对照组不良反应发生率分别为 30 .8% (8/2 6 )和 1 1 .5 % (3/6 ) ,(P>0 .0 5 )。实验室检查异常发生率各为 4 2 .3% (1 2 /2 6 )和 2 6 .9% (7/2 6 ) (P >0 .0 5 ) ,均系轻度 ,并呈一过性 ,无需处理。　结论 :本研究结果显示 。 展开更多

关键词 下呼吸道细菌感染 加替沙星 左旋氧氟沙星 静脉 口服 序贯治疗法

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高效毛细管区带电泳测定人尿液中尿酸、肌酐和伪尿核苷的含量 被引量：5

11

作者 周继红 袁倚盛 许丹科 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期176-177,共2页

报道了采用高效毛细管区带电泳技术直接将人尿液注入毛细管进行尿液中肌酐、尿酸及伪尿核苷含量测定的新方法。试验表明，以磷酸盐（ｐＨ６．１）作缓冲液，对人体尿液中肌酐、尿酸及伪尿核苷进行直接分析具有较高的灵敏度和较好的重复性。

关键词 CEC 肌酐 尿酸 伪尿核苷 人尿液 尿样 分析

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D-二聚体检测及临床应用进展 被引量：13

12

作者 时永辉 谢颖 李克 《医学研究生学报》 CAS 2009年第12期1341-1344,共4页

血浆D-二聚体是纤溶酶水解交联纤维蛋白形成的降解产物之一,为继发性纤溶特有的代谢物,其含量变化可作为体内高凝状态和原发性与继发性纤溶鉴别的可靠指标,也可作为溶栓治疗有效性的观察指标。近年来,D-二聚体检测在临床得到新的应用。... 血浆D-二聚体是纤溶酶水解交联纤维蛋白形成的降解产物之一,为继发性纤溶特有的代谢物,其含量变化可作为体内高凝状态和原发性与继发性纤溶鉴别的可靠指标,也可作为溶栓治疗有效性的观察指标。近年来,D-二聚体检测在临床得到新的应用。文中就D-二聚体的形成、检测方法及其在临床应用的进展进行文献综述。 展开更多

关键词 D-二聚体 血栓性疾病 检测方法 临床应用

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肠炎和肠炎相关结直肠癌miRNA表达检测及生物信息学分析 被引量：12

13

作者 殷媛 王成 +1 位作者 戴欣 黄朝晖 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期916-921,共6页

背景与目的:炎症性肠病(inflammatory bowel diseases,IBD)为一组慢性肠道疾病,包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)与克罗恩病(Crohn’s disease,CD)。肠炎相关性结直肠癌(colitis-associated colorectal cancers,CAC)是由IBD癌... 背景与目的:炎症性肠病(inflammatory bowel diseases,IBD)为一组慢性肠道疾病,包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)与克罗恩病(Crohn’s disease,CD)。肠炎相关性结直肠癌(colitis-associated colorectal cancers,CAC)是由IBD癌化形成的一种恶性肿瘤。该研究通过检测UC、CD和CAC组织中相关微小核糖核酸(mi RNA)的水平,初步探讨其作为肠炎癌转化分子标志物的可能性,并对在肠炎和CAC中显著变化的一组mi RNAs进行靶基因归集和生物信息学分析,为以mi RNAs为靶点的基因治疗提供理论和实验基础。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)技术,检测13例UC组织、3例CD患者组织、12例CAC组织及8例正常肠组织中16种mi RNAs的表达。通过生物信息学对显著变化的一组mi RNA进行靶基因分析,将文献中已报导的所有靶基因进行汇总,并利用DAVID数据库对靶基因进行功能富集分析(GO-analysis)和信号转导通路富集分析(KEGG-analysis,BIOCARTA-analysis)。结果:炎症相关mi R-146a和癌症相关mi R-27a、mi R-29a、mi R-20a、mi R-21在UC、CD和CAC中的表达都显著高于正常结肠组织,且这一组mi RNA的靶基因都富集在癌症相关通路、免疫信号相关通路和炎癌转换相关通路上。结论:mi R-146a、mi R-27a、mi R-29a、mi R-20a和mi R-21可能是参与肠炎向结直肠癌转化的一组mi RNA。 展开更多

关键词 微小核糖核酸 溃疡性结肠炎 克罗恩病 肠炎相关结直肠癌 实时荧光定量聚合酶链反 应 GO分析 KEGG分析 BIOCARTA分析

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不同促渗剂对复方红茴香喷雾剂体外透皮吸收的影响 被引量：8

14

作者 王曙东 刘文雅 +1 位作者 王争 李克 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期84-86,共3页

目的研究促渗剂对复方红茴香喷雾剂透皮吸收作用的影响,筛选促渗剂的种类及其用量。方法采用正交试验设计,进行离体小鼠皮肤体外透皮扩散试验,以复方红茴香喷雾剂中槲皮苷的累积渗透量及渗透速率为指标,考察最优处方。结果不同促渗剂对... 目的研究促渗剂对复方红茴香喷雾剂透皮吸收作用的影响,筛选促渗剂的种类及其用量。方法采用正交试验设计,进行离体小鼠皮肤体外透皮扩散试验,以复方红茴香喷雾剂中槲皮苷的累积渗透量及渗透速率为指标,考察最优处方。结果不同促渗剂对槲皮苷的累积渗透量及渗透速率影响大小为:冰片>薄荷油>氮酮>PEG400,冰片具有显著性差异(P<0.05),PEG400影响较小。结论 1%氮酮、2%薄荷油、1%PEG400和2%冰片可作为最优促渗剂方案在复方红茴香喷雾剂中使用。 展开更多

关键词 复方红茴香喷雾剂 正交试验 促渗剂

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大孔吸附树脂富集雷公藤内酯醇的研究 被引量：6

15

作者 王曙东 滕英博 +1 位作者 谢虞昇 李克 《医学研究生学报》 CAS 2005年第3期204-205,共2页

　目的:应用大孔吸附树脂D101型分离、纯化雷公藤内酯醇。　方法:用醇提水沉后,经D101树脂吸附及氧化铝柱除杂,用 95%乙醇解吸,高压液相色谱(HPLC)测定含量。　结果:雷公藤内酯醇可得到较好的保留。　结论:D101可应用于雷公藤内酯醇的... 　目的:应用大孔吸附树脂D101型分离、纯化雷公藤内酯醇。　方法:用醇提水沉后,经D101树脂吸附及氧化铝柱除杂,用 95%乙醇解吸,高压液相色谱(HPLC)测定含量。　结果:雷公藤内酯醇可得到较好的保留。　结论:D101可应用于雷公藤内酯醇的富集。 展开更多

关键词 雷公藤内酯醇 大孔吸附树脂 高效液相色谱法

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尿NMP-22对诊断膀胱移行细胞癌的临床意义 被引量：3

16

作者 葛京平 高建平 +5 位作者 张征宇 薛松 徐林锋 梁培禾 齐名 熊华 《医学研究生学报》 CAS 2003年第7期521-523,共3页

目的 :探讨尿核基质蛋白 2 2 (NMP 2 2 )在诊断膀胱移行细胞癌 (BTCC)中的价值 ,并与尿脱落细胞学 (VUC)检查进行比较。　方法 :6 9例患者分为三组 ,BTCC组 30例 ,非膀胱癌 (NBC)组 2 9例 ,健康人 (对照 )组 1 0例。采用酶联免疫吸附法 ... 目的 :探讨尿核基质蛋白 2 2 (NMP 2 2 )在诊断膀胱移行细胞癌 (BTCC)中的价值 ,并与尿脱落细胞学 (VUC)检查进行比较。　方法 :6 9例患者分为三组 ,BTCC组 30例 ,非膀胱癌 (NBC)组 2 9例 ,健康人 (对照 )组 1 0例。采用酶联免疫吸附法 (ELISA)对尿中的NMP 2 2进行测定。　结果 :BTCC组尿中NMP 2 2显著高于NBC组和对照组 (P <0 .0 1 )。ROC曲线分析表明 ,NMP 2 2检测BTCC的最佳临界值为 8.35U/ml。NMP 2 2诊断BTCC的敏感性显著高于VUC检查 (P <0 .0 5 )。而VUC的特异性则高于NMP 2 2 (P <0 .0 5 )。NMP 2 2诊断表浅性BTCC(临床Ta ,T1 期 )的敏感性显著高于VUC(P <0 .0 5 ) ,对于浸润性BTCC ,二者相比差异不显著 (P >0 .0 5 )。NMP 2 2对病理Ⅰ、Ⅱ级BTCC诊断的敏感性显著高于VUC检查 (P <0 .0 5 ) ,而二者对Ⅲ级BTCC诊断的敏感性则差异不显著 (P >0 .0 5 )。　结论 :检测尿中NMP 2 2有助于BTCC的早期诊断 ,对低期低级BTCC诊断的敏感性高于VUC。 展开更多

关键词 膀胱移行细胞癌 肿瘤 诊断 核基质蛋白22

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甲醇沉淀法去除人血清高丰度蛋白质的实验研究 被引量：5

17

作者 曹璐颖 郑文杰 李克 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第11期1151-1154,共4页

目的常用人血清高丰度蛋白质(high abundant proteins,HAP)去除方法操作较繁且成本高,文中探索建立简便有效的甲醇沉淀法去除人血清HAP。方法用不同体积的甲醇处理血清样品,然后与原血清样品上样进行十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(s... 目的常用人血清高丰度蛋白质(high abundant proteins,HAP)去除方法操作较繁且成本高,文中探索建立简便有效的甲醇沉淀法去除人血清HAP。方法用不同体积的甲醇处理血清样品,然后与原血清样品上样进行十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析,并对去除HAP后的样品进行蛋白定量检测。结果 SDS-PAGE显示,经甲醇处理过的血清样品与原血清电泳结果相比,相对分子质量在50 000～80 000间的清蛋白等HAP被明显去除,血清清蛋白平均浓度显著降低,由(47.65±0.35)g/L下降至(1.16±0.08)g/L,去除率达97%以上,占血清总蛋白质比例由65.4%下降为49.3%,其差异具有统计学意义(P<0.01)。同时一些被HAP掩盖的低丰度蛋白质(low abundant proteins,LAP)有所显现和保留。结论甲醇沉淀法可简便有效地去除人血清中清蛋白等HAP,为进一步行血清蛋白质组学分析奠定基础。 展开更多

关键词 甲醇沉淀法 高丰度蛋白质 低丰度蛋白质 清蛋白去除

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血清miRNAs在局灶节段性肾小球硬化及微小病变性肾病中的表达 被引量：3

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作者 蔡晓懿 夏正坤 +7 位作者 张春妮 罗阳 高远赋 樊忠民 刘梦原 张莹 李静 张婕 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期328-330,共3页

目的研究局灶节段性肾小球硬化(FSGS)及微小病变性肾病(MCD)患儿miRNA的表达水平,及其与尿蛋白水平的相关性。方法选取60例经肾活检及临床确诊为FSGS(30例)、MCD(30例)的患儿,以及年龄、性别相匹配的20例正常对照儿童,用实时荧光定量PC... 目的研究局灶节段性肾小球硬化(FSGS)及微小病变性肾病(MCD)患儿miRNA的表达水平,及其与尿蛋白水平的相关性。方法选取60例经肾活检及临床确诊为FSGS(30例)、MCD(30例)的患儿,以及年龄、性别相匹配的20例正常对照儿童,用实时荧光定量PCR检测血清miR-192、miR-205水平,同时收集FSGS、MCD患儿的24 h尿蛋白及其他生化指标。结果 FSGS患儿血清miR-192、miR205表达水平明显高于MCD患儿及正常对照儿童,且与尿蛋白水平呈正相关;MCD患儿miR-205表达水平与正常对照儿童差异无统计学意义。结论 FSGS患儿血清miR-192、miR-205表达显著上调,有望作为FSGS诊断的生物标记物。 展开更多

关键词 MIRNA 局灶节段性肾小球硬化 微小病变性肾病 足细胞病

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反相离子对高效液相色谱法测定人血浆中阿昔洛韦浓度及药代动力学 被引量：7

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作者 赵飞浪 罗楠 袁倚盛 《中国药科大学学报》 CSCD 北大核心 1996年第11期674-676,共3页

建立了用反相离子对高效液相色谱法测定人血浆中阿昔洛韦浓度的方法。色谱柱采用ＡｌｌｔｅｃｈＣ＿１８分析柱，以０．０４ｍｏｌ／Ｌ氯化钠－甲醇－ＩＰＲ－Ｂ７离子对色谱试剂混合液（１００：１５：０．６；ｖ／ｖ）为流动相。检测... 建立了用反相离子对高效液相色谱法测定人血浆中阿昔洛韦浓度的方法。色谱柱采用ＡｌｌｔｅｃｈＣ＿１８分析柱，以０．０４ｍｏｌ／Ｌ氯化钠－甲醇－ＩＰＲ－Ｂ７离子对色谱试剂混合液（１００：１５：０．６；ｖ／ｖ）为流动相。检测波长为２５４ｎｍ，肾上腺素为内标。血浆样品经高氯酸沉淀蛋白后直接进样测定。阿昔洛韦浓度在４０～１６００ｎｇ／ｍｌ范围内线性良好，ｒ＝０．９９９２．测定含阿苷洛韦１６０ｎｇ／ｍｌ的血浆样品，其日内（ｎ＝７）及日间的ＲＳＤ分别为４．７％和３．０％。平均回收率为９８．２±５．３％。测定了１０名健康志愿者单次口服阿昔洛韦片剂４００ｍｇ后不同时间的血药浓度并计算了有关的药代动力学参数。 展开更多

关键词 阿昔洛韦 高效液相色谱 药代动力学

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肾病综合征患儿血清β_2-糖蛋白I/氧化低密度脂蛋白复合物水平升高的研究 被引量：11

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作者 黄中伟 季茳 +7 位作者 牛冬梅 罗阳 蔡晓懿 夏正坤 杨玉华 钟天鹰 汪俊军 张春妮 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2013年第2期142-146,共5页

目的在血循环中氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)易与β2-糖蛋白I(β2-glycoproteinI,β2-GPI)结合成稳定的β2-GPI/ox-LDL复合物,该复合物是血栓形成和动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)发生的新的危险因素... 目的在血循环中氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)易与β2-糖蛋白I(β2-glycoproteinI,β2-GPI)结合成稳定的β2-GPI/ox-LDL复合物,该复合物是血栓形成和动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)发生的新的危险因素。原发性小儿肾病综合征(nephritic syndrome,NS)患者伴有高脂血症和高氧化应急状态,具有肾小球硬化和血栓的危险性。文中检测NS患儿血清β2-GPI/ox-LDL复合物水平,分析其与NS病情的关系。方法以抗人β2-GPI抗体为包被抗体,酶标记抗载脂蛋白B(apo B)为检测抗体的血清β2-GPI/ox-LDL ELISA检测法,检测84例NS患儿和84例年龄、性别匹配的健康儿童(对照组)的血清。用ELISA法检测血清ox-LDL浓度,同时检测研究对象常规血脂水平和肾功能指标。结果 NS患儿血清β2-GPI/ox-LDL水平显著高于对照组[(1.08±0.47)U/ml vs(0.54±0.29)U/ml,P<0.001],ox-LDL浓度也明显升高[(143.76±64.55)mg/L vs(89.11±53.80)mg/L,P<0.01]。相关分析显示,β2-GPI/ox-LDL水平与ox-LDL(r=0.721)、LDL-C(r=0.518)、TC(r=0.503)、TG(r=0.380)以及尿蛋白(r=0.326)显著正相关(均为P<0.01),与血清清蛋白(Alb)显著负相关(r=-0.417,P<0.01)。进一步多因素分析显示,NS患儿β2-GPI/ox-LDL复合物水平49.5%的变化由ox-LDL(β=0.527,P<0.01)、尿蛋白(β=0.172,P=0.036)和LDL-C(β=0.203,P=0.037)决定。结论血清β2-GPI/ox-LDL水平升高与NS患儿病情有关。 展开更多

关键词 小儿肾病综合征 β2-糖蛋白I/氧化低密度脂蛋白复合物 氧化应激 病情

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