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益气养阴法治疗慢性呼吸系统疾病举隅
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作者 夏骏 王文龙 徐丽华 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2007年第5期658-660,共3页
介绍运用中药益气养阴法治疗慢性呼吸系统疾病4则,有慢性阻塞性肺病、慢性咽炎、慢性肺源性心脏病、肺癌晚期。阐述方药治疗经过等。
关键词 临床心得 益气养阴法 呼吸系统疾病 中医药疗法
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环状RNA CircHIPK3通过miR-379调控IGF1表达促进非小细胞肺癌细胞系NCI-H1299与NCI-H2170的细胞增殖 被引量:27
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作者 田芳 王云 +1 位作者 肖哲 朱学军 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期459-467,共9页
背景与目的已有的研究证明:环状RNA是一类在哺乳动物中普遍存在的具有稳定闭合环状结构的内源性RNA分子。环状RNA circHIPK3(circular RNA HIPK3,circHIPK3)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中表达水平较高,促进肝癌细胞生长... 背景与目的已有的研究证明:环状RNA是一类在哺乳动物中普遍存在的具有稳定闭合环状结构的内源性RNA分子。环状RNA circHIPK3(circular RNA HIPK3,circHIPK3)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中表达水平较高,促进肝癌细胞生长。但是其在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的作用及其调控机制尚无文献报道。本研究拟探讨环状RNA circHIPK3对NSCLC细胞系NCI-H1299和NCI-H2170细胞增殖的影响,并进一步研究其调控的分子机制。方法 Real-time PCR法检测circHIPK3在NSCLC各细胞系中的表达水平。CCK-8实验和克隆形成实验检测过量表达和干扰circHIPK3对细胞增殖的影响。双荧光素酶报告基因实验分别检验miR-379与circHIPK3及miR-379与IGF1 m RNA的结合情况。Western blot和ELISA检测细胞内外的IGF1蛋白表达水平。结果环状RNA circHIPK3在6株NSCLC细胞株中均有表达,其中H1299表达最低,H2170表达最高,通过转染过表达的circHIPK3可显著促进NCI-H1299细胞增殖,干扰circHIPK3可显著抑制NCI-H2170细胞增殖。miR-379可与circHIPK3及IGF1 m RNA直接结合。过表达circHIPK3导致IGF1表达量上调,干扰circHIPK3能够下调IGF1表达水平,转入miR-379 mimics恢复了circHIPK3稳转细胞株IGF1表达水平的上调及细胞增殖表型。结论环状RNA circHIPK3在NSCLC细胞系NCI-H1299及NCI-H2170中可通过miR-379调控IGF1表达促进细胞增殖,环状RNA circHIPK3可能成为非小细胞肺癌治疗的新靶点。 展开更多
关键词 肺肿瘤 环状RNA CircHIPK3 增殖
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三种方法气管灌注博来霉素诱导小鼠肺纤维化的比较 被引量:13
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作者 王志超 冯凡超 +3 位作者 武琦 顾诚 徐泳 周贤梅 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期51-57,共7页
目的利用腰穿针气管插管、留置针气管插管和气管切开三种不同方法对C57BL/6J小鼠进行气管注射博来霉素诱导肺纤维化,探索腰穿针气管插管造模法、留置针气管插管造模法及气管切开造模法这三种方法对小鼠的影响。方法将120只C57BL/6J小鼠... 目的利用腰穿针气管插管、留置针气管插管和气管切开三种不同方法对C57BL/6J小鼠进行气管注射博来霉素诱导肺纤维化,探索腰穿针气管插管造模法、留置针气管插管造模法及气管切开造模法这三种方法对小鼠的影响。方法将120只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、腰穿针气管插管模型组、留置针气管插管模型组和气管切开模型组,分别利用不同方法气管注射博来霉素,观察小鼠的一般情况(体重变化和存活率)、组织病理学改变(HE和Masson染色)和羟脯氨酸水平。结果腰穿针气管插管模型组、留置针气管插管模型组造模后28 d小鼠体重均高于气管切开模型组,有统计学差异(P<0.01、P<0.001);各组小鼠存活率存在差异,除空白组外,气管切开模型组最低,留置针气管插管模型组最高,空白组和气管切开模型间有统计学差异(P<0.05),其余各组间没有统计学意义;肺组织肺泡炎及肺纤维化程度由高到低依次为气管切开模型组、腰穿针气管插管模型组和留置针气管插管模型组,且造模后21 d最重;气管切开模型组病灶分布均匀,腰穿针气管插管模型组和留置针气管插管模型组分布不均匀,以气管周围肺组织较重;腰穿针气管插管模型组和气管切开模型组造模后28 d羟脯氨酸水平显著高于空白组(P<0.01、P<0.001)。结论综合多种因素,腰穿针气管插管造模法是三种造模方法中的最佳方法。 展开更多
关键词 博莱霉素 肺纤维化 动物模型 气管灌注 小鼠
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改良组织法高效分离纯化成年小鼠肺成纤维细胞 被引量:3
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作者 王志超 武琦 +2 位作者 冯凡超 金译涵 周贤梅 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第12期2842-2844,3090,3091,共5页
目的:从C57BL/6成年雄性小鼠肺组织中高效分离、纯化肺成纤维细胞。方法:用改良的组织法分离小鼠肺成纤维细胞,并用差时贴壁法进行纯化。结果:改良的组织法可以在第8天获得原代小鼠肺成纤维细胞,差时贴壁法纯化后获得的第一代小鼠肺成... 目的:从C57BL/6成年雄性小鼠肺组织中高效分离、纯化肺成纤维细胞。方法:用改良的组织法分离小鼠肺成纤维细胞,并用差时贴壁法进行纯化。结果:改良的组织法可以在第8天获得原代小鼠肺成纤维细胞,差时贴壁法纯化后获得的第一代小鼠肺成纤维细胞3d可长满单层,继续传代后2d可长满单层,培养5~7代后成纤维细胞保持较好的细胞活性。结论:改良的组织法能够高效获得数量可观、活性较好的小鼠肺成纤维细胞。 展开更多
关键词 小鼠肺成纤维细胞 改良组织法 原代培养
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circSMARCA5通过CCL5富集Treg细胞促进非小细胞肺癌细胞的增殖 被引量:1
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作者 季娟娟 王谦 +4 位作者 孙露露 郁文越 宝音 朱佳 田芳 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期586-593,共8页
目的:检测circSMRCA5在非小细胞肺癌(NSCLC)组织和细胞中的表达,以及其在NSCLC发生发展中的潜在功能和机制。方法:用qPCR法检测circSMARCA5在NSCLC组织中的表达。使用慢病毒转染法将circSMARCA5过表达质粒和对照质粒pLC5分别转染人肺癌A... 目的:检测circSMRCA5在非小细胞肺癌(NSCLC)组织和细胞中的表达,以及其在NSCLC发生发展中的潜在功能和机制。方法:用qPCR法检测circSMARCA5在NSCLC组织中的表达。使用慢病毒转染法将circSMARCA5过表达质粒和对照质粒pLC5分别转染人肺癌A549和H1975细胞。采用qPCR法检测稳定转染细胞中circSMARCA5的表达水平。通过CCK-8、克隆形成、细胞周期和异种移植瘤实验检测circSMARCA5过表达对A549和H1975细胞生物学行为的影响。通过转录组测序、KEGG和GO富集分析,确定circSMARCA5可能的靶基因。分别构建circSMARCA5过表达A549、Lewis细胞BABL/c裸鼠和免疫正常的C57小鼠皮下移植瘤模型,观察circSMARCA5对裸鼠皮下移植瘤生长的影响,流式细胞术检测对Lewis细胞移植瘤组织中Treg细胞水平的影响。结果:circSMARCA5在NSCLC组织中呈高表达(P<0.01)。过表达circSMARCA5可以在体外促进NSCLC细胞的增殖(P<0.05,P<0.01)。体内实验中,circSMARCA5可以促进裸鼠皮下移植瘤的生长(P<0.01)。机制上,经KEGG和GO富集分析,确定C-C趋化因子配体5(CCL5)为circSMARCA5的下游靶基因。过表达circSMARCA5组A549和H1975细胞中CCL5的表达量增加(均P<0.05)。circSMARCA5介导的CCL5上调促进了免疫正常的C57小鼠皮下移植瘤的生长。C57小鼠皮下移植瘤制备成的单细胞悬液行流式细胞术检测显示,circSMARCA5过表达组的Treg细胞比例高于对照组[(3.1±0.5)%vs(1.0±0.1)%,P<0.05]。结论:circSMARCA5在NSCLC组织中呈高表达,其可能通过CCL5将Treg细胞招募到肿瘤中,导致肿瘤的免疫逃逸,促进NSCLC的进展。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 circSMARCA5 C-C趋化因子配体5 TREG细胞
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