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益气养阴法治疗慢性呼吸系统疾病举隅
1
作者
夏骏
王文龙
徐丽华
《辽宁中医杂志》
CAS
北大核心
2007年第5期658-660,共3页
介绍运用中药益气养阴法治疗慢性呼吸系统疾病4则,有慢性阻塞性肺病、慢性咽炎、慢性肺源性心脏病、肺癌晚期。阐述方药治疗经过等。
关键词
临床心得
益气养阴法
呼吸系统疾病
中医药疗法
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职称材料
环状RNA CircHIPK3通过miR-379调控IGF1表达促进非小细胞肺癌细胞系NCI-H1299与NCI-H2170的细胞增殖
被引量:
27
2
作者
田芳
王云
+1 位作者
肖哲
朱学军
《中国肺癌杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第7期459-467,共9页
背景与目的已有的研究证明:环状RNA是一类在哺乳动物中普遍存在的具有稳定闭合环状结构的内源性RNA分子。环状RNA circHIPK3(circular RNA HIPK3,circHIPK3)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中表达水平较高,促进肝癌细胞生长...
背景与目的已有的研究证明:环状RNA是一类在哺乳动物中普遍存在的具有稳定闭合环状结构的内源性RNA分子。环状RNA circHIPK3(circular RNA HIPK3,circHIPK3)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中表达水平较高,促进肝癌细胞生长。但是其在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的作用及其调控机制尚无文献报道。本研究拟探讨环状RNA circHIPK3对NSCLC细胞系NCI-H1299和NCI-H2170细胞增殖的影响,并进一步研究其调控的分子机制。方法 Real-time PCR法检测circHIPK3在NSCLC各细胞系中的表达水平。CCK-8实验和克隆形成实验检测过量表达和干扰circHIPK3对细胞增殖的影响。双荧光素酶报告基因实验分别检验miR-379与circHIPK3及miR-379与IGF1 m RNA的结合情况。Western blot和ELISA检测细胞内外的IGF1蛋白表达水平。结果环状RNA circHIPK3在6株NSCLC细胞株中均有表达,其中H1299表达最低,H2170表达最高,通过转染过表达的circHIPK3可显著促进NCI-H1299细胞增殖,干扰circHIPK3可显著抑制NCI-H2170细胞增殖。miR-379可与circHIPK3及IGF1 m RNA直接结合。过表达circHIPK3导致IGF1表达量上调,干扰circHIPK3能够下调IGF1表达水平,转入miR-379 mimics恢复了circHIPK3稳转细胞株IGF1表达水平的上调及细胞增殖表型。结论环状RNA circHIPK3在NSCLC细胞系NCI-H1299及NCI-H2170中可通过miR-379调控IGF1表达促进细胞增殖,环状RNA circHIPK3可能成为非小细胞肺癌治疗的新靶点。
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关键词
肺肿瘤
环状RNA
CircHIPK3
增殖
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职称材料
三种方法气管灌注博来霉素诱导小鼠肺纤维化的比较
被引量:
13
3
作者
王志超
冯凡超
+3 位作者
武琦
顾诚
徐泳
周贤梅
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2019年第5期51-57,共7页
目的利用腰穿针气管插管、留置针气管插管和气管切开三种不同方法对C57BL/6J小鼠进行气管注射博来霉素诱导肺纤维化,探索腰穿针气管插管造模法、留置针气管插管造模法及气管切开造模法这三种方法对小鼠的影响。方法将120只C57BL/6J小鼠...
目的利用腰穿针气管插管、留置针气管插管和气管切开三种不同方法对C57BL/6J小鼠进行气管注射博来霉素诱导肺纤维化,探索腰穿针气管插管造模法、留置针气管插管造模法及气管切开造模法这三种方法对小鼠的影响。方法将120只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、腰穿针气管插管模型组、留置针气管插管模型组和气管切开模型组,分别利用不同方法气管注射博来霉素,观察小鼠的一般情况(体重变化和存活率)、组织病理学改变(HE和Masson染色)和羟脯氨酸水平。结果腰穿针气管插管模型组、留置针气管插管模型组造模后28 d小鼠体重均高于气管切开模型组,有统计学差异(P<0.01、P<0.001);各组小鼠存活率存在差异,除空白组外,气管切开模型组最低,留置针气管插管模型组最高,空白组和气管切开模型间有统计学差异(P<0.05),其余各组间没有统计学意义;肺组织肺泡炎及肺纤维化程度由高到低依次为气管切开模型组、腰穿针气管插管模型组和留置针气管插管模型组,且造模后21 d最重;气管切开模型组病灶分布均匀,腰穿针气管插管模型组和留置针气管插管模型组分布不均匀,以气管周围肺组织较重;腰穿针气管插管模型组和气管切开模型组造模后28 d羟脯氨酸水平显著高于空白组(P<0.01、P<0.001)。结论综合多种因素,腰穿针气管插管造模法是三种造模方法中的最佳方法。
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关键词
博莱霉素
肺纤维化
动物模型
气管灌注
小鼠
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职称材料
改良组织法高效分离纯化成年小鼠肺成纤维细胞
被引量:
3
4
作者
王志超
武琦
+2 位作者
冯凡超
金译涵
周贤梅
《中华中医药学刊》
CAS
北大核心
2018年第12期2842-2844,3090,3091,共5页
目的:从C57BL/6成年雄性小鼠肺组织中高效分离、纯化肺成纤维细胞。方法:用改良的组织法分离小鼠肺成纤维细胞,并用差时贴壁法进行纯化。结果:改良的组织法可以在第8天获得原代小鼠肺成纤维细胞,差时贴壁法纯化后获得的第一代小鼠肺成...
目的:从C57BL/6成年雄性小鼠肺组织中高效分离、纯化肺成纤维细胞。方法:用改良的组织法分离小鼠肺成纤维细胞,并用差时贴壁法进行纯化。结果:改良的组织法可以在第8天获得原代小鼠肺成纤维细胞,差时贴壁法纯化后获得的第一代小鼠肺成纤维细胞3d可长满单层,继续传代后2d可长满单层,培养5~7代后成纤维细胞保持较好的细胞活性。结论:改良的组织法能够高效获得数量可观、活性较好的小鼠肺成纤维细胞。
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关键词
小鼠肺成纤维细胞
改良组织法
原代培养
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职称材料
circSMARCA5通过CCL5富集Treg细胞促进非小细胞肺癌细胞的增殖
被引量:
1
5
作者
季娟娟
王谦
+4 位作者
孙露露
郁文越
宝音
朱佳
田芳
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第7期586-593,共8页
目的:检测circSMRCA5在非小细胞肺癌(NSCLC)组织和细胞中的表达,以及其在NSCLC发生发展中的潜在功能和机制。方法:用qPCR法检测circSMARCA5在NSCLC组织中的表达。使用慢病毒转染法将circSMARCA5过表达质粒和对照质粒pLC5分别转染人肺癌A...
目的:检测circSMRCA5在非小细胞肺癌(NSCLC)组织和细胞中的表达,以及其在NSCLC发生发展中的潜在功能和机制。方法:用qPCR法检测circSMARCA5在NSCLC组织中的表达。使用慢病毒转染法将circSMARCA5过表达质粒和对照质粒pLC5分别转染人肺癌A549和H1975细胞。采用qPCR法检测稳定转染细胞中circSMARCA5的表达水平。通过CCK-8、克隆形成、细胞周期和异种移植瘤实验检测circSMARCA5过表达对A549和H1975细胞生物学行为的影响。通过转录组测序、KEGG和GO富集分析,确定circSMARCA5可能的靶基因。分别构建circSMARCA5过表达A549、Lewis细胞BABL/c裸鼠和免疫正常的C57小鼠皮下移植瘤模型,观察circSMARCA5对裸鼠皮下移植瘤生长的影响,流式细胞术检测对Lewis细胞移植瘤组织中Treg细胞水平的影响。结果:circSMARCA5在NSCLC组织中呈高表达(P<0.01)。过表达circSMARCA5可以在体外促进NSCLC细胞的增殖(P<0.05,P<0.01)。体内实验中,circSMARCA5可以促进裸鼠皮下移植瘤的生长(P<0.01)。机制上,经KEGG和GO富集分析,确定C-C趋化因子配体5(CCL5)为circSMARCA5的下游靶基因。过表达circSMARCA5组A549和H1975细胞中CCL5的表达量增加(均P<0.05)。circSMARCA5介导的CCL5上调促进了免疫正常的C57小鼠皮下移植瘤的生长。C57小鼠皮下移植瘤制备成的单细胞悬液行流式细胞术检测显示,circSMARCA5过表达组的Treg细胞比例高于对照组[(3.1±0.5)%vs(1.0±0.1)%,P<0.05]。结论:circSMARCA5在NSCLC组织中呈高表达,其可能通过CCL5将Treg细胞招募到肿瘤中,导致肿瘤的免疫逃逸,促进NSCLC的进展。
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关键词
非小细胞肺癌
circSMARCA5
C-C趋化因子配体5
TREG细胞
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职称材料
题名
益气养阴法治疗慢性呼吸系统疾病举隅
1
作者
夏骏
王文龙
徐丽华
机构
南京中医药大学附属江苏省中医院呼吸科
出处
《辽宁中医杂志》
CAS
北大核心
2007年第5期658-660,共3页
文摘
介绍运用中药益气养阴法治疗慢性呼吸系统疾病4则,有慢性阻塞性肺病、慢性咽炎、慢性肺源性心脏病、肺癌晚期。阐述方药治疗经过等。
关键词
临床心得
益气养阴法
呼吸系统疾病
中医药疗法
分类号
R249.8 [医药卫生—中医临床基础]
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职称材料
题名
环状RNA CircHIPK3通过miR-379调控IGF1表达促进非小细胞肺癌细胞系NCI-H1299与NCI-H2170的细胞增殖
被引量:
27
2
作者
田芳
王云
肖哲
朱学军
机构
厦门
大学
生命
科
学
科
学院
南京中医药大学附属江苏省中医院呼吸科
出处
《中国肺癌杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第7期459-467,共9页
基金
国家自然科学基金项目(No.30670917)资助~~
文摘
背景与目的已有的研究证明:环状RNA是一类在哺乳动物中普遍存在的具有稳定闭合环状结构的内源性RNA分子。环状RNA circHIPK3(circular RNA HIPK3,circHIPK3)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中表达水平较高,促进肝癌细胞生长。但是其在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的作用及其调控机制尚无文献报道。本研究拟探讨环状RNA circHIPK3对NSCLC细胞系NCI-H1299和NCI-H2170细胞增殖的影响,并进一步研究其调控的分子机制。方法 Real-time PCR法检测circHIPK3在NSCLC各细胞系中的表达水平。CCK-8实验和克隆形成实验检测过量表达和干扰circHIPK3对细胞增殖的影响。双荧光素酶报告基因实验分别检验miR-379与circHIPK3及miR-379与IGF1 m RNA的结合情况。Western blot和ELISA检测细胞内外的IGF1蛋白表达水平。结果环状RNA circHIPK3在6株NSCLC细胞株中均有表达,其中H1299表达最低,H2170表达最高,通过转染过表达的circHIPK3可显著促进NCI-H1299细胞增殖,干扰circHIPK3可显著抑制NCI-H2170细胞增殖。miR-379可与circHIPK3及IGF1 m RNA直接结合。过表达circHIPK3导致IGF1表达量上调,干扰circHIPK3能够下调IGF1表达水平,转入miR-379 mimics恢复了circHIPK3稳转细胞株IGF1表达水平的上调及细胞增殖表型。结论环状RNA circHIPK3在NSCLC细胞系NCI-H1299及NCI-H2170中可通过miR-379调控IGF1表达促进细胞增殖,环状RNA circHIPK3可能成为非小细胞肺癌治疗的新靶点。
关键词
肺肿瘤
环状RNA
CircHIPK3
增殖
Keywords
Lung neoplasms
Circular RNA
CircHIPK3
Proliferation
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
三种方法气管灌注博来霉素诱导小鼠肺纤维化的比较
被引量:
13
3
作者
王志超
冯凡超
武琦
顾诚
徐泳
周贤梅
机构
南京中医药大学
附属
医院
江苏省中医院
呼吸
科
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2019年第5期51-57,共7页
基金
国家自然科学基金(81673936)
江苏省研究生科研与实践创新计划项目(KYCX18_1575)
文摘
目的利用腰穿针气管插管、留置针气管插管和气管切开三种不同方法对C57BL/6J小鼠进行气管注射博来霉素诱导肺纤维化,探索腰穿针气管插管造模法、留置针气管插管造模法及气管切开造模法这三种方法对小鼠的影响。方法将120只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、腰穿针气管插管模型组、留置针气管插管模型组和气管切开模型组,分别利用不同方法气管注射博来霉素,观察小鼠的一般情况(体重变化和存活率)、组织病理学改变(HE和Masson染色)和羟脯氨酸水平。结果腰穿针气管插管模型组、留置针气管插管模型组造模后28 d小鼠体重均高于气管切开模型组,有统计学差异(P<0.01、P<0.001);各组小鼠存活率存在差异,除空白组外,气管切开模型组最低,留置针气管插管模型组最高,空白组和气管切开模型间有统计学差异(P<0.05),其余各组间没有统计学意义;肺组织肺泡炎及肺纤维化程度由高到低依次为气管切开模型组、腰穿针气管插管模型组和留置针气管插管模型组,且造模后21 d最重;气管切开模型组病灶分布均匀,腰穿针气管插管模型组和留置针气管插管模型组分布不均匀,以气管周围肺组织较重;腰穿针气管插管模型组和气管切开模型组造模后28 d羟脯氨酸水平显著高于空白组(P<0.01、P<0.001)。结论综合多种因素,腰穿针气管插管造模法是三种造模方法中的最佳方法。
关键词
博莱霉素
肺纤维化
动物模型
气管灌注
小鼠
Keywords
bleomycin
pulmonary fibrosis
animal model
intratrachedar instilation
mouse
分类号
R-33 [医药卫生]
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职称材料
题名
改良组织法高效分离纯化成年小鼠肺成纤维细胞
被引量:
3
4
作者
王志超
武琦
冯凡超
金译涵
周贤梅
机构
南京中医药大学
附属
医院
江苏省中医院
呼吸
科
出处
《中华中医药学刊》
CAS
北大核心
2018年第12期2842-2844,3090,3091,共5页
基金
国家自然科学基金项目(81673936)
文摘
目的:从C57BL/6成年雄性小鼠肺组织中高效分离、纯化肺成纤维细胞。方法:用改良的组织法分离小鼠肺成纤维细胞,并用差时贴壁法进行纯化。结果:改良的组织法可以在第8天获得原代小鼠肺成纤维细胞,差时贴壁法纯化后获得的第一代小鼠肺成纤维细胞3d可长满单层,继续传代后2d可长满单层,培养5~7代后成纤维细胞保持较好的细胞活性。结论:改良的组织法能够高效获得数量可观、活性较好的小鼠肺成纤维细胞。
关键词
小鼠肺成纤维细胞
改良组织法
原代培养
Keywords
mice lung fibroblasts
modified tissue method
primary culture
分类号
R-332 [医药卫生]
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职称材料
题名
circSMARCA5通过CCL5富集Treg细胞促进非小细胞肺癌细胞的增殖
被引量:
1
5
作者
季娟娟
王谦
孙露露
郁文越
宝音
朱佳
田芳
机构
南京中医药大学
附属
医院
江苏省中医院
呼吸
科
南京中医药大学
附属
医院
江苏省中医院
中心实验室
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第7期586-593,共8页
基金
国家自然科学基金(No.81803942)
南京中医药大学自然科学基金(No.XZR2020001)。
文摘
目的:检测circSMRCA5在非小细胞肺癌(NSCLC)组织和细胞中的表达,以及其在NSCLC发生发展中的潜在功能和机制。方法:用qPCR法检测circSMARCA5在NSCLC组织中的表达。使用慢病毒转染法将circSMARCA5过表达质粒和对照质粒pLC5分别转染人肺癌A549和H1975细胞。采用qPCR法检测稳定转染细胞中circSMARCA5的表达水平。通过CCK-8、克隆形成、细胞周期和异种移植瘤实验检测circSMARCA5过表达对A549和H1975细胞生物学行为的影响。通过转录组测序、KEGG和GO富集分析,确定circSMARCA5可能的靶基因。分别构建circSMARCA5过表达A549、Lewis细胞BABL/c裸鼠和免疫正常的C57小鼠皮下移植瘤模型,观察circSMARCA5对裸鼠皮下移植瘤生长的影响,流式细胞术检测对Lewis细胞移植瘤组织中Treg细胞水平的影响。结果:circSMARCA5在NSCLC组织中呈高表达(P<0.01)。过表达circSMARCA5可以在体外促进NSCLC细胞的增殖(P<0.05,P<0.01)。体内实验中,circSMARCA5可以促进裸鼠皮下移植瘤的生长(P<0.01)。机制上,经KEGG和GO富集分析,确定C-C趋化因子配体5(CCL5)为circSMARCA5的下游靶基因。过表达circSMARCA5组A549和H1975细胞中CCL5的表达量增加(均P<0.05)。circSMARCA5介导的CCL5上调促进了免疫正常的C57小鼠皮下移植瘤的生长。C57小鼠皮下移植瘤制备成的单细胞悬液行流式细胞术检测显示,circSMARCA5过表达组的Treg细胞比例高于对照组[(3.1±0.5)%vs(1.0±0.1)%,P<0.05]。结论:circSMARCA5在NSCLC组织中呈高表达,其可能通过CCL5将Treg细胞招募到肿瘤中,导致肿瘤的免疫逃逸,促进NSCLC的进展。
关键词
非小细胞肺癌
circSMARCA5
C-C趋化因子配体5
TREG细胞
Keywords
non-small cell lung cancer(NSCLC)
circSMARCA5
CCL5
Treg cell
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
R730.3 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
益气养阴法治疗慢性呼吸系统疾病举隅
夏骏
王文龙
徐丽华
《辽宁中医杂志》
CAS
北大核心
2007
0
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职称材料
2
环状RNA CircHIPK3通过miR-379调控IGF1表达促进非小细胞肺癌细胞系NCI-H1299与NCI-H2170的细胞增殖
田芳
王云
肖哲
朱学军
《中国肺癌杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
27
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职称材料
3
三种方法气管灌注博来霉素诱导小鼠肺纤维化的比较
王志超
冯凡超
武琦
顾诚
徐泳
周贤梅
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2019
13
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职称材料
4
改良组织法高效分离纯化成年小鼠肺成纤维细胞
王志超
武琦
冯凡超
金译涵
周贤梅
《中华中医药学刊》
CAS
北大核心
2018
3
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职称材料
5
circSMARCA5通过CCL5富集Treg细胞促进非小细胞肺癌细胞的增殖
季娟娟
王谦
孙露露
郁文越
宝音
朱佳
田芳
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
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