目的:研究S100A4核定位在胰腺癌(pancreatic cancer,PC)转移中的作用与机制。方法:利用PC病程进展的组织芯片,通过免疫组化和HALO数字病理精准分析平台等技术,定量S100A4在组织细胞,特别是胞核中的表达情况,统计分析各检测指标与临床参...目的:研究S100A4核定位在胰腺癌(pancreatic cancer,PC)转移中的作用与机制。方法:利用PC病程进展的组织芯片,通过免疫组化和HALO数字病理精准分析平台等技术,定量S100A4在组织细胞,特别是胞核中的表达情况,统计分析各检测指标与临床参数及生存期之间的关系。通过分子结构信息学分析、质粒构建与转染以构建基因调控的不同分组细胞研究模型;利用核质蛋白分离、免疫共沉淀、Western blot、划痕实验、Transwell实验、靶向剪切及转座酶技术(cleavage under targets and tagmentation,CUT&Tag)等研究S100A4核定位在PC转移中的作用与机制。结果:S100A4的高表达及其核定位与PC的T、N分期和不良预后正相关。PC细胞中S100A4核定位受小泛素相关修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)修饰调控,泛素结合酶9介导了PC细胞中S100A4的K22和K96位点与SUMO1结合,并通过SUMO特异性蛋白酶1实现去SUMO化,动态平衡PC细胞中S100A4的SUMO化修饰水平;调控S100A4蛋白的SUMO化修饰可改变PC细胞的体外转移能力;CUT&Tag测序结果证明S100A4核定位参与调控与肿瘤转移功能相关的基因网络。结论:S100A4核定位可提示PC预后不良,有望成为临床治疗方案制定的重要依据。发现阻断或抑制S100A4核定位的办法,可能成为抑制PC转移,特别是早期转移,改善PC患者预后的新靶点。展开更多
文摘目的:研究S100A4核定位在胰腺癌(pancreatic cancer,PC)转移中的作用与机制。方法:利用PC病程进展的组织芯片,通过免疫组化和HALO数字病理精准分析平台等技术,定量S100A4在组织细胞,特别是胞核中的表达情况,统计分析各检测指标与临床参数及生存期之间的关系。通过分子结构信息学分析、质粒构建与转染以构建基因调控的不同分组细胞研究模型;利用核质蛋白分离、免疫共沉淀、Western blot、划痕实验、Transwell实验、靶向剪切及转座酶技术(cleavage under targets and tagmentation,CUT&Tag)等研究S100A4核定位在PC转移中的作用与机制。结果:S100A4的高表达及其核定位与PC的T、N分期和不良预后正相关。PC细胞中S100A4核定位受小泛素相关修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)修饰调控,泛素结合酶9介导了PC细胞中S100A4的K22和K96位点与SUMO1结合,并通过SUMO特异性蛋白酶1实现去SUMO化,动态平衡PC细胞中S100A4的SUMO化修饰水平;调控S100A4蛋白的SUMO化修饰可改变PC细胞的体外转移能力;CUT&Tag测序结果证明S100A4核定位参与调控与肿瘤转移功能相关的基因网络。结论:S100A4核定位可提示PC预后不良,有望成为临床治疗方案制定的重要依据。发现阻断或抑制S100A4核定位的办法,可能成为抑制PC转移,特别是早期转移,改善PC患者预后的新靶点。
