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题名木犀草素对巨噬细胞炎症极化的影响及机制
被引量:16
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作者
王书侠
姚孝明
葛亮
吉宁
蒋叶
曹萌
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机构
南京中医药大学附属中西医结合医院/江苏省中医药研究院检验科
南京中医药大学附属中西医结合医院/江苏省中医药研究院分子生物学研究中心
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出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期1013-1018,共6页
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基金
国家自然科学基金(81673945)
中国中医科学院江苏分院开放课题(FY201809).
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文摘
目的探讨木犀草素对细菌分泌的内毒素脂多糖(LPS)和γ-干扰素(IFN-γ)诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞炎症极化的影响及机制。方法以脂多糖和IFN-γ刺激RAW264.7细胞诱导M1型极化;白细胞介素(IL)-4刺激细胞诱导其向M2型极化。木犀草素处理后,激光共聚焦显微镜观察细胞形态的改变。流式细胞术检测细胞膜表面CD86的表达。qPCR分别检测M1型标志分子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-1β、IL-6和M2型标志分子精氨酸酶(Arg)1、CD206、CD163等基因的表达。ELISA检测上清IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌。Westernblotting检测蛋白通路磷酸化信号转导和转录激活因子(p-STAT)3(ser727)和p-STAT6(tyr641)的变化。结果活化的M1细胞形态变化明显,细胞呈梭形、树突状,胞核明显,表明M1细胞被极化。5、10、20μmol/L木犀草素作用于M1细胞后,M1型炎症因子iNOS mRNA的相对表达(分别为95.45±1.64、92.73±16.96、29.52±3.07)与M1组(98.91±10.65)相比明显下调(P<0.05),IL-1b mRNA的相对表达(分别为103.14±2.58、78.38±8.65、41.59±6.80)与M1组(110.69±4.12)相比明显下调(P<0.05),IL-6mRNA的相对表达(分别为177.51±19.28、106.14±5.63、27.15±1.26)与M1组(394.10±33.47)相比明显下调(P<0.05或P<0.01);而与M2型相关的抗炎因子Arg1 mRNA的相对表达(分别为3.22±1.44、4.99±0.99、7.63±2.33)与M1组(1.61±0.50)相比明显上调(P<0.05),CD206mRNA的相对表达(分别为1.21±0.44、1.70±0.53、4.23±1.71)与M1组相比(0.68±0.19)明显上调(P<0.05),CD163 mRNA的相对表达(分别为0.62±0.39、1.38±0.40、2.06±0.12)与M1组(0.41±0.14)相比明显上调(P<0.05);信号转导蛋白p-STAT3的表达明显下调;而p-STAT6的表达明显上调。结论木犀草素可能通过下调p-STAT3及上调p-STAT6来调节RAW264.7细胞的M1/M2极化,从而发挥抗炎作用。
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关键词
极化
信号转导
转录激活因子
小鼠巨噬细胞
木犀草素
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Keywords
polarization
signal transducers
activators of transcription
mouse macrophages
luteolin
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分类号
R285
[医药卫生—中药学]
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