中医证候动物模型建立及评价方法研究 被引量：3

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作者 杜利莉 章丹宁 +1 位作者 薛梅 卞勇 《南京中医药大学学报》 北大核心 2025年第1期11-18,共8页

中医证候动物模型是揭示中医基础理论、促进中医药临床发展的重要载体,更是促进中医药现代化与国际化不可或缺的重要工具。目前,中医证候动物模型建立方法多样,评价标准不一。基于五脏的主要生理功能,以临床常见的心气虚证、肝郁证、脾... 中医证候动物模型是揭示中医基础理论、促进中医药临床发展的重要载体,更是促进中医药现代化与国际化不可或缺的重要工具。目前,中医证候动物模型建立方法多样,评价标准不一。基于五脏的主要生理功能,以临床常见的心气虚证、肝郁证、脾气虚证、肺气虚证、肾阳虚证为代表,总结分析近年来最常用的中医证候动物模型的构建及评价方法,为建立更为科学客观的中医证候动物模型构建方法及评价体系提供参考。 展开更多

关键词 中医证候 动物模型 构建 评价 心气虚证 肝郁证 脾气虚证 肺气虚证 肾阳虚证

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补地参连方调节肠道菌群及肿瘤相关巨噬细胞表型转换发挥抗结直肠癌效应 被引量：2

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作者 周洪立 陈海彬 +3 位作者 庄育培 邱雯莉 梁雨薇 周红光 《南京中医药大学学报》 北大核心 2025年第4期442-455,共14页

目的探究补地参连方对结直肠癌(CRC)小鼠肠道菌群及肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)表型转换的调节作用。方法40只雄性BALB/c小鼠分为空白组、模型组、阳性对照(奥沙利铂)组、补地参连方高剂量组、补地参连方低剂量组,每组8只。通过皮下注射CT2... 目的探究补地参连方对结直肠癌(CRC)小鼠肠道菌群及肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)表型转换的调节作用。方法40只雄性BALB/c小鼠分为空白组、模型组、阳性对照(奥沙利铂)组、补地参连方高剂量组、补地参连方低剂量组,每组8只。通过皮下注射CT26细胞构建CRC荷瘤模型。此外,取10只雄性BALB/c小鼠分为补地参连方粪菌移植组(BFMT)以及模型粪菌移植组(MFMT),每组5只,通过四联抗生素混合溶液清除小鼠肠道定植菌,然后通过皮下注射CT26细胞构建伪无菌CRC荷瘤小鼠。收集上述模型组和补地参连方高剂量组的小鼠粪便用于制备粪菌液。BFMT组灌胃补地参连方高剂量治疗后CRC小鼠的粪菌液,MFMT组灌胃模型组CRC小鼠的粪菌液。观察记录小鼠肿瘤体积变化,HE染色评估小鼠肿瘤组织的病理形态学改变,并通过16S rRNA测序分析肠道菌群丰度和结构的变化,流式细胞术和免疫荧光染色评估肿瘤组织中M1/M2型TAMs的比例,ELISA法检测肿瘤组织中TNF-α和IL-10的含量。结果与模型组比较,阳性对照组和补地参连方高、低剂量组小鼠的肿瘤体积均生长缓慢(P<0.01)。HE染色显示,与模型组比较,阳性对照组和补地参连方各给药组肿瘤组织均出现坏死灶,且病理性核分裂象减少。16S rRNA测序显示,与模型组比较,补地参连方高剂量组的Chao1、ACE无统计学意义,而PCoA分析显示,空白组与模型组之间的菌群落结构明显不同,补地参连方组CRC小鼠的菌群结构更接近空白组,与空白组相比,模型组中Muribaculaceae、Muribaculum、Alloprevotella、Prevotellaceae_UCG-001的比例均明显减少,而模型组中Lachnospiraceae_NK4A136_group、Bacteroides、Helicobacter的比例均明显增加。而在给予CRC小鼠补地参连方后,可以观察到部分小鼠的群落结构向空白组小鼠的水平恢复。转录测序发现上调基因所涉及的生物学过程(BP)中Negative regulation of macrophage migration最为显著,揭示了补地参连方可以减少巨噬细胞的迁移。此外,与模型组比较,补地参连方组肿瘤组织中TAMs比例明显降低(P<0.001),M1型TAMs比例则明显升高(P<0.0001),M2型TAMs比例明显降低(P<0.05)。免疫荧光则显示出与流式细胞术相同的趋势。补地参连方组肿瘤组织中TNF-α含量明显升高(P<0.001),IL-10含量明显降低(P<0.001)。另一方面,与MFMT比较,BFMT组的肿瘤体积生长缓慢(P<0.0001)。HE染色显示BFMT组肿瘤组织内坏死面积增多,细胞排列变稀疏,病理性核分裂象减少。与MFMT组比较,BFMT组肿瘤组织中TAMs细胞比例明显降低(P<0.01),而BFMT组肿瘤组织中M1型TAMs细胞比例增加(P<0.0001),M2型TAMs细胞比例降低(P<0.01),免疫荧光实验进一步证实了补地参连方粪菌移植可以促进TAMs从M2型向M1型转换,减少肿瘤微环境中的免疫抑制。结论补地参连方可以改善CRC小鼠肠道菌群失调,并且可以通过减少TAMs的肿瘤浸润水平和调节TAMs的表型转换来发挥抗CRC作用,且二者之间可能具有一定相关性。 展开更多

关键词 肠道菌群 肿瘤相关巨噬细胞 结直肠癌 补地参连方 癌毒 温滋解毒法

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去甲泽拉木醛通过调控Th17细胞分化缓解溃疡性结肠炎与胶原诱导性关节炎的机制研究

3

作者 杨培音 时乐 +4 位作者 豆大海 施建新 梁涛 袁冬平 俞云 《南京中医药大学学报》 北大核心 2025年第10期1288-1299,共12页

目的探讨去甲泽拉木醛(Demethylzeylasteral,Dem)对溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)和胶原诱导性关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)的抗炎机制,考察其对Th17细胞分化的调控作用及相关信号通路。方法采用葡聚糖硫酸钠(DSS)建... 目的探讨去甲泽拉木醛(Demethylzeylasteral,Dem)对溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)和胶原诱导性关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)的抗炎机制,考察其对Th17细胞分化的调控作用及相关信号通路。方法采用葡聚糖硫酸钠(DSS)建立UC小鼠模型,分别给予Dem低剂量(1 mg·kg^(-1))与高剂量(2 mg·kg^(-1))灌胃处理,通过监测体质量变化、结肠长度及粪便指数评估疾病严重程度,并检测血清中炎症因子水平;流式细胞术分析肠系膜淋巴结中Th17细胞比例。进一步在CIA模型中验证Dem的疗效,并结合siRNA干预JAK2和STAT3表达,考察其在Th17分化中的作用机制。结果Dem处理组小鼠体质量减轻幅度降低、结肠缩短减轻,血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著下降(P<0.01),Th17细胞比例明显减少(P<0.01)。Western blot及siRNA实验显示,Dem通过抑制JAK2-STAT3通路磷酸化水平,显著抑制Th17细胞的分化与活化。CIA模型中Dem同样显著缓解关节炎症状和相关指标,验证了其抗炎作用。结论Dem可通过下调JAK2-STAT3信号通路,抑制Th17细胞的分化与促炎因子表达,从而发挥改善UC及类风湿关节炎的作用,提示其在免疫相关疾病治疗中的潜在应用价值。 展开更多

关键词 去甲泽拉木醛 溃疡性结肠炎 TH17细胞 JAK2-STAT3通路 胶原诱导性关节炎

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黄芪-莪术-重楼配伍调控巨噬细胞极化对结直肠癌细胞增殖、迁移影响 被引量：4

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作者 杜利莉 王钢 +5 位作者 梁研 赵凡 应佳辉 尹刚 唐德才 卞勇 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期137-144,共8页

目的探讨黄芪-莪术-重楼配伍对巨噬细胞极化的影响及其抑制结直肠癌细胞增殖、迁移的作用机制。方法使用佛波酯(Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)和白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)刺激THP-1细胞建立M2型巨噬细胞极化模型。实验... 目的探讨黄芪-莪术-重楼配伍对巨噬细胞极化的影响及其抑制结直肠癌细胞增殖、迁移的作用机制。方法使用佛波酯(Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)和白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)刺激THP-1细胞建立M2型巨噬细胞极化模型。实验分为M0组(PMA处理)、M2组(PMA+IL-4处理)、M2+黄芪-莪术-重楼组(PMA+IL-4+黄芪-莪术-重楼配伍处理)。CCK-8检测黄芪-莪术-重楼配伍冻干粉对巨噬细胞活力影响;qPCR和Western blot检测巨噬细胞极化标志物、谷氨酰胺酶(Glutaminase,GLS)mRNA和蛋白表达;ELISA检测细胞上清白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)、转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量;CCK-8和Transwell实验检测黄芪-莪术-重楼配伍干预巨噬细胞的培养上清,即条件培养基(Conditioned medium,CM),对结直肠癌细胞HCT116增殖和迁移能力影响。结果与M0组相比,M2组IL-10、甘露糖受体(Mannose receptor,CD206)、精氨酸酶1(Arginase 1,ARG1)、GLS mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.001),巨噬细胞分泌IL-10、TGF-β水平显著升高(P<0.01,P<0.001);与M2组相比,M2+黄芪-莪术-重楼配伍组IL-10、CD206、ARG1、GLS mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),TNF-α、诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001),白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)mRNA表达水平显著升高(P<0.01),细胞上清中IL-10、TGF-β水平显著降低(P<0.05,P<0.01),TNF-α水平显著升高(P<0.01)。CCK-8和Transwell结果显示,与M0-CM组相比,M2-CM组促进HCT116细胞增殖和迁移(P<0.01,P<0.001),M2+黄芪-莪术-重楼-CM组较M2-CM组显著抑制HCT116细胞增殖并使细胞迁移数显著减少(P<0.01,P<0.001)。结论黄芪-莪术-重楼配伍可通过调控巨噬细胞极化,抑制结直肠癌细胞增殖、迁移,其机制可能与谷氨酰胺代谢关键酶GLS表达变化有关。 展开更多

关键词 黄芪-莪术-重楼配伍 结直肠癌 迁移 巨噬细胞极化 GLS

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NOVA1在肿瘤发生、发展中作用的研究进展

5

作者 杜利莉 吴刘成 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第3期311-313,共3页

神经-肿瘤腹侧抗原1(neuro-oncological ventral antigen 1,NOVA1)是神经特异性剪接因子,在神经系统发育、功能维持中具有重要作用。近年,多项研究发现,在肺癌、肝癌、结直肠癌等肿瘤中,NOVA1可促进癌细胞增殖、迁移、侵袭,与预后密切... 神经-肿瘤腹侧抗原1(neuro-oncological ventral antigen 1,NOVA1)是神经特异性剪接因子,在神经系统发育、功能维持中具有重要作用。近年,多项研究发现,在肺癌、肝癌、结直肠癌等肿瘤中,NOVA1可促进癌细胞增殖、迁移、侵袭,与预后密切相关。该文就NOVA1在肿瘤发生、发展中作用的最新研究进展进行综述,探讨其调控机制和临床价值。 展开更多

关键词 肿瘤 NOVA1 剪接 预后 文献综述

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山楂叶总黄酮冻干粉对麻醉犬冠脉结扎所致心肌梗死的影响 被引量：31

6

作者 鞠晓云 方泰惠 张文通 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 2005年第6期381-383,共3页

目的研究山楂叶总黄酮对犬心肌梗死的保护作用。方法采用麻醉犬冠脉结扎导致心肌梗死的方法造模,观察给药前后的影响。结果山楂叶总黄酮冻干粉高、中剂量组能降低冠脉结扎所致心肌梗死麻醉犬的SAP、DAP、MAP。结论不同剂量山楂叶总黄酮... 目的研究山楂叶总黄酮对犬心肌梗死的保护作用。方法采用麻醉犬冠脉结扎导致心肌梗死的方法造模,观察给药前后的影响。结果山楂叶总黄酮冻干粉高、中剂量组能降低冠脉结扎所致心肌梗死麻醉犬的SAP、DAP、MAP。结论不同剂量山楂叶总黄酮冻干粉可明显缓解心肌缺血症状。 展开更多

关键词 山楂叶总黄酮 麻醉犬 心肌缺血

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基于NF-κB/NLRP3信号轴探讨大血藤对CIA大鼠的治疗作用及机制 被引量：13

7

作者 俞云 于辉 +5 位作者 冯旌 沈飞 喻斌 陈庆 时乐 卞勇 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期396-399,共4页

目的考察大血藤对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠的症状改善作用和机制。方法建立大鼠CIA模型,持续观察大鼠体质量、关节肿胀度、关节炎指数,ELISA检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18水平;Western blot法检测大鼠关节滑膜RANKL、p-IκB-α... 目的考察大血藤对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠的症状改善作用和机制。方法建立大鼠CIA模型,持续观察大鼠体质量、关节肿胀度、关节炎指数,ELISA检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18水平;Western blot法检测大鼠关节滑膜RANKL、p-IκB-α、NF-κB/p65、p-NF-κB/p65、NLRP3、Caspase-1表达。结果模型组大鼠自第2周出现体质量增长的趋势明显减缓(P<0.01),而关节炎指数和关节肿胀度均显著增加(P<0.05),大鼠关节有红肿进而不能负重状态,而大血藤能显著改善CIA大鼠相关症状,表现为降低足肿胀、关节炎指数评分以及改善体质量数据。与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18水平以及关节滑膜RANKL、p-IκB-α、NF-κB/p65、p-NF-κB/p65、NLRP3、Caspase-1表达显著升高(P<0.01),而大血藤中、高剂量组上述指标较模型组显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论大血藤能改善CIA大鼠的炎症反应,延缓病理进展,其机制可能与降低促炎因子的释放及抑制NF-κB/NLRP3信号通路有关。 展开更多

关键词 大血藤 NF-ΚB NLRP3 胶原诱导性关节炎

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温胃调肠颗粒对腹泻型肠易激综合征大鼠的作用机制研究 被引量：10

8

作者 杨梅 赵瑞亭 +1 位作者 许立 卞勇 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期362-366,共5页

目的探讨温胃调肠颗粒对腹泻型肠易激综合征大鼠的作用机制。方法 60只SD大鼠,随机分为对照组、模型组、阳性药组以及温胃调肠颗粒低、中、高剂量组。采用番泻叶灌胃,束缚和夹尾刺激14d,造成腹泻型肠易激综合征模型。给药14d后,取血、... 目的探讨温胃调肠颗粒对腹泻型肠易激综合征大鼠的作用机制。方法 60只SD大鼠,随机分为对照组、模型组、阳性药组以及温胃调肠颗粒低、中、高剂量组。采用番泻叶灌胃,束缚和夹尾刺激14d,造成腹泻型肠易激综合征模型。给药14d后,取血、空肠和结肠,MTL测试盒检测血清、空肠匀浆中胃动素含量;RT-PCR法检测结肠组织中降钙素基因相关肽（CGRP）及P物质（SP）的mRNA水平,Western blot检测CGRP和SP的蛋白表达水平;取胸腺、脾脏,称质量,计算脏器指数。结果模型组大鼠体质量增长缓慢,摄食量下降,胸腺、脾指数,血浆和空肠匀浆组织中MTL含量显著降低,结肠的CGRP、SP mRNA和蛋白表达水平显著升高,与对照组比较有显著性差异（P〈0.05~0.01）。温胃调肠颗粒高、中剂量可以显著升高胸腺、脾指数,血浆和空肠匀浆组织中MTL含量,降低结肠的CGRP、SP mRNA和蛋白表达水平,与模型组比较有显著性差异（P〈0.05~0.01）。结论温胃调肠颗粒可以通过调节机体MTL含量,CGRP、SP mRNA和蛋白表达水平来治疗腹泻型肠易激综合征。 展开更多

关键词 温胃调肠颗粒 腹泻型肠易激综合征 胃动素 降钙素基因相关肽 P物质

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栀子苷对Treg细胞分化和功能的影响及其机制研究

9

作者 卞勇 章雯 +3 位作者 时乐 喻斌 俞云 崔伟伟 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期676-681,共6页

目的考察栀子苷对初始T细胞(Naive T)向Treg定向分化的影响和机制。方法通过磁珠分选小鼠脾脏CD4^+CD62L^+T,诱导其向Treg分化,单独使用栀子苷以及与ERK通路阻断剂、JNK阻断剂合用,流式细胞术检测Treg细胞比例,Western blot法检测转录因... 目的考察栀子苷对初始T细胞(Naive T)向Treg定向分化的影响和机制。方法通过磁珠分选小鼠脾脏CD4^+CD62L^+T,诱导其向Treg分化,单独使用栀子苷以及与ERK通路阻断剂、JNK阻断剂合用,流式细胞术检测Treg细胞比例,Western blot法检测转录因子Foxp3、ERK、p-ERK、JNK、p-JNK等表达,ELISA法检测细胞上清IL-10含量。结果与Control组比较,栀子苷组Treg细胞比例,Foxp3、p-ERK、p-JNK表达,IL-10含量显著增高(P<0.05~0.01);单纯诱导的基础上先加入ERK通路阻断剂再加入栀子苷,其Treg细胞比例、Foxp3表达水平、IL-10含量显著低于栀子苷组(P<0.05~0.01),但高于Control组(P<0.01);单纯诱导的基础上先加入JNK阻断剂再加入栀子苷,其Treg细胞比例、Foxp3表达水平、IL-10含量显著低于栀子苷组(P<0.05~0.01),但高于Control组(P<0.01)。结论栀子苷可以显著促进Naive T向Treg定向分化,同时增强其功能,ERK、JNK可能和其发挥作用有一定关系。 展开更多

关键词 栀子苷 TREG ERK JNK

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雷公藤红素对胶原诱导性关节炎小鼠的免疫作用研究 被引量：10

10

作者 卢嘉微 陈都 +4 位作者 张淑芳 卞勇 刘丽 张剑 刘史佳 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期491-494,共4页

目的研究雷公藤红素对牛Ⅱ型胶原诱导的关节炎小鼠抗炎作用及其对T细胞的作用机制。方法选用DBA/1J小鼠,以牛Ⅱ型胶原诱导建立小鼠关节炎CIA模型。成模后,以雷公藤红素2mg/kg给药治疗并设置对照组,记录小鼠关节评分;二次免疫70d后摘眼... 目的研究雷公藤红素对牛Ⅱ型胶原诱导的关节炎小鼠抗炎作用及其对T细胞的作用机制。方法选用DBA/1J小鼠,以牛Ⅱ型胶原诱导建立小鼠关节炎CIA模型。成模后,以雷公藤红素2mg/kg给药治疗并设置对照组,记录小鼠关节评分;二次免疫70d后摘眼球取血处死小鼠,ELISA检测小鼠血浆中IL-17、IL-6、TGF-β水平,HE染色法观察小鼠关节病理变化,流式细胞术检测小鼠脾脏细胞中Th17和Treg比例。结果雷公藤红素组小鼠关节评分显著低于模型组(P<0.01);HE染色结果显示,雷公藤红素有效改善关节滑膜炎性浸润情况(P<0.05);ELISA检测小鼠血浆结果显示雷公藤红素使Th17相关细胞因子IL-6水平显著降低(P<0.01);流式检测结果显示,雷公藤红素可显著降低小鼠脾脏中Th17细胞亚群比例(P<0.01)并增加Treg细胞亚群比例(P<0.05)。结论雷公藤红素可以有效缓解CIA小鼠关节炎症症状,抑制关节滑膜炎性细胞浸润、血管翳生成和软骨破坏。雷公藤红素治疗CIA小鼠炎症反应可能是通过减少CIA小鼠体内IL-6等促炎症因子的分泌并伴随着抑炎因子参与的免疫平衡调节过程而实现。 展开更多

关键词 雷公藤红素 类风湿性关节炎 TH17 IL-17 IL-6 TREG TGF-Β

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当归补血汤主要吸收成分对GK大鼠肾保护作用研究 被引量：10

11

作者 薛梅 卞勇 +2 位作者 周俊杰 刘雅琳 黄熙 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期190-193,共4页

目的观察当归补血汤主要吸收成分对2型糖尿病模型GK大鼠肾保护作用及可能机制。方法 UPLC-MS/MS定性定量吸收入血活性成分(ABCs),确定ABCs组成,定量1g母方中ABCs浓度。GK大鼠按血糖随机分为模型组、当归补血汤组及吸收成分(ABCs)组,每... 目的观察当归补血汤主要吸收成分对2型糖尿病模型GK大鼠肾保护作用及可能机制。方法 UPLC-MS/MS定性定量吸收入血活性成分(ABCs),确定ABCs组成,定量1g母方中ABCs浓度。GK大鼠按血糖随机分为模型组、当归补血汤组及吸收成分(ABCs)组,每组10只,给药组分别灌胃当归补血汤(4g/kg)、吸收入血的生物活性成分(剂量相当于母方含量,即咖啡酸5.36mg/kg,芒柄花素2.68mg/kg,毛蕊异黄酮2.56mg/kg,阿魏酸1.36mg/kg,黄芪甲苷0.45mg/kg,丁苯酞0.16mg/kg,蒿本内酯0.16mg/kg),10只普通Wistar大鼠作为空白对照,给予等量生理盐水,每日1次,连续给药28d。观察指标:(1)肾脏系数、尿总蛋白和尿白蛋白;(2)肾组织氧化应激;(3)病理切片观察肾脏组织形态。结果当归补血汤及ABCs均能够改善糖尿病大鼠的肾脏肥大,显著降低糖尿病模型大鼠尿总蛋白、尿白蛋白和肾脏MDA水平(P<0.05),显著升高肾脏总SOD活力(P<0.05),且对肾脏组织病理形态学有保护作用;与当归补血汤组比较,ABCs作用不如汤剂显著。结论 ABCs能够代表母方当归补血汤发挥对GK大鼠的肾保护作用,机制涉及氧化应激。母方中除ABCs外,其微量元素、氨基酸、多糖等其他成分也同时发挥着药效作用。 展开更多

关键词 当归补血汤 吸收入血生物活性成分 GK大鼠 氧化应激

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黄芪-莪术-重楼配伍降低血管内皮通透性抑制结肠癌转移作用的研究 被引量：9

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作者 刘甜甜 卞勇 +4 位作者 关汉卿 梁研 郭文晖 余倩慧 唐德才 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期115-121,共7页

目的观察黄芪-莪术-重楼配伍对人脐静脉内皮细胞株(HUVEC)通透性与细胞紧密连接的影响及其抑制人结肠癌细胞系(HCT116)血行转移的作用机制。方法制备空白对照血清和黄芪-莪术-重楼配伍含药血清。构建HUVEC-HCT116共培养体系,实验分为共... 目的观察黄芪-莪术-重楼配伍对人脐静脉内皮细胞株(HUVEC)通透性与细胞紧密连接的影响及其抑制人结肠癌细胞系(HCT116)血行转移的作用机制。方法制备空白对照血清和黄芪-莪术-重楼配伍含药血清。构建HUVEC-HCT116共培养体系,实验分为共培养模型组,黄芪-莪术-重楼配伍低、中、高剂量(2.1、4.2、8.4 g·kg^(-1))组。另设HUVEC单培养对照组。CCK-8法检测细胞增殖;FITC-dextran法、Transwell法检测HUVEC通透性与HCT116跨内皮迁移数量;免疫荧光法检测ZO-1蛋白的分布;Western blot法检测RhoA、ROCK及ZO-1蛋白表达量。结果黄芪-莪术-重楼配伍不同剂量含药血清处理48 h后,HUVEC增殖均显著减少(P<0.01)。与单培养对照组相比,共培养模型组FITC-dextran渗透量、跨越内皮迁移的HCT116细胞数量明显增加(P<0.01),ZO-1蛋白表达下调(P<0.01),RhoA、ROCK蛋白表达上调(P<0.01);与共培养模型组相比,黄芪-莪术-重楼配伍各剂量组FITC-Dextran渗透量、跨越内皮迁移的HCT116细胞数量均减少(P<0.05),ZO-1蛋白表达上调(P<0.05),RhoA、ROCK蛋白表达下调(P<0.05),且呈现剂量依赖性。结论黄芪-莪术-重楼配伍可能通过抑制RhoA/ROCK通路调控HUVEC紧密连接相关蛋白ZO-1的表达,降低血管内皮通透性,进而抑制结肠癌血行转移。 展开更多

关键词 黄芪-莪术-重楼配伍 结肠癌 血管通透 共培养 紧密连接

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调脂消斑合剂抗动脉粥样硬化作用机制研究

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作者 刘孟 章丹宁 +8 位作者 曾峻楠 卢磊 梁田 徐颖 陈彤 赵欣 张寒梅 卞勇 王忠良 《南京中医药大学学报》 2025年第9期1178-1188,共11页

目的探究调脂消斑合剂对高脂饮食诱导的大鼠动脉粥样硬化模型的干预作用,并初步评估长链非编码RNA(LincRNA)在该过程中表达水平的变化。方法采用高脂饮食诱导SD大鼠建立动脉粥样硬化模型。于造模后4周取动脉粥样硬化大鼠胸主动脉组织进... 目的探究调脂消斑合剂对高脂饮食诱导的大鼠动脉粥样硬化模型的干预作用,并初步评估长链非编码RNA(LincRNA)在该过程中表达水平的变化。方法采用高脂饮食诱导SD大鼠建立动脉粥样硬化模型。于造模后4周取动脉粥样硬化大鼠胸主动脉组织进行苏木精-伊红(HE)染色,系统评估不同剂量调脂消斑合剂的抗动脉粥样硬化效应。使用生化试剂盒检测血脂水平及肝肾功能相关指标,评估调脂消斑合剂对上述参数的影响;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测调脂消斑合剂干预后的血清炎症标志物;通过TUNEL染色法和Western blot法检测调脂消斑合剂对胸主动脉组织的促凋亡效应;使用qPCR技术检测Linc-HC、MALAT1等RNA分子的表达水平。结果经高剂量调脂消斑合剂干预后,动脉粥样硬化模型大鼠的血脂谱显示总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著降低(P<0.05,P<0.01),而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)表达呈现升高趋势。在肝肾功能指标方面,天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血尿素氮(BUN)及肌酐(Cr)等血清标志物水平均显著下调(P<0.05,P<0.01)。促炎因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平降低(P<0.01),而抗炎因子白细胞介素-10(IL-10)水平升高(P<0.01)。胸主动脉组织中凋亡相关因子NLRP3、ASC、Cleaved Caspase-1、Cleaved IL-1β、Puma、Bax、Noxa和MDM2的表达水平显著下调(P<0.05,P<0.01)。经调脂消斑合剂干预后,Linc-HC的mRNA水平显著降低(P<0.01),而MALAT1的mRNA表达显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论调脂消斑合剂可能通过抑制Linc-HC的表达,同时上调MALAT1的表达,从而减少动脉粥样硬化斑块的形成,改善血脂异常及肝肾功能,缓解炎症反应并抑制细胞凋亡。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 调脂消斑合剂 血脂 炎症 细胞凋亡 长链非编码RNA

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