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问号赖型钩端螺旋体23kDa蛋白的免疫原性研究
1
作者 刘洪斌 戴保民 +2 位作者 章涛 李胜富 方之茂 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期54-55,12,共3页
目的　探讨 p DL12 1的 1.0 kb0 17株问号赖型钩端螺旋体 DNA片段可否作为钩体重组疫苗广谱保护性抗原的候选。方法　采用 SDS- PAGE制备 2 3k Da蛋白 ,免疫日本大耳兔制备抗 2 3k Da抗血清 ,Western blot鉴定其免疫原性。结果　2 3k D... 目的　探讨 p DL12 1的 1.0 kb0 17株问号赖型钩端螺旋体 DNA片段可否作为钩体重组疫苗广谱保护性抗原的候选。方法　采用 SDS- PAGE制备 2 3k Da蛋白 ,免疫日本大耳兔制备抗 2 3k Da抗血清 ,Western blot鉴定其免疫原性。结果　2 3k Da重组抗原兔抗血清可识别 p DL12 1体外表达 2 3k Da抗原产物和问号赖型钩端螺旋体 0 17株超声抗原成份 ;用 Westemblot鉴定抗血清效价 ,其抗体滴度为 1/ 12 80 0 ;用 p DL12 1重组质粒主动免疫豚鼠 ,可使豚鼠抵抗强毒力株钩端螺旋体攻击 ,表现出免疫保护作用。结论　该重组 2 3k Da抗原有良好的免疫原性 ,可能是赖型钩体 0 17株的保护性抗原。 展开更多
关键词 问号赖型钩端螺旋体 免疫印迹 抗原 DNA
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问号赖型钩端螺旋体重组质粒pDL121及其表达产物的初步研究
2
作者 刘洪斌 戴保民 +2 位作者 章涛 李胜富 方之茂 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第12期1282-1285,共4页
目的 :探讨问号赖型钩端螺旋体重组质粒pDL12 1外源基因及其表达产物 2 3kDa蛋白的特点。方法 :用 6种内切酶对pDL12 1行酶谱分析 ,用Digoxin标记的pDL12 1外源基因片段作探针对不同种属的钩体进行杂交 ,用SDS -PAGE制备 2 3kDa蛋白 ,We... 目的 :探讨问号赖型钩端螺旋体重组质粒pDL12 1外源基因及其表达产物 2 3kDa蛋白的特点。方法 :用 6种内切酶对pDL12 1行酶谱分析 ,用Digoxin标记的pDL12 1外源基因片段作探针对不同种属的钩体进行杂交 ,用SDS -PAGE制备 2 3kDa蛋白 ,Westernblot鉴定其免疫原性。结果 :pDL12 1外源基因没有 6种内切酶的酶切位点 ,重组探针与致病性钩体 (serovarlaistrain 0 17,serovarhebdomadisstrain 5 6 6 10 ,serovarpomonastrain 5 6 6 0 8)有杂交信号 ,与非致病性钩体 (serovarpatocstrainPatocI,serovarillinistrain 30 5 5 )无杂交信号 ,亦不识别大肠杆菌。2 3kDa兔抗血清可识别pDL12 1体外表达的 2 3kDa蛋白带和赖型钩体 0 17株超声抗原成份 ;其抗体滴度为 1/12 80 0 ;用pDL12 1细菌裂解液主动免疫豚鼠 ,可使豚鼠抵抗强毒力株钩体攻击。结论 :pDL12 1外源基因可能是赖型钩体的一个新基因 ;该重组探针能鉴别致病性钩体和非致病性钩体 ;2 3kDa抗原有良好的免疫原性 ,可能是赖型钩体 0 展开更多
关键词 问号赖型 钩端螺旋体属 重组质粒 pDL121外源基
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重组钩体基因疫苗免疫豚鼠脾细胞LTT,IL-2,IL-6的活性测定 被引量：3
3
作者 江南 戴保民 李胜富 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第6期17-18,111,共3页
目的　为从多方面证实赖型钩体重组基因疫苗的免疫活性。方法　将赖型钩体重组基因多肽疫苗 (分子量6 8k Da)多点皮下注射免疫豚鼠。(以质粒载体 p T7- 7为阴性对照 ,全钩死疫苗 WCV为阳性对照 )取其脾细胞 ,用 3H- Td R法和MTT比色法... 目的　为从多方面证实赖型钩体重组基因疫苗的免疫活性。方法　将赖型钩体重组基因多肽疫苗 (分子量6 8k Da)多点皮下注射免疫豚鼠。(以质粒载体 p T7- 7为阴性对照 ,全钩死疫苗 WCV为阳性对照 )取其脾细胞 ,用 3H- Td R法和MTT比色法分别测定特异性淋巴细胞转化试验 (L TT)的相对转化指数 (RPI)及 IL - 2 ,IL - 6活性。结果　 1)重组基因疫苗免疫组特异性 L TT的 RPI为 2 .19± 0 .18明显高于 p T7- 7阴性对照 1.42± 0 .2 7(P<0 .0 0 5 ) ,与阳性对照 WCV无统计学差异 (P>0 .0 5 )。2 )基因疫苗免疫组 IL - 2 ,IL - 6活性分别为 34.8± 3.11,94.6± 6 .0 2测定值明显高于 p T7- 7阴性对照 2 0 .4± 3.0 5 ,6 1±6 .2 8(P<0 .0 0 5 ) ,与 WCV阳性对照无统计学差异 (P>0 .0 5 )。结论　 1)钩体基因重组疫苗能使免疫豚鼠体内 Th1 、Th2 活化增强 ,有胸腺依赖性抗原性质 (TDAg) ,可激起体内强有力 T- B细胞协同效应的特异性体液免疫反应 ,确有增强免疫活性作用 ,是良好的免疫原。2 )重组钩体基因疫苗与阳性对照 WCV各实验值无统计学差异 ,提示二者免疫活动可能相当 ,但重组基因疫苗有毒副作用小的优势 。 展开更多
关键词 重组钩体基因疫苗 免疫活性 LTT IL-2 IL-6 豚鼠
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