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环介导恒温扩增法检测肉制品中致病微生物
被引量：
3
1
作者
陈洵
冯雪梅
+4 位作者
杜正平
谭慧媚
田文武
廖秀志
曹以诚
《肉类研究》
2011年第11期29-33,共5页
目的:建立一种食品中微生物核酸快速检测技术,在此基础上开发的简便、快速、灵敏,不依赖仪器适合基层应用的核酸快速检测试剂盒;并探索该试剂盒在肉及肉制品微生物检测中的应用。方法:根据单核细胞增生李斯特氏菌特有的靶序列vir R基因...
目的:建立一种食品中微生物核酸快速检测技术,在此基础上开发的简便、快速、灵敏,不依赖仪器适合基层应用的核酸快速检测试剂盒;并探索该试剂盒在肉及肉制品微生物检测中的应用。方法:根据单核细胞增生李斯特氏菌特有的靶序列vir R基因设计引物,采用环介导恒温扩增技术构建检测体系,优化、验证检测的特异度、检出限等指标,并与传统分离培养法比较。结果:本研究中的检测方法及试剂盒能专一的检出肉制品中的单增李斯特菌,对其他近源菌株检测呈阴性结果,检出限达1.81×103CFU/mL,与传统方法具有相同的灵敏度;检测操作简便快速,极少的设备依赖,适合规模推广。
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关键词
恒温核酸扩增
环介导恒温扩增(LAMP)
肉制品
微生物
食品安全
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职称材料
环介导等温扩增技术检测肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌
被引量：
22
2
作者
刘毅
黄曙海
+4 位作者
谭慧媚
戴广明
蓝兰
姚贻强
陈洵
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期24-26,共3页
目的建立环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测肺结核患者痰标本和分枝杆菌阳性培养物中的结核分枝杆菌(MTB)。方法选择临床可疑肺结核患者痰标本121份、MTB阳性分离物14份,非结核分枝杆菌(NTM)阳性分...
目的建立环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测肺结核患者痰标本和分枝杆菌阳性培养物中的结核分枝杆菌(MTB)。方法选择临床可疑肺结核患者痰标本121份、MTB阳性分离物14份,非结核分枝杆菌(NTM)阳性分离物14种共31株,用涂片抗酸染色镜检、罗氏固体培养基培养、LAMP技术分别进行检测,用LAMP技术对人MTB标准菌株H37Rv及卡介苗(BCG)进行检测,判断LAMP检出限并评价敏感性和特异性。结果涂片法抗酸杆菌检出率为38.02%(46/121),培养法MTB检出率为42.15%(51/121),LAMP法MTB检出率为49.28%(56/121),差异无统计学意义(χ2分别为3.146和1.247,P均>0.05)。对121例可疑肺结核患者痰标本进行MTB检测,以罗氏固体培养基培养结果为金标准,LAMP检测结果的敏感性为92.16%(47/51),特异性为87.14%(61/70),二者无显著性差异(χ2=1.247,P>0.05),且一致性强(kappa=0.78,P<0.01)。LAMP能准确分辨MTB和NTM阳性分离物,对H37Rv、BCG检测结果均为阳性;对H37Rv菌株的检出限为120 CFU/mL。结论 LAMP检测MTB敏感性和特异性高,操作简便易行、快速准确,不需要昂贵的检验设备,适于基层医院结核病诊断的推广和应用。
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关键词
结核分枝杆菌
非结核分枝杆菌
痰标本
环介导等温扩增技术
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职称材料
改良LAMP法检测转基因作物
被引量：
5
3
作者
熊槐
吴凡
+5 位作者
冯雪梅
黄昱阳
杜正平
周毅
田文武
曹以诚
《食品安全质量检测学报》
CAS
2012年第3期177-181,共5页
目的建立简易的可视化环介导等温扩增(LAMP)检测转基因作物的方法。方法通过一对特异的能识别一段正义链和一段反义链的内引物和一对链置换引物,在Bst DNA聚合酶作用下,以等温条件实现对外源转基因成分的扩增,反应液和高浓度的显色液SYB...
目的建立简易的可视化环介导等温扩增(LAMP)检测转基因作物的方法。方法通过一对特异的能识别一段正义链和一段反义链的内引物和一对链置换引物,在Bst DNA聚合酶作用下,以等温条件实现对外源转基因成分的扩增,反应液和高浓度的显色液SYBR GREENⅠ同时置于特殊设计的反应管中,反应后可实现闭管可视化检测。结果对转基因作物中常见的外源基因元件胭脂碱合成酶终止子(T-NOS)和烟草花叶病毒35S启动子(P-CaMV35S)进行了LAMP检测。T-NOS LAMP对大米品系BT63,玉米品系BT11,MON810,大豆品系GTS40-3-2的检测结果呈阳性,P-CaMV35S LAMP对大米品系BT63,玉米品系BT11,MON810,MON863,大豆品系GTS40-3-2的检测结果呈阳性,二者对非转基因大米,玉米,大豆的检测结果均呈阴性。上述结果表明,本文中建立的T-NOS和P-CaMV35S LAMP检测方法特异性高。另外,通过对大豆品系GTS40-3-2模拟样品的检测,证明T-NOS LAMP能检出转基因成分含量为0.5%的样品,P-CaMV35S LAMP能检出转基因成分含量为0.1%的样品,检测灵敏度较高。结论改良LAMP法灵敏度高,特异性好,能用于快速初筛转基因作物。
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关键词
LAMP
转基因作物
BST
DNA聚合酶
CaMV35S启动子
NOS终止子
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职称材料
题名
环介导恒温扩增法检测肉制品中致病微生物
被引量：
3
1
作者
陈洵
冯雪梅
杜正平
谭慧媚
田文武
廖秀志
曹以诚
机构
广州
华峰生物科技有限公司
出处
《肉类研究》
2011年第11期29-33,共5页
文摘
目的:建立一种食品中微生物核酸快速检测技术,在此基础上开发的简便、快速、灵敏,不依赖仪器适合基层应用的核酸快速检测试剂盒;并探索该试剂盒在肉及肉制品微生物检测中的应用。方法:根据单核细胞增生李斯特氏菌特有的靶序列vir R基因设计引物,采用环介导恒温扩增技术构建检测体系,优化、验证检测的特异度、检出限等指标,并与传统分离培养法比较。结果:本研究中的检测方法及试剂盒能专一的检出肉制品中的单增李斯特菌,对其他近源菌株检测呈阴性结果,检出限达1.81×103CFU/mL,与传统方法具有相同的灵敏度;检测操作简便快速,极少的设备依赖,适合规模推广。
关键词
恒温核酸扩增
环介导恒温扩增(LAMP)
肉制品
微生物
食品安全
Keywords
loop-mediated isothermal amplification （LAMP）
meat product
microbiological
food safety
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
环介导等温扩增技术检测肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌
被引量：
22
2
作者
刘毅
黄曙海
谭慧媚
戴广明
蓝兰
姚贻强
陈洵
机构
北海市结核病防治院
广西疾病预防控制中心结核病防治所
华峰生物科技有限公司
北京市结核病胸部肿瘤研究所
出处
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期24-26,共3页
基金
广西自然科学基金项目(桂科自0991193)
文摘
目的建立环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测肺结核患者痰标本和分枝杆菌阳性培养物中的结核分枝杆菌(MTB)。方法选择临床可疑肺结核患者痰标本121份、MTB阳性分离物14份,非结核分枝杆菌(NTM)阳性分离物14种共31株,用涂片抗酸染色镜检、罗氏固体培养基培养、LAMP技术分别进行检测,用LAMP技术对人MTB标准菌株H37Rv及卡介苗(BCG)进行检测,判断LAMP检出限并评价敏感性和特异性。结果涂片法抗酸杆菌检出率为38.02%(46/121),培养法MTB检出率为42.15%(51/121),LAMP法MTB检出率为49.28%(56/121),差异无统计学意义(χ2分别为3.146和1.247,P均>0.05)。对121例可疑肺结核患者痰标本进行MTB检测,以罗氏固体培养基培养结果为金标准,LAMP检测结果的敏感性为92.16%(47/51),特异性为87.14%(61/70),二者无显著性差异(χ2=1.247,P>0.05),且一致性强(kappa=0.78,P<0.01)。LAMP能准确分辨MTB和NTM阳性分离物,对H37Rv、BCG检测结果均为阳性;对H37Rv菌株的检出限为120 CFU/mL。结论 LAMP检测MTB敏感性和特异性高,操作简便易行、快速准确,不需要昂贵的检验设备,适于基层医院结核病诊断的推广和应用。
关键词
结核分枝杆菌
非结核分枝杆菌
痰标本
环介导等温扩增技术
分类号
R378.91 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
改良LAMP法检测转基因作物
被引量：
5
3
作者
熊槐
吴凡
冯雪梅
黄昱阳
杜正平
周毅
田文武
曹以诚
机构
广州
华峰生物科技有限公司
华南理工大学
生物科
学与工程学院
出处
《食品安全质量检测学报》
CAS
2012年第3期177-181,共5页
文摘
目的建立简易的可视化环介导等温扩增(LAMP)检测转基因作物的方法。方法通过一对特异的能识别一段正义链和一段反义链的内引物和一对链置换引物,在Bst DNA聚合酶作用下,以等温条件实现对外源转基因成分的扩增,反应液和高浓度的显色液SYBR GREENⅠ同时置于特殊设计的反应管中,反应后可实现闭管可视化检测。结果对转基因作物中常见的外源基因元件胭脂碱合成酶终止子(T-NOS)和烟草花叶病毒35S启动子(P-CaMV35S)进行了LAMP检测。T-NOS LAMP对大米品系BT63,玉米品系BT11,MON810,大豆品系GTS40-3-2的检测结果呈阳性,P-CaMV35S LAMP对大米品系BT63,玉米品系BT11,MON810,MON863,大豆品系GTS40-3-2的检测结果呈阳性,二者对非转基因大米,玉米,大豆的检测结果均呈阴性。上述结果表明,本文中建立的T-NOS和P-CaMV35S LAMP检测方法特异性高。另外,通过对大豆品系GTS40-3-2模拟样品的检测,证明T-NOS LAMP能检出转基因成分含量为0.5%的样品,P-CaMV35S LAMP能检出转基因成分含量为0.1%的样品,检测灵敏度较高。结论改良LAMP法灵敏度高,特异性好,能用于快速初筛转基因作物。
关键词
LAMP
转基因作物
BST
DNA聚合酶
CaMV35S启动子
NOS终止子
Keywords
loop-mediated isothermal amplification
genetically modified crops
Bst DNA polymerase
CaMV35S promoter
NOS terminator
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
环介导恒温扩增法检测肉制品中致病微生物
陈洵
冯雪梅
杜正平
谭慧媚
田文武
廖秀志
曹以诚
《肉类研究》
2011
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
环介导等温扩增技术检测肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌
刘毅
黄曙海
谭慧媚
戴广明
蓝兰
姚贻强
陈洵
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
22
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
改良LAMP法检测转基因作物
熊槐
吴凡
冯雪梅
黄昱阳
杜正平
周毅
田文武
曹以诚
《食品安全质量检测学报》
CAS
2012
5
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