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皮质酮预处理对LPS激活小胶质细胞的调节作用及鸡豆黄素A的抑制作用
1
作者
牛耕辰
王俊
+1 位作者
张悦
尹艳艳
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025年第9期1712-1718,1729,共8页
目的探讨皮质酮(CORT)预处理对脂多糖(LPS)激活小胶质细胞的调节作用及鸡豆黄素A(Bio A)对小胶质细胞活化的抑制作用。方法用MTT法筛选出LPS、CORT和Bio A对BV2细胞的最适浓度;将BV2细胞分为5组:Control组、CORT(50 nmol/L)组、LPS(1μg...
目的探讨皮质酮(CORT)预处理对脂多糖(LPS)激活小胶质细胞的调节作用及鸡豆黄素A(Bio A)对小胶质细胞活化的抑制作用。方法用MTT法筛选出LPS、CORT和Bio A对BV2细胞的最适浓度;将BV2细胞分为5组:Control组、CORT(50 nmol/L)组、LPS(1μg/mL)组、LPS(1μg/mL)+CORT(50 nmol/L)组、LPS(1μg/mL)+CORT(50 nmol/L)+Bio A(5μmol/L)组,除对照组外,各组先加入CORT(50 nmol/L)孵育2 h,然后各组加入相应浓度的LPS(1μg/mL)和BioA(5μmol/L)共同孵育36 h;DCFH-DA探针法测定活性氧(ROS)含量;Western blot法测定炎性细胞因子、5-羟色胺转运体(5-HTT)、糖皮质激素受体(GR)、盐皮质激素受体(MR)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白1(Caspase-1)的蛋白表达水平。结果与CORT(50 nmol/L)组和LPS(1μg/mL)组比较,CORT(50 nmol/L)+LPS(1μg/mL)组的BV2细胞的活力增加,ROS的含量更高,炎性细胞因子、NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白表达水平增加(P<0.05);与CORT(50 nmol/L)+LPS(1μg/mL)组比较,CORT(50 nmol/L)+LPS(1μg/mL)+Bio A(5μmol/L)组的细胞活力降低,ROS的含量下降,炎性细胞因子、NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白表达减少(P<0.05)。结论小剂量的CORT预处理可以促进LPS激活BV2细胞;Bio A抑制经CORT预处理后LPS诱导的BV2细胞活化,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体的激活有关。
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关键词
皮质酮
脂多糖
小胶质细胞
鸡豆黄素A
活性氧
NLRP3炎症小体
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职称材料
Apelin-17通过激活β1/2-arrestin-ERK1/2信号通路降低MPP+诱导内质网应激引起SH-SY5Y细胞的凋亡
被引量:
1
2
作者
姜云璐
王丹
+4 位作者
王春梅
刘苏莹
陈京
程葆华
黄根泉
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第9期1250-1265,共16页
内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)与帕金森病(Parkinson’s disease,PD)发展进程密切相关。Apelin是已被证实具有明显神经保护作用的内源性多肽,但其保护机制尚不清楚。该研究探讨Apelin-17降低1-甲基-4-苯基吡啶(MPP+)对S...
内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)与帕金森病(Parkinson’s disease,PD)发展进程密切相关。Apelin是已被证实具有明显神经保护作用的内源性多肽,但其保护机制尚不清楚。该研究探讨Apelin-17降低1-甲基-4-苯基吡啶(MPP+)对SH-SY5Y细胞凋亡的分子机制。实时无标记动态细胞分析(real time cell analysis,RTCA)实验数据表明,0.1μmol/L Apelin-17预处理2 h,MPP+诱导的SH-SY5Y细胞(Apelin-17预处理组)指数明显高于MPP+处理组(P<0.05),PD98059与β1/2-arrestin siRNA实验组的细胞指数显著低于Apelin-17预处理组(P<0.05)。流式细胞仪结果显示,Apelin-17预处理组细胞凋亡率低于MPP+处理组(P<0.05),而PD98059与β1/2-arrestin siRNA实验组的细胞凋亡率高于Apelin-17预处理组(P<0.05)。CCK-8试剂盒检测结果显示,Apelin-17预处理组的细胞活力相对于MPP+处理组明显升高(P<0.05),与Apelin-17预处理组比较,PD98059与β1/2-arrestin siRNA实验组的细胞活力显著降低(P<0.05)。LDH检测数据表明,与MPP+处理组比较,Apelin-17预处理组的乳酸脱氢酶释放量显著降低(P<0.05),而PD98059与β1/2-arrestin siRNA实验组乳酸脱氢酶释放量显著高于Apelin-17预处理组(P<0.05)。Western印迹结果证明,与MPP+处理比较,Apelin-17预处理组显著降低了内质网应激反应中PERK独立介导的信号通路中p-eIF2α、ATF4、CHOP的表达水平(P<0.05),与凋亡密切相关的切割胱天蛋白酶12(cleaved-caspase-12)蛋白表达也显著下调,而抑制细胞凋亡相关的Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。同时,与促进细胞增殖密切相关蛋白Phospho-pERK1/2的表达水平显著升高(P<0.05)。ERK1/2信号通路抑制剂PD98059加入Apelin-17预处理后会反转上述实验现象,同时加入β1/2-arrestin siRNA后,Phospho-pERK1/2与Bcl-2蛋白表达水平相较于Apelin-17预处理组显著降低(P<0.05),而CHOP的表达水平升高(P<0.05)。综上所述,本文的研究结果表明,Apelin-17通过β1/2-arrestin信号通路上调Phospho-pERK1/2与Bcl-2蛋白质表达水平,同时抑制内质网应激中p-eIF2α、ATF4和CHOP蛋白质表达,进而降低MPP+对SH-SY5Y细胞的毒性。
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关键词
Apelin-17
帕金森病
内质网应激
神经保护
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职称材料
题名
皮质酮预处理对LPS激活小胶质细胞的调节作用及鸡豆黄素A的抑制作用
1
作者
牛耕辰
王俊
张悦
尹艳艳
机构
安徽医科
大学
药学科学
学院
药理学教研室
华威大学医学院
出处
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025年第9期1712-1718,1729,共8页
基金
安徽省转化医学研究院科研基金项目(编号:2021zhyx-C18)
安徽省自然科学基金项目(编号:1908085MH270)。
文摘
目的探讨皮质酮(CORT)预处理对脂多糖(LPS)激活小胶质细胞的调节作用及鸡豆黄素A(Bio A)对小胶质细胞活化的抑制作用。方法用MTT法筛选出LPS、CORT和Bio A对BV2细胞的最适浓度;将BV2细胞分为5组:Control组、CORT(50 nmol/L)组、LPS(1μg/mL)组、LPS(1μg/mL)+CORT(50 nmol/L)组、LPS(1μg/mL)+CORT(50 nmol/L)+Bio A(5μmol/L)组,除对照组外,各组先加入CORT(50 nmol/L)孵育2 h,然后各组加入相应浓度的LPS(1μg/mL)和BioA(5μmol/L)共同孵育36 h;DCFH-DA探针法测定活性氧(ROS)含量;Western blot法测定炎性细胞因子、5-羟色胺转运体(5-HTT)、糖皮质激素受体(GR)、盐皮质激素受体(MR)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白1(Caspase-1)的蛋白表达水平。结果与CORT(50 nmol/L)组和LPS(1μg/mL)组比较,CORT(50 nmol/L)+LPS(1μg/mL)组的BV2细胞的活力增加,ROS的含量更高,炎性细胞因子、NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白表达水平增加(P<0.05);与CORT(50 nmol/L)+LPS(1μg/mL)组比较,CORT(50 nmol/L)+LPS(1μg/mL)+Bio A(5μmol/L)组的细胞活力降低,ROS的含量下降,炎性细胞因子、NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白表达减少(P<0.05)。结论小剂量的CORT预处理可以促进LPS激活BV2细胞;Bio A抑制经CORT预处理后LPS诱导的BV2细胞活化,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体的激活有关。
关键词
皮质酮
脂多糖
小胶质细胞
鸡豆黄素A
活性氧
NLRP3炎症小体
Keywords
corticosterone
lipopolysaccharide
microglia
biochanin A
reactive oxygen species
NLRP3 inflammasome
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
R364.5 [医药卫生—病理学]
R977.6 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
Apelin-17通过激活β1/2-arrestin-ERK1/2信号通路降低MPP+诱导内质网应激引起SH-SY5Y细胞的凋亡
被引量:
1
2
作者
姜云璐
王丹
王春梅
刘苏莹
陈京
程葆华
黄根泉
机构
济宁
医学院
精神卫生
学院
神经生物学研究所
华威
大学
华威
医学院
生物
医学
系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第9期1250-1265,共16页
基金
国家自然科学基金(No.81671276,No.81870948)
山东省自然科学基金(No.ZR2018PC011)
山东省大学生创新训练计划项目(No.S202010443003,No.S201910443026)和济宁医学院大学生创新训练计划项目(No.CX202013,No.CX2019049)。
文摘
内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)与帕金森病(Parkinson’s disease,PD)发展进程密切相关。Apelin是已被证实具有明显神经保护作用的内源性多肽,但其保护机制尚不清楚。该研究探讨Apelin-17降低1-甲基-4-苯基吡啶(MPP+)对SH-SY5Y细胞凋亡的分子机制。实时无标记动态细胞分析(real time cell analysis,RTCA)实验数据表明,0.1μmol/L Apelin-17预处理2 h,MPP+诱导的SH-SY5Y细胞(Apelin-17预处理组)指数明显高于MPP+处理组(P<0.05),PD98059与β1/2-arrestin siRNA实验组的细胞指数显著低于Apelin-17预处理组(P<0.05)。流式细胞仪结果显示,Apelin-17预处理组细胞凋亡率低于MPP+处理组(P<0.05),而PD98059与β1/2-arrestin siRNA实验组的细胞凋亡率高于Apelin-17预处理组(P<0.05)。CCK-8试剂盒检测结果显示,Apelin-17预处理组的细胞活力相对于MPP+处理组明显升高(P<0.05),与Apelin-17预处理组比较,PD98059与β1/2-arrestin siRNA实验组的细胞活力显著降低(P<0.05)。LDH检测数据表明,与MPP+处理组比较,Apelin-17预处理组的乳酸脱氢酶释放量显著降低(P<0.05),而PD98059与β1/2-arrestin siRNA实验组乳酸脱氢酶释放量显著高于Apelin-17预处理组(P<0.05)。Western印迹结果证明,与MPP+处理比较,Apelin-17预处理组显著降低了内质网应激反应中PERK独立介导的信号通路中p-eIF2α、ATF4、CHOP的表达水平(P<0.05),与凋亡密切相关的切割胱天蛋白酶12(cleaved-caspase-12)蛋白表达也显著下调,而抑制细胞凋亡相关的Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。同时,与促进细胞增殖密切相关蛋白Phospho-pERK1/2的表达水平显著升高(P<0.05)。ERK1/2信号通路抑制剂PD98059加入Apelin-17预处理后会反转上述实验现象,同时加入β1/2-arrestin siRNA后,Phospho-pERK1/2与Bcl-2蛋白表达水平相较于Apelin-17预处理组显著降低(P<0.05),而CHOP的表达水平升高(P<0.05)。综上所述,本文的研究结果表明,Apelin-17通过β1/2-arrestin信号通路上调Phospho-pERK1/2与Bcl-2蛋白质表达水平,同时抑制内质网应激中p-eIF2α、ATF4和CHOP蛋白质表达,进而降低MPP+对SH-SY5Y细胞的毒性。
关键词
Apelin-17
帕金森病
内质网应激
神经保护
Keywords
Apelin-17
Parkinson’s disease
endoplasmic reticulum stress
neuroprotection
分类号
Q291 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
皮质酮预处理对LPS激活小胶质细胞的调节作用及鸡豆黄素A的抑制作用
牛耕辰
王俊
张悦
尹艳艳
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
Apelin-17通过激活β1/2-arrestin-ERK1/2信号通路降低MPP+诱导内质网应激引起SH-SY5Y细胞的凋亡
姜云璐
王丹
王春梅
刘苏莹
陈京
程葆华
黄根泉
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
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北大核心
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