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靶向人Trb3基因shRNA真核表达载体的构建及鉴定
1
作者
文浩杰
隋军
+7 位作者
孙传政
蒋玉娥
曾木圣
李满枝
张晶
李科
李晓江
王虎
《中国耳鼻咽喉头颈外科》
北大核心
2011年第2期60-62,共3页
目的构建并鉴定靶向果蝇同源蛋白3(tribbles-related protein 3,Trb3)基因的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体,并检测其对靶基因的沉默效应。方法根据Genbank数据库中Trb3序列,设计、合成3对互补并特异性编码其shRNA...
目的构建并鉴定靶向果蝇同源蛋白3(tribbles-related protein 3,Trb3)基因的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体,并检测其对靶基因的沉默效应。方法根据Genbank数据库中Trb3序列,设计、合成3对互补并特异性编码其shRNA序列的寡核苷酸,克隆到线性化的pSUPER.retro.puro质粒载体中,并对重组质粒进行酶切分析及测序鉴定;脂质体介导重组质粒和pSUPER.retro.puro Vector转染舌鳞状细胞癌Tca8113细胞株,RT-PCR和Western-Blot检测其对靶基因Trb3的表达影响。结果酶切及测序鉴定重组质粒pSUPER.puro-shTrb3序列正确;转染重组质粒后舌鳞状细胞癌Tca8113细胞中Trb3 mRNA和蛋白表达水平相对于空载体组明显下降,shRNA可以特异性沉默Trb3基因。结论成功构建了靶向人Trb3基因的shRNA真核表达载体,为进一步研究Trb3在舌鳞状细胞癌和其他头颈肿瘤中的作用奠定了基础。
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关键词
头颈部肿瘤
果蝇蛋白质类
RNA干扰
脂质体
真核表达载体
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题名
靶向人Trb3基因shRNA真核表达载体的构建及鉴定
1
作者
文浩杰
隋军
孙传政
蒋玉娥
曾木圣
李满枝
张晶
李科
李晓江
王虎
机构
昆明医
学
院第三附属医院头颈外科云南省头颈
肿瘤
研究
中心
华南肿瘤学国家重点实验室中山大学肿瘤防治中心实验研究部
出处
《中国耳鼻咽喉头颈外科》
北大核心
2011年第2期60-62,共3页
基金
国家自然科学基金(30960444)
云南省科技计划项目联合专项(2009CD186)
+1 种基金
云南省教育厅科研项目(08C0095)
华南肿瘤学国家重点实验室开放课题(303040966014)联合资助
文摘
目的构建并鉴定靶向果蝇同源蛋白3(tribbles-related protein 3,Trb3)基因的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体,并检测其对靶基因的沉默效应。方法根据Genbank数据库中Trb3序列,设计、合成3对互补并特异性编码其shRNA序列的寡核苷酸,克隆到线性化的pSUPER.retro.puro质粒载体中,并对重组质粒进行酶切分析及测序鉴定;脂质体介导重组质粒和pSUPER.retro.puro Vector转染舌鳞状细胞癌Tca8113细胞株,RT-PCR和Western-Blot检测其对靶基因Trb3的表达影响。结果酶切及测序鉴定重组质粒pSUPER.puro-shTrb3序列正确;转染重组质粒后舌鳞状细胞癌Tca8113细胞中Trb3 mRNA和蛋白表达水平相对于空载体组明显下降,shRNA可以特异性沉默Trb3基因。结论成功构建了靶向人Trb3基因的shRNA真核表达载体,为进一步研究Trb3在舌鳞状细胞癌和其他头颈肿瘤中的作用奠定了基础。
关键词
头颈部肿瘤
果蝇蛋白质类
RNA干扰
脂质体
真核表达载体
Keywords
Head and Neck Neoplasms
Drosophila Proteins
RNA Interference
Liposomes
eukaryotic expression vector
分类号
R739.91 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
靶向人Trb3基因shRNA真核表达载体的构建及鉴定
文浩杰
隋军
孙传政
蒋玉娥
曾木圣
李满枝
张晶
李科
李晓江
王虎
《中国耳鼻咽喉头颈外科》
北大核心
2011
0
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