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胚胎干细胞来源的拟血岛巨噬细胞对红细胞分化的促进作用被引量：1: 1; 作者李璇王晓玲 +12 位作者崔甜甜范增赵玲萍颜颢徐振钊何丽娟周军年王海洋张彪曾泉习佳飞岳文裴雪涛《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1180-1189,共10页; 目的探索胚胎干细胞体外向红细胞诱导分化过程中出现的拟血岛结构中巨噬细胞的表型,以及拟血岛巨噬细胞对红细胞分化的作用。方法利用单细胞聚团拟胚体(Spin-EB)方法诱导人胚胎干细胞向红细胞分化,流式细胞术和成像流式细胞术分析诱导... 展开更多; 关键词胚胎干细胞巨噬细胞体外诱导红细胞拟血岛; 在线阅读下载PDF 职称材料

生物制造领域的机遇与挑战:发展类器官构建及培养的新技术被引量：5: 2; 作者王思涵裴雪涛李艳华《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期312-319,共8页; 类器官构建及培养技术是近年来新兴的前沿性科学技术,该技术已经被广泛用到组织器官发育、疾病发病机制、药物开发和再生医学等领域的研究之中。干细胞及组织器官发育分化调控的研究成果为类器官构建及培养技术的建立提供了重要的信息... 展开更多; 关键词类器官三维微环境干细胞生物制造; 在线阅读下载PDF 职称材料

低剂量电离辐射对小鼠小肠类器官生物学特性的影响及二甲双胍对其辐射损伤的防护作用被引量：1: 3; 作者宋妃灵王思涵 +4 位作者林小松张博文何丽娟裴雪涛李艳华《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2021年第5期336-344,共9页; 目的研究低剂量电离辐射(LDIR)对小鼠小肠类器官生物学特性的影响,并观察二甲双胍对其辐射损伤的防护作用。方法体外分离C57BL/6小鼠小肠隐窝,培养4 d后获得小鼠小肠类器官,进行100 mGy单次γ射线照射(100 mGy×1)或100 mGy 4次γ... 展开更多; 关键词小肠类器官电离辐射 DNA损伤二甲双胍; 在线阅读下载PDF 职称材料

线粒体示踪体系的建立及验证: 4; 作者吕琳王思涵 +6 位作者曾泉段晗毛壮王唱垚裴雪涛王华李艳华《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第12期928-935,共8页; 目的通过构建稳定表达线粒体荧光报告系统的牙髓干细胞(DPSC)建立线粒体示踪体系,并采用该示踪体系研究间充质干细胞(MSC)向辐射损伤细胞输送线粒体。方法①构建质粒pSIN-EF1α-COX8A-DsRed2(简称COX8A-DsRed2),并进行基因测序和PCR鉴定... 展开更多; 关键词线粒体转移线粒体荧光探针间充质干细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名胚胎干细胞来源的拟血岛巨噬细胞对红细胞分化的促进作用被引量：1: 1; 作者李璇王晓玲崔甜甜范增赵玲萍颜颢徐振钊何丽娟周军年王海洋张彪曾泉习佳飞岳文裴雪涛; 机构军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所干细胞与再生医学实验室华南生物医药研究院华南干细胞与再生医学研究中心军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所血液与生化实验室; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1180-1189,共10页; 基金国家自然科学基金青年基金(82101969)。; 文摘目的探索胚胎干细胞体外向红细胞诱导分化过程中出现的拟血岛结构中巨噬细胞的表型,以及拟血岛巨噬细胞对红细胞分化的作用。方法利用单细胞聚团拟胚体(Spin-EB)方法诱导人胚胎干细胞向红细胞分化,流式细胞术和成像流式细胞术分析诱导体系中红系细胞和巨噬细胞特征标志物的表达及细胞形态,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测红系及巨噬细胞特征标记基因在转录水平的表达情况,利用免疫荧光染色鉴定拟血岛巨噬细胞的表型,并分析拟血岛巨噬细胞对红系细胞分化的作用。结果吉姆萨染色结果显示,胚胎干细胞体外诱导过程中出现了类似于体内红细胞发育中的血岛结构;免疫荧光染色显示,此拟血岛结构为红系细胞(CD235a)围绕在巨噬细胞(CD68)的周围。该拟血岛巨噬细胞表型为CD45+CD235a+CD163+CD169+CD106+(比例为0.092%±0.013%),与体内血岛巨噬细胞相似,流式细胞术结果亦表明CD45+CD235a+CD163+CD106+CD169+的血岛巨噬细胞被CD235a+红系细胞包围。去除拟血岛结构后诱导所得CD71+CD235a+细胞占比为37.37%±1.68%,明显低于未处理组(46.97%±4.16%,P<0.05)。免疫荧光染色结果显示,CD169+巨噬细胞周围的红系细胞表达CD43。结论胚胎干细胞体外红系诱导体系中可形成与体内血岛类似的拟血岛样结构,拟血岛巨噬细胞可能通过CD169与CD43的相互作用促进体外红细胞分化。; 关键词胚胎干细胞巨噬细胞体外诱导红细胞拟血岛; Keywords human embryonic stem cells macrophage in vitro differentiation erythrocytes erythroblastic island-like; 分类号 R34 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名生物制造领域的机遇与挑战:发展类器官构建及培养的新技术被引量：5: 2; 作者王思涵裴雪涛李艳华; 机构军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所华南生物医药研究院华南干细胞与再生医学研究中心; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期312-319,共8页; 基金国家重点研发计划(No.2017YFA0103100-03,04) 国家自然科学基金(No.82270132,81872553) 广州市基础研究计划基础与应用基础研究项目(No.202002030025)资助。; 文摘类器官构建及培养技术是近年来新兴的前沿性科学技术,该技术已经被广泛用到组织器官发育、疾病发病机制、药物开发和再生医学等领域的研究之中。干细胞及组织器官发育分化调控的研究成果为类器官构建及培养技术的建立提供了重要的信息。体外借助细胞外基质成分及细胞因子等构建出适宜于干细胞增殖、分化的三维微环境是类器官构建及培养技术的核心。在适宜的微环境中,干细胞及其分化的多种类型细胞可通过自组织形成与体内相应组织结构和功能相似的类器官。当前,多种类型的类器官构建及培养技术虽然得到广泛应用,但其技术体系仍具有操作的复杂性、产量的不确定性及获得的类器官结构和功能与体内组织存在较大差异性等难题。生物制造领域先进技术的引入推动了类器官技术的发展。本文将综述基质成分与细胞因子构建的三维微环境的研究进展,并讨论生物制造领域的先进技术在类器官构建与培养技术中的应用,例如微孔限定的培养技术可以控制类器官的生长发育,能用于制备大小均一及生物学特性相似的类器官;图案化技术使细胞按图案特征响应性地增殖与分化,可以精准控制类器官的生成;三维生物打印技术可以精确组装各类细胞,有助于构建具有复杂结构和区域特异性的类器官。类器官构建及培养技术是一个新兴的多学科交叉的创新技术,但是还应该看到其技术体系仍有待进一步改进及提升,以获得可准确展现体内相应组织器官结构和功能的类器官。; 关键词类器官三维微环境干细胞生物制造; Keywords organoid three-dimensional microenvironment stem cell biofabrication; 分类号 Q-3 [生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名低剂量电离辐射对小鼠小肠类器官生物学特性的影响及二甲双胍对其辐射损伤的防护作用被引量：1: 3; 作者宋妃灵王思涵林小松张博文何丽娟裴雪涛李艳华; 机构军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所华南生物医药研究院华南干细胞与再生医学研究中心河北大学化学与环境科学学院; 出处《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2021年第5期336-344,共9页; 基金国家重点研发计划(2017YFA0103100) 国家重点研发计划(2017YFA0103103) +1 种基金国家自然科学基金(81872553)。; 文摘目的研究低剂量电离辐射(LDIR)对小鼠小肠类器官生物学特性的影响,并观察二甲双胍对其辐射损伤的防护作用。方法体外分离C57BL/6小鼠小肠隐窝,培养4 d后获得小鼠小肠类器官,进行100 mGy单次γ射线照射(100 mGy×1)或100 mGy 4次γ射线照射(100 mGy×4),分别建立小肠类器官单次或多次LDIR模型,于末次照射后第3天,通过形态学分析检测小肠类器官的出芽数量和表面积。小肠类器官多次LDIR模型于末次照射后2 h,分离单个细胞,通过γ-H2AX免疫荧光染色分析小肠类器官细胞核内γ-H2AX焦点数。进行二甲双胍预处理多次LDIR模型(二甲双胍+100 mGy×4),即在每次照射前2 h向小肠类器官培养基中加二甲双胍1 mmol·L^(-1),末次照射后第3天或末次照射后2 h,分别检测小肠类器官的出芽数量和表面积及细胞核内γ-H2AX焦点数。结果成功建立了小鼠小肠类器官单次和多次LDIR模型。形态学分析结果显示,与对照组相比,单次LDIR模型组小肠类器官的出芽数量和表面积无明显差异;多次LDIR模型组小肠类器官的出芽数量和表面积明显减少(P<0.01)。免疫荧光染色结合共聚焦成像分析结果显示,与对照组相比,多次LDIR后模型组小肠类器官细胞核内γ-H2AX焦点数明显增多(P<0.01)。与多次LDIR模型组相比,二甲双胍+100 mGy×4组小肠类器官的出芽数量和表面积均明显增加(P<0.01),且细胞核内γ-H2AX焦点数明显减少(P<0.01)。结论单次LDIR对小肠类器官生长无明显影响。多次LDIR可延缓小鼠小肠类器官生长发育,造成肠上皮细胞DNA损伤。二甲双胍对小鼠小肠类器官多次LDIR损伤具有防护作用。; 关键词小肠类器官电离辐射 DNA损伤二甲双胍; Keywords intestinal organoids ionizing radiation DNA damage metformin; 分类号 R818.03 [医药卫生—放射医学] R979.6 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名线粒体示踪体系的建立及验证: 4; 作者吕琳王思涵曾泉段晗毛壮王唱垚裴雪涛王华李艳华; 机构军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所河北大学生命科学院华南生物医药研究院华南干细胞与再生医学研究中心; 出处《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第12期928-935,共8页; 基金国家自然科学基金(82270132) 国家自然科学基金(81872553) 国家自然科学基金(82200122)。; 文摘目的通过构建稳定表达线粒体荧光报告系统的牙髓干细胞(DPSC)建立线粒体示踪体系,并采用该示踪体系研究间充质干细胞(MSC)向辐射损伤细胞输送线粒体。方法①构建质粒pSIN-EF1α-COX8A-DsRed2(简称COX8A-DsRed2),并进行基因测序和PCR鉴定;COX8A-DsRed2用293T细胞包装获得慢病毒(Lv-COX8A-DsRed2)并感染DPSC,采用荧光显微镜观测红色荧光蛋白DsRed2在DPSC线粒体的稳定表达(DPSC-COX8A-DsRed2)。②在DPSC-COX8A-DsRed2中使用荧光染色法观察DsRed2荧光蛋白与线粒体膜受体线粒体外膜转位酶20(TOMM20)和线粒体示踪试剂MitoTracker Green的共定位。③采用10 Gy X射线照射大鼠小肠隐窝上皮细胞系IEC-6建立细胞辐射损伤模型,并使用5(6)-羧基二乙酸荧光素N-琥珀酰亚胺酯(CFSE)荧光染料标记IEC-6细胞;于照射后,立即加入DPSCCOX8A-DsRed2,继续培养24 h,荧光显微镜观察DPSC-COX8A-DsRed2能否向辐照受损细胞递送线粒体。结果①载体成功插入基因COX8A和DsRed2基因序列,COX8A-DsRed2构建成功;DPSC-COX8ADsRed2细胞内表达红色荧光DsRed2;②荧光染色法结果显示,红色荧光报告系统DPSC-COX8ADsRed2与线粒体膜受体TOMM20、线粒体示踪试剂MitoTracker Green共定位于细胞线粒体;③DPSCCOX8A-DsRed2与辐射损伤IEC-6细胞共培养,荧光显微镜可观测到绿色荧光的IEC-6细胞中出现DPSC来源的红色荧光标记的线粒体,表明DPSC与IEC-6之间发生了线粒体转移。结论构建的线粒体荧光探针能够准确指示线粒体的转移,为下一步研究间充质干细胞线粒体转移在辐射损伤救治中的作用提供了理想工具。; 关键词线粒体转移线粒体荧光探针间充质干细胞; Keywords mitochondrial transfer mitochondrial fluorescent reporting system mesenchymal stem cell; 分类号 R96 [医药卫生—药理学] R818.5 [医药卫生—放射医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	胚胎干细胞来源的拟血岛巨噬细胞对红细胞分化的促进作用	李璇王晓玲崔甜甜范增赵玲萍颜颢徐振钊何丽娟周军年王海洋张彪曾泉习佳飞岳文裴雪涛	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2022	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	生物制造领域的机遇与挑战:发展类器官构建及培养的新技术	王思涵裴雪涛李艳华	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2023	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	低剂量电离辐射对小鼠小肠类器官生物学特性的影响及二甲双胍对其辐射损伤的防护作用	宋妃灵王思涵林小松张博文何丽娟裴雪涛李艳华	《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心	2021	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	线粒体示踪体系的建立及验证	吕琳王思涵曾泉段晗毛壮王唱垚裴雪涛王华李艳华	《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料