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评价白蛋白相关药物动物模型的研究进展
1
作者
资崯
宁丽
+1 位作者
周小青
唐成程
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第10期1374-1380,共7页
许多肽或蛋白质药物治疗的一个主要挑战是血浆半衰期短。通过将该类药物与白蛋白结合获得的药物称为白蛋白相关药物,有效延长血浆半衰期。动物模型作为研究药物药代动力学的重要工具是药物研究中不可或缺的一部分。本综述概括了两大类...
许多肽或蛋白质药物治疗的一个主要挑战是血浆半衰期短。通过将该类药物与白蛋白结合获得的药物称为白蛋白相关药物,有效延长血浆半衰期。动物模型作为研究药物药代动力学的重要工具是药物研究中不可或缺的一部分。本综述概括了两大类动物模型:啮齿类(野生型小鼠、大鼠模型,基因修饰小鼠模型)与非啮齿(猴)在白蛋白相关药物药代动力学研究中的应用与发展,为其进一步研究发展提供参考。
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关键词
白蛋白相关药物
血浆半衰期
动物模型
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职称材料
Lesch-Nyhan综合征家兔模型的建立及其表型分析
2
作者
资崯
郑淑文
+6 位作者
宁丽
蔺紫怡
鹿璇
席嘉慧
高月
周小青
唐成程
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期408-420,共13页
Lesch-Nyhan综合征(Lesch-Nyhan syndrome,LNS)是一种先天性的嘌呤代谢缺陷病,次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine phosphoribosyltransferase,HPRT)是其主要致病基因,临床特征表现为尿酸分泌过多、痛风、肾结石及肾脏损伤等,...
Lesch-Nyhan综合征(Lesch-Nyhan syndrome,LNS)是一种先天性的嘌呤代谢缺陷病,次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine phosphoribosyltransferase,HPRT)是其主要致病基因,临床特征表现为尿酸分泌过多、痛风、肾结石及肾脏损伤等,目前致病机制尚未被完全阐明且无有效治愈手段。动物模型在疾病致病机理研究和治疗方式探索中发挥着重要功能。本研究采用高效的CRISPR/Cas9基因编辑技术和显微注射的方式敲除家兔(Oryctolagus cuniculus)HPRT基因建立了LNS家兔模型,以期能更好的模拟该疾病的表型。首先针对兔HPRT基因第3外显子设计一条sgRNA,将体外转录的sgRNA和Cas9 mRNA共注射到兔受精卵中,注射后的胚胎移植到代孕母兔子宫中,待仔兔出生后对其基因型及表型进行鉴定与分析。共出生4只仔兔(分别编号为R1、R2、R3和R4),测序结果显示4只仔兔都产生了不同程度的基因修饰,基因编辑效率达100%,其中R4仔兔T载体测序结果在基因编辑靶点未检测到野生型序列。通过6-硫代鸟嘌呤(6-Thioguanine,6-TG)药物测试,证明R4仔兔HPRT酶活性缺失;肾组织HE染色发现4只仔兔表现出肾小球炎细胞浸润、集合管脱落等肾脏损失。本研究成功设计了1条能够敲除家兔HPRT基因的sgRNA,并采用CRISPR/Cas9基因编辑技术和显微注射方式成功构建了HPRT基因修饰家兔,为研究LNS综合征致病机制和治疗方式提供了新的非啮齿类动物模型。
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关键词
Lesch-Nyhan综合征
HPRT
家兔
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职称材料
FAH/GSTZ1双基因突变肝细胞模型的建立
3
作者
刘艳
顾鹏
+5 位作者
叶行
梁春锦
关雅今
张映辉
邹庆剑
顾为望
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2022年第8期71-78,共8页
目的采用CRISPR/Cas9技术敲除人LO2肝细胞系的谷胱甘肽S-转移酶Z1(GSTZ1)和延胡索酰乙酰乙酸水解酶(FAH),探讨GSTZ1和FAH基因敲除对于肝细胞生长、增殖、迁移的影响。方法分别构建靶向GSTZ1和FAH基因的向导RNA(sgRNA)载体,与CRISPR/Cas...
目的采用CRISPR/Cas9技术敲除人LO2肝细胞系的谷胱甘肽S-转移酶Z1(GSTZ1)和延胡索酰乙酰乙酸水解酶(FAH),探讨GSTZ1和FAH基因敲除对于肝细胞生长、增殖、迁移的影响。方法分别构建靶向GSTZ1和FAH基因的向导RNA(sgRNA)载体,与CRISPR/Cas9载体共转染LO2细胞,通过有限稀释法筛选,基因型鉴定和Western blot实验证实获得的FAH和GSTZ1基因的单基因敲除和双基因敲除三种细胞株。进一步对敲除细胞株表型进行鉴定,通过平板克隆形成实验检测基因敲除肝细胞克隆形成能力;CCK8实验和EdU分析实验测试细胞增殖能力;划痕实验检测细胞迁移能力。结果成功获得GSTZ1、FAH和FAH/GSTZ1三种基因敲除细胞株。相比于野生型细胞,三种细胞株在增殖能力,克隆形成能力、迁移能力均有显著增加,其中FAH敲除对细胞表型的影响相对较小,GSTZ1敲除对肝细胞活性提高最强,双基因敲除细胞活性处于两个单基因敲除之间。结论我们首次成功建立了FAH/GSTZ1双基因突变肝细胞株,为酪氨酸代谢通路研究和Ⅰ型遗传性酪氨酸血症治疗研究提供了一个新型的细胞模型。
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关键词
CRISPR/Cas9技术
双基因敲除
GSTZ1
FAH
LO2细胞系
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职称材料
题名
评价白蛋白相关药物动物模型的研究进展
1
作者
资崯
宁丽
周小青
唐成程
机构
广东省医学
大动物模型
重点实验室
出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第10期1374-1380,共7页
基金
广东省自然科学基金(2019A1515110283)
江门市科技计划项目(2021030101230004833,2021030101220004887)。
文摘
许多肽或蛋白质药物治疗的一个主要挑战是血浆半衰期短。通过将该类药物与白蛋白结合获得的药物称为白蛋白相关药物,有效延长血浆半衰期。动物模型作为研究药物药代动力学的重要工具是药物研究中不可或缺的一部分。本综述概括了两大类动物模型:啮齿类(野生型小鼠、大鼠模型,基因修饰小鼠模型)与非啮齿(猴)在白蛋白相关药物药代动力学研究中的应用与发展,为其进一步研究发展提供参考。
关键词
白蛋白相关药物
血浆半衰期
动物模型
Keywords
albumin-related drugs
plasma half-life
animal model Conflicts of Interest:The authors declare no conflict of interest.
分类号
Q95-33 [生物学—动物学]
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职称材料
题名
Lesch-Nyhan综合征家兔模型的建立及其表型分析
2
作者
资崯
郑淑文
宁丽
蔺紫怡
鹿璇
席嘉慧
高月
周小青
唐成程
机构
五邑大学药学与食品工程学院
广东省医学
大动物模型
重点实验室
五邑大学
华南生物医药大动物模型研究院
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期408-420,共13页
基金
广东省基础与应用基础研究基金项目(编号:2023A1515111163)资助。
文摘
Lesch-Nyhan综合征(Lesch-Nyhan syndrome,LNS)是一种先天性的嘌呤代谢缺陷病,次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine phosphoribosyltransferase,HPRT)是其主要致病基因,临床特征表现为尿酸分泌过多、痛风、肾结石及肾脏损伤等,目前致病机制尚未被完全阐明且无有效治愈手段。动物模型在疾病致病机理研究和治疗方式探索中发挥着重要功能。本研究采用高效的CRISPR/Cas9基因编辑技术和显微注射的方式敲除家兔(Oryctolagus cuniculus)HPRT基因建立了LNS家兔模型,以期能更好的模拟该疾病的表型。首先针对兔HPRT基因第3外显子设计一条sgRNA,将体外转录的sgRNA和Cas9 mRNA共注射到兔受精卵中,注射后的胚胎移植到代孕母兔子宫中,待仔兔出生后对其基因型及表型进行鉴定与分析。共出生4只仔兔(分别编号为R1、R2、R3和R4),测序结果显示4只仔兔都产生了不同程度的基因修饰,基因编辑效率达100%,其中R4仔兔T载体测序结果在基因编辑靶点未检测到野生型序列。通过6-硫代鸟嘌呤(6-Thioguanine,6-TG)药物测试,证明R4仔兔HPRT酶活性缺失;肾组织HE染色发现4只仔兔表现出肾小球炎细胞浸润、集合管脱落等肾脏损失。本研究成功设计了1条能够敲除家兔HPRT基因的sgRNA,并采用CRISPR/Cas9基因编辑技术和显微注射方式成功构建了HPRT基因修饰家兔,为研究LNS综合征致病机制和治疗方式提供了新的非啮齿类动物模型。
关键词
Lesch-Nyhan综合征
HPRT
家兔
Keywords
Lesch-Nyhan syndrome
HPRT
rabbit
分类号
R-332 [医药卫生]
R589.7 [医药卫生—内分泌]
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职称材料
题名
FAH/GSTZ1双基因突变肝细胞模型的建立
3
作者
刘艳
顾鹏
叶行
梁春锦
关雅今
张映辉
邹庆剑
顾为望
机构
五邑大学
生物
科技与大健康学院
江门市大健康国际创新
研究院
华南生物医药大动物模型研究院
南方医科大学实验
动物
管理中心暨比较医学
研究
所
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2022年第8期71-78,共8页
基金
江门市创新团队项目(2017TD02)。
文摘
目的采用CRISPR/Cas9技术敲除人LO2肝细胞系的谷胱甘肽S-转移酶Z1(GSTZ1)和延胡索酰乙酰乙酸水解酶(FAH),探讨GSTZ1和FAH基因敲除对于肝细胞生长、增殖、迁移的影响。方法分别构建靶向GSTZ1和FAH基因的向导RNA(sgRNA)载体,与CRISPR/Cas9载体共转染LO2细胞,通过有限稀释法筛选,基因型鉴定和Western blot实验证实获得的FAH和GSTZ1基因的单基因敲除和双基因敲除三种细胞株。进一步对敲除细胞株表型进行鉴定,通过平板克隆形成实验检测基因敲除肝细胞克隆形成能力;CCK8实验和EdU分析实验测试细胞增殖能力;划痕实验检测细胞迁移能力。结果成功获得GSTZ1、FAH和FAH/GSTZ1三种基因敲除细胞株。相比于野生型细胞,三种细胞株在增殖能力,克隆形成能力、迁移能力均有显著增加,其中FAH敲除对细胞表型的影响相对较小,GSTZ1敲除对肝细胞活性提高最强,双基因敲除细胞活性处于两个单基因敲除之间。结论我们首次成功建立了FAH/GSTZ1双基因突变肝细胞株,为酪氨酸代谢通路研究和Ⅰ型遗传性酪氨酸血症治疗研究提供了一个新型的细胞模型。
关键词
CRISPR/Cas9技术
双基因敲除
GSTZ1
FAH
LO2细胞系
Keywords
CRISPR/Cas9
dual-gene knockout
GSTZ1
FAH
LO2 cell line
分类号
R-33 [医药卫生]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
评价白蛋白相关药物动物模型的研究进展
资崯
宁丽
周小青
唐成程
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
Lesch-Nyhan综合征家兔模型的建立及其表型分析
资崯
郑淑文
宁丽
蔺紫怡
鹿璇
席嘉慧
高月
周小青
唐成程
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
FAH/GSTZ1双基因突变肝细胞模型的建立
刘艳
顾鹏
叶行
梁春锦
关雅今
张映辉
邹庆剑
顾为望
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2022
0
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