大蒜细胞悬浮培养中细胞生长与产酶的研究 被引量：5

1

作者 张毅 李弘剑 +1 位作者 郭勇 姚汝华 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 1994年第2期67-73,共7页

当大蒜细胞培养在ＭＳ液体培养基中，细胞生长迅速，脱分化的细胞仍具有合成和积累ＳＯＤ的能力．培养１５天，大蒜细胞生长和ＳＯＤ酶积累都达到高峰期，细胞合成量鲜重为１２０．８ｇ／Ｌ，细胞单位酶活力为每克细胞５．２２×１... 当大蒜细胞培养在ＭＳ液体培养基中，细胞生长迅速，脱分化的细胞仍具有合成和积累ＳＯＤ的能力．培养１５天，大蒜细胞生长和ＳＯＤ酶积累都达到高峰期，细胞合成量鲜重为１２０．８ｇ／Ｌ，细胞单位酶活力为每克细胞５．２２×１０－７ｍｏｌ／ｓ，细胞生长最适温度为２８℃，最适ｐＨ值为５．８。植物生长调节物质（２，４—Ｄ、ＫＴ）对大蒜培养细胞生长和ＳＯＤ酶积累都有显著的影响，其浓度有一个最佳值。适当地提高培养基中物质的浓度，有利于促进大蒜细胞的生长和胞内ＳＯＤ酶的积累。培养基中添加一些刺激剂，可大大地提高大蒜细胞内ＳＯＤ酶的产量。 展开更多

关键词 悬浮培养 大蒜细胞 超氧物歧化酶

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谷氨酸生产菌T_(6-13)谷氨酸脱氢酶特性研究 被引量：6

2

作者 苏正定 郭勇 彭志英 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 1991年第4期83-88,共6页

本文对谷氨酸生产菌Te_(-13)谷氨酸脱氢酶的辅酶专一性、热稳定性、最适温度、最适pH、动力学参数和发酵过程中酶活力变化进行了研究。结果表明该酶属胞内酶,以NADP^+为专一性辅酶,脱氨反应的最适pH为9.5,酶的最适温度为35～40℃,酶的... 本文对谷氨酸生产菌Te_(-13)谷氨酸脱氢酶的辅酶专一性、热稳定性、最适温度、最适pH、动力学参数和发酵过程中酶活力变化进行了研究。结果表明该酶属胞内酶,以NADP^+为专一性辅酶,脱氨反应的最适pH为9.5,酶的最适温度为35～40℃,酶的热稳定性试验表明50℃保温10分钟,残留活力为50%,60℃保温10分钟残留活力为4%,70℃下则完全丧失活力,对L—谷氨酸和NADP^+动力学参数分别为2.13×10.2mol/L和6.58×10^(-5)mol/L,AMP、ADP对脱氨反应有激活作用,ATP无影响。 展开更多

关键词 谷氨酸脱氢酶 脱氢酶 棒状杆菌属

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大蒜细胞培养及超氧化物歧化酶产生的研究 被引量：4

3

作者 张毅 李弘剑 +1 位作者 郭勇 陈连就 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 1993年第3期94-94,共1页

经8℃低温下贮藏一个月的大蒜,在添加0. 1mg/1KT 和2mg/12,4-D 的 MS 培养基中培养,产生大量的愈伤组织,间隔20天继代培养,愈伤组织能够脱分化地持续增殖。培养中,随愈伤组织的增长,细胞内超氧化物歧化酶含量亦随之提高。培养15天,比活... 经8℃低温下贮藏一个月的大蒜,在添加0. 1mg/1KT 和2mg/12,4-D 的 MS 培养基中培养,产生大量的愈伤组织,间隔20天继代培养,愈伤组织能够脱分化地持续增殖。培养中,随愈伤组织的增长,细胞内超氧化物歧化酶含量亦随之提高。培养15天,比活达到33. 7U/mg 蛋白,比天然贮藏大蒜中的含量提高了56％。 展开更多

关键词 大蒜 细胞培养 超氧物歧化酶

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冬虫夏草及其菌丝体研究进展 被引量：37

4

作者 肖宏亮 高孔荣 谭盈科 《中国食用菌》 1997年第2期3-5,共3页

本文从冬虫夏草及其菌丝体的药化、药理(含临床应用)、冬虫夏草的人工栽培及菌丝体的深层培养诸方面概述了近年来的研究工作,对今后的研究工作提出建议与设想。

关键词 冬虫夏草 菌丝体 栽培 深层培养 药化 药理

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粗淀粉原料谷氨酸发酵新工艺研究 被引量：3

5

作者 云逢霖 周婉冰 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 1996年第2期7-11,共5页

本研究采用木薯粗淀粉原料，双酶法制糖，在过量生物素下添加青霉素的发酵工艺路线，以接种量８％、初糖浓度１００～１３０ｇ／Ｌ，在发酵的适当时间添加适量青霉素（约４ｕ／ｍｌ），发酵过程流加尿素溶液控制ｐＨ７．１～８．０范围... 本研究采用木薯粗淀粉原料，双酶法制糖，在过量生物素下添加青霉素的发酵工艺路线，以接种量８％、初糖浓度１００～１３０ｇ／Ｌ，在发酵的适当时间添加适量青霉素（约４ｕ／ｍｌ），发酵过程流加尿素溶液控制ｐＨ７．１～８．０范围，同时流加浓糖液，经４０小时摇瓶培养，结界谷氨酸生成量高达１０１．９ｇ／Ｌ，糖酸转化率５９．５３％。与传统的采用精淀粉控制生物素＂亚适量＂工艺相比，可大幅降低粮耗、降低成本，提高产酸１５～２０ｇ／Ｌ． 展开更多

关键词 谷氨酸 发酵 淀粉糖 青霉素

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番木瓜细胞形态变化与蛋白酶积累过程的研究 被引量：1

6

作者 李弘剑 郭勇 +1 位作者 张毅 彭志英 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 1993年第1期33-37,共5页

番木瓜细胞在含0.1mg/L NAA、0.5mg/L 6—BA的B_5培养基中,25℃避光培养。随着培养的继续,细胞形态发生变化。用电子显微镜扫描观察,培养前二十天,细胞处于生长旺盛阶段,形态饱满、密度大、生命力强,代谢旺盛,大量积累木瓜蛋白酶。培养... 番木瓜细胞在含0.1mg/L NAA、0.5mg/L 6—BA的B_5培养基中,25℃避光培养。随着培养的继续,细胞形态发生变化。用电子显微镜扫描观察,培养前二十天,细胞处于生长旺盛阶段,形态饱满、密度大、生命力强,代谢旺盛,大量积累木瓜蛋白酶。培养十八天的蛋白酶比活力为209.1 U/mg·蛋白,比产率为4.04 U/g·day,是天然木瓜乳汁中的6.31倍和130%。当细胞开始分化或衰老时,木瓜蛋白酶的积累能力减弱。 展开更多

关键词 番木瓜 木瓜蛋白酶 细胞形态学

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利用玫瑰茄细胞悬浮培养技术生产花色苷的初步研究 被引量：1

7

作者 郑穗平 沈继红 郭勇 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期29-31,共3页

玫瑰茄细胞悬浮培养过程中，细胞生长曲线呈“Ｓ”型。花色苷于细胞生长缓慢时大量形成，细胞中花色苷的最高含量为原植株的２．５倍。其生成模式为非生长偶联型。同时研究了悬浮培养过程中细胞形态、可溶性糖含量以及ｐＨ值变化的规律... 玫瑰茄细胞悬浮培养过程中，细胞生长曲线呈“Ｓ”型。花色苷于细胞生长缓慢时大量形成，细胞中花色苷的最高含量为原植株的２．５倍。其生成模式为非生长偶联型。同时研究了悬浮培养过程中细胞形态、可溶性糖含量以及ｐＨ值变化的规律，可作为反应器大规模培养的依据。 展开更多

关键词 玫瑰茄 植物细胞 悬浮培养 花色苷 细胞悬浮培养

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竹荪菌丝深层培养研究 被引量：9

8

作者 吴振强 高孔荣 +1 位作者 曾惠玲 林晓红 《中国食用菌》 1992年第3期22-24,共3页

本文从工程角度研究了一级摇瓶培养和二级摇瓶培养基配方、培养温度、培养方式、培养时间及溶氧速率(装液量)等对竹荪菌丝得率的影响,并对二级摇瓶培养的接种量及种龄对茵丝得率的影响也作了研究;摇瓶竹荪干菌丝得率达0.01％(w/v)。

关键词 竹荪 摇瓶培养 栽培

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基因重组质粒稳定性与苯丙氨酸发酵的研究 被引量：1

9

作者 梁世中 高河泳 关达治 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 1991年第3期1-7,共7页

本研究应用具有苯丙氨酸生产基因 pheA^(FR)、aroF^(FR)、CI_(857) 的质粒 pSY130～14和质粒 pS Y16,重组构建了具有苯丙氨酸生产基因系统的新质粒 pSY200-14。然后,使其转化到大肠菌 AT2471中,育成了基因重组菌株 AT2471/pSY200-14。... 本研究应用具有苯丙氨酸生产基因 pheA^(FR)、aroF^(FR)、CI_(857) 的质粒 pSY130～14和质粒 pS Y16,重组构建了具有苯丙氨酸生产基因系统的新质粒 pSY200-14。然后,使其转化到大肠菌 AT2471中,育成了基因重组菌株 AT2471/pSY200-14。试验表明,新菌株质粒稳定性比原菌株有较大的提高。在2. 5升通气搅拌罐进行苯丙氨酸发酵试验,在搅拌转速850rpm、通气速率1. 0VVM,38. 5℃和 pH7. 0的条件下,发酵48小时苯丙氨酸生成量达14. 2g/L,比原菌株 AT2471/pSY130-14增产11. 8%。 展开更多

关键词 基因 重组 质粒 苯丙氨酸 发酵

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巴戟天细胞悬浮培养生产蒽醌类物质的研究 被引量：3

10

作者 向红 郭勇 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 1997年第2期62-67,共6页

巴戟天细胞在含ＮＡＡ０．２５ｍｇ／Ｌ，Ｋｔ０．０２５ｍｇ／Ｌ的Ｂ５培养基中进行悬浮培养，细胞比生长速率为０．１４０天－１，倍增时间为１１８．８小时，蒽醌含量可达１５１．２７ｍｇ／Ｌ，为细胞干重的０．８１％。巴戟天细胞... 巴戟天细胞在含ＮＡＡ０．２５ｍｇ／Ｌ，Ｋｔ０．０２５ｍｇ／Ｌ的Ｂ５培养基中进行悬浮培养，细胞比生长速率为０．１４０天－１，倍增时间为１１８．８小时，蒽醌含量可达１５１．２７ｍｇ／Ｌ，为细胞干重的０．８１％。巴戟天细胞中蒽醌含量是巴戟天根的２．１７倍，蒽醌的比生产速率是巴戟天根的７９．３倍，在固体培养愈伤组织中其蒽醌含量和比产率则分别是巴戟天根的６．１倍和２０９倍。 展开更多

关键词 植物细胞培养 蒽醌 巴戟天

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内孢霉酵母糖化酶产酶条件及酶学特性的研究 被引量：1

11

作者 王国政 周婉冰 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 1994年第3期37-43,共7页

本研究对Ｅｎｄｏｍｙｃｏｐｓｉｓｆｉｂｕｌｉｇｅｒａ（内孢霉酵母）糖化酶发酵进行培养基的选择，并对产酶时间、接种量、装量和初始ｐＨ值诸因素进行探讨，获得最佳产酶条件．该糖化酶以可溶性淀粉为底物，最适ｐＨ为５．２，最适... 本研究对Ｅｎｄｏｍｙｃｏｐｓｉｓｆｉｂｕｌｉｇｅｒａ（内孢霉酵母）糖化酶发酵进行培养基的选择，并对产酶时间、接种量、装量和初始ｐＨ值诸因素进行探讨，获得最佳产酶条件．该糖化酶以可溶性淀粉为底物，最适ｐＨ为５．２，最适温度４０℃；在５０℃以下较稳定，有较宽的ｐＨ稳定范围（ｐＨ３．０－７．０）；米氏常数Ｋｍ＝１２．８４ｍｇ·ｍｌ－１． 展开更多

关键词 内孢霉酵母 糖化酶 酶学特性

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人肿瘤坏死因子穿梭表达载体的构建 被引量：8

12

作者 王捷 江悦华 +3 位作者 郭勇 施定基 张宏斌 刘凤龙 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第4期82-85,共4页

应用ＤＮＡ重组技术，将人肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦ）ｃＤＮＡ插到质粒ＰＲＬ４３９的ＰｐｓｂＡ启动子下游，得到中间载体ＰＲＬ＿ＴＮＦ；再把ＰＲＬ＿ＴＮＦ上含ＰｐｓｂＡ和（ｒｈＴＮＦ）ｃＤＮＡ的片段连到穿梭载体ＰＤＣ＿８上... 应用ＤＮＡ重组技术，将人肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦ）ｃＤＮＡ插到质粒ＰＲＬ４３９的ＰｐｓｂＡ启动子下游，得到中间载体ＰＲＬ＿ＴＮＦ；再把ＰＲＬ＿ＴＮＦ上含ＰｐｓｂＡ和（ｒｈＴＮＦ）ｃＤＮＡ的片段连到穿梭载体ＰＤＣ＿８上，构建成穿梭表达载体ＰＤＣ＿ＴＮＦ．转化大肠杆菌ＴＧ１后，进行发酵培养．ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ分析和免疫印迹检测结果显示ｒｈＴＮＦ获稳定表达，分子量为１７ｋｕ．本研究结果为ｒｈＴＮＦ在蓝藻中的表达提供了技术基础． 展开更多

关键词 人肿瘤坏死因子 穿梭载体 重组 抗肿瘤药

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主要营养成分对悬浮培养玫瑰茄细胞生长和花青素合成的影响 被引量：21

13

作者 郑穗平 郭勇 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期70-74,共5页

本文研究了培养基中碳源和氮源变化对悬浮培养玫瑰茄细胞生长和花青素合成的影响。在８种不同的碳源中，麦芽糖有利于花青素的积累，而蔗糖和葡萄糖适合细胞生长，并有较高的花青素产率。在１％～１０％蔗糖浓度范围内，４％浓度下细胞... 本文研究了培养基中碳源和氮源变化对悬浮培养玫瑰茄细胞生长和花青素合成的影响。在８种不同的碳源中，麦芽糖有利于花青素的积累，而蔗糖和葡萄糖适合细胞生长，并有较高的花青素产率。在１％～１０％蔗糖浓度范围内，４％浓度下细胞生长和花青素产率最高，而６％浓度下细胞花青素含量最高，高渗环境较有利于细胞花青素的积累。１３５ｍＭ的氮源总量已足够维持玫瑰茄细胞生长和花青素合成，氮源总量增加对细胞代谢有抑制作用。ＮＨ＋４对细胞有显著抑制作用。总量１３５ｍＭ，ＮＯ－３与ＮＨ＋４比例２５∶２和２３∶４时细胞生长和花青素合成最佳。 展开更多

关键词 营养成分 玫瑰茄 悬浮培养 花青素

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玫瑰茄细胞红色素中总黄酮的分离及含量测定 被引量：12

14

作者 朱新贵 郭勇 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期66-67,共2页

用１％ＨＣｌ—甲醇溶液或１％ＨＣｌ—乙醇溶液提取的玫瑰茄细胞红色素中含有黄酮物质。用纸层析方法（流动相ＢＨＷ）分离黄酮时，花青素的移迁率为０．３４，黄酮为０．７１；采用硅胶薄层层析时，迁移率分别为０．１４和０．３２，... 用１％ＨＣｌ—甲醇溶液或１％ＨＣｌ—乙醇溶液提取的玫瑰茄细胞红色素中含有黄酮物质。用纸层析方法（流动相ＢＨＷ）分离黄酮时，花青素的移迁率为０．３４，黄酮为０．７１；采用硅胶薄层层析时，迁移率分别为０．１４和０．３２，经测定，玫瑰茄细胞色素中总黄酮含量为１５．３０～２１．５０ｍｇ／ｇ。 展开更多

关键词 玫瑰茄 细胞红色素 黄酮 食用色素 测定

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磷限制培养中玫瑰茄细胞生长及花青素形成动力学 被引量：12

15

作者 阮茜 郭勇 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第1期86-90,共5页

研究了在不同起始磷浓度下玫瑰茄细胞生长、主要营养物质（糖、铵离子及硝酸根、胞外磷）的消耗及产物花青素形成的动力学特性．结果表明该细胞的比生长速率与限制性底物磷浓度的关系符合Ｍｏｎｏｄ方程，最大比生长速率为０．２１６０... 研究了在不同起始磷浓度下玫瑰茄细胞生长、主要营养物质（糖、铵离子及硝酸根、胞外磷）的消耗及产物花青素形成的动力学特性．结果表明该细胞的比生长速率与限制性底物磷浓度的关系符合Ｍｏｎｏｄ方程，最大比生长速率为０．２１６０ｄ－１．细胞比生长速率与产物花青素的形成呈负相关． 展开更多

关键词 玫瑰茄 花青素 动力学 细胞培养 天然色素

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非水相中脂肪酶催化甘油三酯转酯反应动力学 被引量：8

16

作者 苏正定 姚汝华 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1993年第1期42-46,共5页

本文研究了脂肪酶在己烷中催化甘油三丁酸酯与硬脂酸之间的转酯反应动力学。转酯反应分为二个连续的反应步骤:由酯生成的酰基酶复合物的水解和由酸生成的酰基酶复合物的醇解,整个反应符合乒乓反应机制,动力学参数为:K_m(酯)=3.2×10... 本文研究了脂肪酶在己烷中催化甘油三丁酸酯与硬脂酸之间的转酯反应动力学。转酯反应分为二个连续的反应步骤:由酯生成的酰基酶复合物的水解和由酸生成的酰基酶复合物的醇解,整个反应符合乒乓反应机制,动力学参数为:K_m(酯)=3.2×10^(-2)mol/L,K_m(酸)=6.9×10^(-2)mol/L,V_m=1.7×10^(-4)mol/L·min。 展开更多

关键词 动力学 转酯反应 脂肪酶 非水相

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用植物细胞培养技术生产花色苷 被引量：6

17

作者 杜金华 张开利 郭勇 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 1997年第4期511-517,共7页

本文报道了近年来用植物细胞培养技术生产花色苷的研究进展。花色苷合成途径中关键酶对花色苷合成的影响；高产花色音细胞系的筛选方法；培养基组成（碳源、氮源、无机离子、植物生长调节剂、渗透压及渗透剂等）对花色苷产量的影响，以... 本文报道了近年来用植物细胞培养技术生产花色苷的研究进展。花色苷合成途径中关键酶对花色苷合成的影响；高产花色音细胞系的筛选方法；培养基组成（碳源、氮源、无机离子、植物生长调节剂、渗透压及渗透剂等）对花色苷产量的影响，以及植物培养细胞合成花色背的代谢调节等，同时报道了在细胞固定化方面的尝试。 展开更多

关键词 花色苷 生产 植物细胞培养 细胞培养 代谢调节

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高产谷氨酸菌S9114的选育及生产实绩 被引量：4

18

作者 云逢霖 周婉冰 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 1994年第1期56-62,共7页

以天津短杆菌（Ｂｒｅｖ．ｔｉａｎｊｉｎ）Ｔ６－１３出发，经紫外线、亚硝基胍用原生质体等诱变处理，选育出Ｓ９１１４菌株，具有耐高糖、耐高谷氨酸，不利用谷氨酸和产酸率高的特性。摇瓶产酸最高达９６．９ｇ／Ｌ，比原出发菌提高... 以天津短杆菌（Ｂｒｅｖ．ｔｉａｎｊｉｎ）Ｔ６－１３出发，经紫外线、亚硝基胍用原生质体等诱变处理，选育出Ｓ９１１４菌株，具有耐高糖、耐高谷氨酸，不利用谷氨酸和产酸率高的特性。摇瓶产酸最高达９６．９ｇ／Ｌ，比原出发菌提高５０％。经工艺条件优化，在２０ｍ３发酵罐最高产酸９２．３ｇ／Ｌ（转化率５６．５％）。在６０ｍ３发酵罐连续１０批平均产酸８２．１ｇ／Ｌ，转化率４８．７４％、在１５００升发酵罐进行高生物素添加青霉素流加糖的工艺实验，最高产酸达９８．７ｇ／Ｌ，转化率５２．２％，周期２６小时。 展开更多

关键词 谷氨酸 原生质体 诱发突变 发酵

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谷氨酸阴离子和晶种对晶体成核与生长的影响 被引量：2

19

作者 张文会 云逢霖 姚汝华 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 1994年第1期63-69,共7页

研究了谷氨酸阴离子（Ｇ－）和晶种对其晶体二次成核与生长的影响．结果表明成核速率随晶种粒度和晶种量减少而减少；在高过饱和度时Ｇ－对成核有促进作用，而在低过饱和度时则有抑制作用；晶体生长速率随粒度减小而增大；Ｇ－对晶体生... 研究了谷氨酸阴离子（Ｇ－）和晶种对其晶体二次成核与生长的影响．结果表明成核速率随晶种粒度和晶种量减少而减少；在高过饱和度时Ｇ－对成核有促进作用，而在低过饱和度时则有抑制作用；晶体生长速率随粒度减小而增大；Ｇ－对晶体生长有抑制作用；结晶时使用粒度小的晶种可得到粒度分布较均匀的晶体． 展开更多

关键词 谷氨酸 结晶 成核 阴离子 味精

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PNP酶固定化技术探讨 被引量：1

20

作者 彭志英 郭勇 +1 位作者 孙东晓 邱树毅 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 1993年第2期37-41,共5页

本研究采用活化CH-Sepharose 4B固定化PNP酶,发现其表现米氏常数K_m=5.13×10^(-3)mol/l,比游离酶增大(游离酶K_m=4.44×10^(-3)mol/l);固定化酶和游离酶的最适pH分别为9.6和9.0,固定化后,其酶的稳定性明显提高,半衰期为七个半... 本研究采用活化CH-Sepharose 4B固定化PNP酶,发现其表现米氏常数K_m=5.13×10^(-3)mol/l,比游离酶增大(游离酶K_m=4.44×10^(-3)mol/l);固定化酶和游离酶的最适pH分别为9.6和9.0,固定化后,其酶的稳定性明显提高,半衰期为七个半月。用此酶催化聚合而成的PolyC和PolyI的分子量分别大于5S和9S。 展开更多

关键词 活化 交联琼脂糖 PNP酶 固定化 酶

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