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人Tau基因多表位肽段原核表达载体的构建与表达
被引量：
1
1
作者
孙海涛
杨化强
+4 位作者
杨璐军
李正阳
杜谋选
陈宇新
姜晓丹
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期185-188,共4页
目的构建含人Tau多表位肽段基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化目的蛋白,检测Tau多表位DNA疫苗免疫小鼠后特异性抗体产生情况。方法以质粒pVAX1-Tau为模板,用PCR扩增人Tau多表位肽段基因,插入表达载体pGEX-4T-2中,构建原核...
目的构建含人Tau多表位肽段基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化目的蛋白,检测Tau多表位DNA疫苗免疫小鼠后特异性抗体产生情况。方法以质粒pVAX1-Tau为模板,用PCR扩增人Tau多表位肽段基因,插入表达载体pGEX-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-TauP1/P2。将鉴定后的阳性重组质粒转入E.coli BL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并采用GST法纯化、SDS-PAGE鉴定目的蛋白的表达。以TauP1/P2 DNA疫苗免疫小鼠获取血清,Dot-blot检测TauP1/P2特异性抗体产生情况。结果 PCR扩增出约300 bp的基因片段,克隆至表达载体后,经酶切和测序验证正确;获得了纯化的目的蛋白,并证实了GST-TauP1/P2融合蛋白的表达。Dot-blot检测到特异性TauP1/P2抗体的产生。结论成功构建和表达人Tau多表位肽段基因的目的蛋白GST-TauP1/P2,能够识别Tau多表位DNA疫苗免疫后小鼠产生的特异性TauP1/P2抗体。
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关键词
TAU
质粒
原核表达
融合蛋白
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职称材料
振幅整合脑电图在颞叶癫痫模型中的应用
被引量：
6
2
作者
池雅杰
薛杉
+6 位作者
孙海涛
徐玉婷
梁志明
吴朝晖
徐强
刘朝明
郭燕舞
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2017年第9期1405-1409,共5页
目的:探讨振幅整合脑电图(a EEG)在颞叶癫痫模型癫痫脑电记录中的应用价值。方法:选用成年雄性恒河猴4只,应用单侧杏仁核海人酸(2μg/μL)注射法构建颞叶癫痫模型。对模型动物进行定期的头皮脑电监测。脑电记录采用原始脑电图联合量化...
目的:探讨振幅整合脑电图(a EEG)在颞叶癫痫模型癫痫脑电记录中的应用价值。方法:选用成年雄性恒河猴4只,应用单侧杏仁核海人酸(2μg/μL)注射法构建颞叶癫痫模型。对模型动物进行定期的头皮脑电监测。脑电记录采用原始脑电图联合量化脑电图同步进行记录。对a EEG上的异常节点进行定位并对同时段的原始脑电图进行回顾性分析,判断其对动物模型的癫痫发作诊断的准确性。结果:排除明显接触不良造成的异常片段后,4只模型动物的a EEG趋势图分析共取得23处与背景活动明显不同的节点。对上述11处节点对应原始脑电图进行分析,均考虑为癫痫发作事件。结论:a EEG趋势图对于该颞叶癫痫模型的癫痫发作诊断具有高度敏感性,在超长程脑电监测中联合应用此方法可对癫痫发作进行快速定位,为实验研究节省大量人力成本。
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关键词
颞叶癫痫
恒河猴
振幅整合脑电图
动物模型
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职称材料
题名
人Tau基因多表位肽段原核表达载体的构建与表达
被引量：
1
1
作者
孙海涛
杨化强
杨璐军
李正阳
杜谋选
陈宇新
姜晓丹
机构
南方医科大学广东神经外科研究所//珠江医院神经外科//广东省脑功能修复
与再生
重点
实验室
//国家临床
重点
专科
中国科学院广州生物医药与健康研究院
华南干细胞与再生医学重点实验室
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期185-188,共4页
基金
国家自然科学基金(81171179)
广东省及广州市科技计划重点项目[粤财企(2008)258-2008A030201019
+1 种基金
穗科字(2008)3-2008A1.E4011-6
09852120112-2009J1-C418-2]~~
文摘
目的构建含人Tau多表位肽段基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化目的蛋白,检测Tau多表位DNA疫苗免疫小鼠后特异性抗体产生情况。方法以质粒pVAX1-Tau为模板,用PCR扩增人Tau多表位肽段基因,插入表达载体pGEX-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-TauP1/P2。将鉴定后的阳性重组质粒转入E.coli BL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并采用GST法纯化、SDS-PAGE鉴定目的蛋白的表达。以TauP1/P2 DNA疫苗免疫小鼠获取血清,Dot-blot检测TauP1/P2特异性抗体产生情况。结果 PCR扩增出约300 bp的基因片段,克隆至表达载体后,经酶切和测序验证正确;获得了纯化的目的蛋白,并证实了GST-TauP1/P2融合蛋白的表达。Dot-blot检测到特异性TauP1/P2抗体的产生。结论成功构建和表达人Tau多表位肽段基因的目的蛋白GST-TauP1/P2,能够识别Tau多表位DNA疫苗免疫后小鼠产生的特异性TauP1/P2抗体。
关键词
TAU
质粒
原核表达
融合蛋白
Keywords
TauP1/P2
plasmid
prokaryotic expression
fusion protein
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
振幅整合脑电图在颞叶癫痫模型中的应用
被引量：
6
2
作者
池雅杰
薛杉
孙海涛
徐玉婷
梁志明
吴朝晖
徐强
刘朝明
郭燕舞
机构
国家临床
重点
专科
广东省脑功能修复
与再生
重点
实验室
南方医科大学珠江医院神经外科
华南
理工大学电子与信息学院
广州中医药大学附属顺德和平外科医院神经外科
中国科学院广州生物医药与健康研究院
华南干细胞与再生医学重点实验室
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2017年第9期1405-1409,共5页
基金
国家自然科学基金项目(编号:61571196
81501046)
+2 种基金
国家科技支撑计划项目(编号:2014BAI03B01)
广东省神经外科临床中心资助项目(编号:2013B020400005)
广东省科技计划项目(编号:2014A020212179)
文摘
目的:探讨振幅整合脑电图(a EEG)在颞叶癫痫模型癫痫脑电记录中的应用价值。方法:选用成年雄性恒河猴4只,应用单侧杏仁核海人酸(2μg/μL)注射法构建颞叶癫痫模型。对模型动物进行定期的头皮脑电监测。脑电记录采用原始脑电图联合量化脑电图同步进行记录。对a EEG上的异常节点进行定位并对同时段的原始脑电图进行回顾性分析,判断其对动物模型的癫痫发作诊断的准确性。结果:排除明显接触不良造成的异常片段后,4只模型动物的a EEG趋势图分析共取得23处与背景活动明显不同的节点。对上述11处节点对应原始脑电图进行分析,均考虑为癫痫发作事件。结论:a EEG趋势图对于该颞叶癫痫模型的癫痫发作诊断具有高度敏感性,在超长程脑电监测中联合应用此方法可对癫痫发作进行快速定位,为实验研究节省大量人力成本。
关键词
颞叶癫痫
恒河猴
振幅整合脑电图
动物模型
Keywords
Temporal lobe epilepsy
Rhesus monkey
Amplitude integrated electroencephalogram
Animal model
分类号
R-332 [医药卫生]
R742.1 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人Tau基因多表位肽段原核表达载体的构建与表达
孙海涛
杨化强
杨璐军
李正阳
杜谋选
陈宇新
姜晓丹
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
振幅整合脑电图在颞叶癫痫模型中的应用
池雅杰
薛杉
孙海涛
徐玉婷
梁志明
吴朝晖
徐强
刘朝明
郭燕舞
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2017
6
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