产白藜芦醇大肠杆菌基因工程菌的构建 被引量：5

1

作者 梁景龙 郭丽琼 +2 位作者 孙萍 林俊芳 何杨 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第23期138-142,共5页

利用降落重叠延伸PCR和连接酶连接的方法,构建了组成型表达载体pMD18-VvRs-At4cl,该表达载体带有大肠杆菌甘油醛三磷酸脱氢酶启动子(pGAP),拟南芥(Arabidopsis thalianna)4-香豆酸辅酶A连接酶(At4CL)基因和葡萄(Vitis vinifera)白藜芦... 利用降落重叠延伸PCR和连接酶连接的方法,构建了组成型表达载体pMD18-VvRs-At4cl,该表达载体带有大肠杆菌甘油醛三磷酸脱氢酶启动子(pGAP),拟南芥(Arabidopsis thalianna)4-香豆酸辅酶A连接酶(At4CL)基因和葡萄(Vitis vinifera)白藜芦醇合酶(VvRS)基因。表达载体转化大肠杆菌BW27784,并通过PCR鉴定和酶切鉴定后,获得重组菌株。对重组菌株进行发酵培养,对发酵液进行HPLC检测,发酵液中白藜芦醇含量为4.51mg/L。这表明,拟南芥的4cl基因与金手指葡萄的rs基因在重组大肠杆菌中成功得到了表达,并且表达产物利用对香豆酸为前体物质合成了白藜芦醇。 展开更多

关键词 白藜芦醇 大肠杆菌 原核表达 pGAP 组成型表达载体

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外界因子调控类胡萝卜素生物合成研究进展 被引量：6

2

作者 殷林 林俊芳 +2 位作者 叶志伟 郭丽琼 简锦辉 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2016年第5期214-219,共6页

由于类胡萝卜素良好的生物活性和生理功能,近年来被广泛应用在食品、医药、营养保健等行业,为满足人类对类胡萝卜素的需求,有关类胡萝卜素合成调控的研究也越来越多。文章综述了光照、温度和诱导子等外界因子对类胡萝卜素生物合成的影响... 由于类胡萝卜素良好的生物活性和生理功能,近年来被广泛应用在食品、医药、营养保健等行业,为满足人类对类胡萝卜素的需求,有关类胡萝卜素合成调控的研究也越来越多。文章综述了光照、温度和诱导子等外界因子对类胡萝卜素生物合成的影响,期望在生产过程中通过外界调控来提高类胡萝卜素的产量。 展开更多

关键词 类胡萝卜素 外界因子 光照 温度 诱导子

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副干酪乳杆菌Lp.R3的高密度培养工艺优化

3

作者 方诗会 熊尧 +3 位作者 张召 林俊芳 陈涛 郭丽琼 《食品工业科技》 北大核心 2025年第9期196-205,共10页

副干酪乳杆菌Lp.R3(Lacticaseibacillus paracasei Lp.R3)是一株具有优良功能的益生菌,为实现其产业化应用对其进行高密度培养以提高活菌数。本研究通过单因素实验和正交试验优化,考察了培养基成分、静态培养条件以及发酵罐工艺对Lp.R3... 副干酪乳杆菌Lp.R3(Lacticaseibacillus paracasei Lp.R3)是一株具有优良功能的益生菌,为实现其产业化应用对其进行高密度培养以提高活菌数。本研究通过单因素实验和正交试验优化,考察了培养基成分、静态培养条件以及发酵罐工艺对Lp.R3活菌数的影响。确定了优化后的最佳培养基配方为葡萄糖30 g/L、酵母浸粉50 g/L、无水乙酸钠10 g/L、硫酸锰0.1 g/L、吐温801 g/L;最佳培养条件为温度35℃、初始pH7、接种量为1%,此时活菌数为4.75×10^(9)CFU/mL,是MRS培养基的2.91倍;在5 L发酵罐中的最佳发酵工艺为:不通气搅拌、发酵过程恒定pH为5、25%的氨水作中和剂、补料液为75 g/L的葡萄糖、采用连续变速补料,活菌数提高到了2.56×10^(10)CFU/mL,是基础的MRS培养下的15.51倍。该研究建立了Lp.R3的高密度生产方法,为Lp.R3的工业化生产提供了技术支持。 展开更多

关键词 副干酪乳杆菌 高密度培养 恒 PH 培养 工艺优化 活菌数

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草菇采后生物学特性变化及保鲜技术研究进展 被引量：7

4

作者 李瑞容 林俊芳 +2 位作者 郑倩望 邹苑 郭丽琼 《中国蔬菜》 北大核心 2021年第6期27-33,共7页

草菇味道鲜美,香味浓郁,具有较高的营养价值和药用价值。本文介绍了草菇高温开伞、褐变、低温自溶等导致其较难贮藏、货架期短的生物学特性。同时,总结了通过包装、辐照、超声波、保鲜液洗涤、涂膜、臭氧以及分子技术保鲜等保持草菇采... 草菇味道鲜美,香味浓郁,具有较高的营养价值和药用价值。本文介绍了草菇高温开伞、褐变、低温自溶等导致其较难贮藏、货架期短的生物学特性。同时,总结了通过包装、辐照、超声波、保鲜液洗涤、涂膜、臭氧以及分子技术保鲜等保持草菇采后品质的保鲜方法。建议培育耐低温菌株,在低温下贮藏,与物理方法(气调包装、超声波)或化学方法相结合的复合保鲜方式,实现草菇提质保鲜,延长货架期。另外,采用UBE2抑制剂来改善草菇的耐低温胁迫能力为未来研究提供了新方向。 展开更多

关键词 草菇 生物学特性 低温自溶 保鲜方法 UBE2抑制剂 综述

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灵芝Gal-0201的生物学特性及有效成分分析 被引量：1

5

作者 薛致鸿 林俊芳 +2 位作者 钟武杰 袁浩 郭丽琼 《食用菌》 北大核心 2007年第2期19-21,共3页

采用玉米芯、稻草、木屑和棉子壳为培养基,在16℃、21℃、25℃和31℃下培养观察Cal-0201生长特性。结果表明:Gal-0201的最适生长温度是26～30℃,最佳培养基是棉子壳;其在木屑培养基上不能形成原基,在稻草培养基上可形成原基但不能形成... 采用玉米芯、稻草、木屑和棉子壳为培养基,在16℃、21℃、25℃和31℃下培养观察Cal-0201生长特性。结果表明:Gal-0201的最适生长温度是26～30℃,最佳培养基是棉子壳;其在木屑培养基上不能形成原基,在稻草培养基上可形成原基但不能形成正常的子实体。以棉子壳为培养基,以赤芝8号(Gal-8)为对照对Gal-0201子实体的干重、含水量、粗蛋白含量、多糖含量、灰分、氨基酸含量进行了测定。结果表明:Gal-0201子实体的氨基酸含量、多糖含量以及灰分均比对照Gal-8高,其它成分与赤芝8号没有显著差异,是一个有开发价值的灵芝新资源。 展开更多

关键词 灵芝 生物特性 有效成分 Gal-0201 赤芝8号

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黄皮糯米酒的酿造工艺及香气成分的研究 被引量：13

6

作者 詹金花 杨幼慧 +2 位作者 吴孟才 罗云珍 区泽来 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期110-113,共4页

研究了不同比例黄皮与糯米混合发酵黄皮糯米酒的工艺及风味改善方法。结果表明,黄皮汁与糯米比例为6∶4,糯米糖化48h后添加黄皮汁,并接入酿酒酵母在20℃下进行乙醇发酵,于成熟的酒中勾兑黄皮皮渣蒸馏酒,不但使成品酒突出了黄皮果酒清新... 研究了不同比例黄皮与糯米混合发酵黄皮糯米酒的工艺及风味改善方法。结果表明,黄皮汁与糯米比例为6∶4,糯米糖化48h后添加黄皮汁,并接入酿酒酵母在20℃下进行乙醇发酵,于成熟的酒中勾兑黄皮皮渣蒸馏酒,不但使成品酒突出了黄皮果酒清新淡雅的香气和糯米酒酒香醇厚特点,还对黄皮皮渣进行了有效利用。采用气质联用技术(GC/MS)分析黄皮糯米酒香气成分的结果表明,既含有黄皮主体香,又含有糯米酒的香气成分。 展开更多

关键词 黄皮糯米酒 工艺优化 香气成分 GC/MS

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纤维素酶活力测定研究进展 被引量：13

7

作者 程抒劼 郑兰娟 +3 位作者 林俊芳 娄囡囡 赵力超 郭丽琼 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期334-336,342,共4页

纤维素酶是一种多酶复合体系,其作用的底物比较复杂,活力测定方法也存在差异。如何准确测定纤维素酶活力的大小,对于研究该酶的特性及应用具有重要的意义。本文对纤维素酶测定的常用方法进行了综述和评价。

关键词 纤维素酶 活力测定 方法

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木聚糖酶酶活性测定方法及酶活性单位定义 被引量：21

8

作者 王晓丹 郭丽琼 +1 位作者 赵力超 林俊芳 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期128-131,共4页

为统一木聚糖酶酶活性的单位定义及测定方法进行了实验。通过对现有酶活性的单位定义及测定方法的比较分析,得出木聚糖酶的酶活性单位定义为:在特定条件下,每分钟水解木聚糖形成1μmol木糖(还原糖)所需酶量为1个酶活力单位(U),并且采用... 为统一木聚糖酶酶活性的单位定义及测定方法进行了实验。通过对现有酶活性的单位定义及测定方法的比较分析,得出木聚糖酶的酶活性单位定义为:在特定条件下,每分钟水解木聚糖形成1μmol木糖(还原糖)所需酶量为1个酶活力单位(U),并且采用还原糖法中的DNS法作为测定木聚糖酶酶活性的方法,该法具有合理性和科学性,建议以此作为木聚糖酶酶活性测定及酶活性单位定义的统一方法。 展开更多

关键词 木聚糖酶 酶活性测定 酶活性单位定义

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广西北海红树林土壤放线菌的分离与鉴定 被引量：7

9

作者 廖振林 刘菁 +3 位作者 陈建宏 钟毓娟 蒋莲秀 陈森洲 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第23期12693-12694,12702,共3页

[目的]鉴定广西北海红树林土壤放线菌的物种多样性。[方法]从广西北海红树林土壤中分离、筛选10株典型放线菌菌株,提取基因组DNA,进行16SrDNAPCR扩增与测序,并构建进化树。[结果]通过Blast比对,10株放线菌属于2个属,其中8株为链霉菌属(8... [目的]鉴定广西北海红树林土壤放线菌的物种多样性。[方法]从广西北海红树林土壤中分离、筛选10株典型放线菌菌株,提取基因组DNA,进行16SrDNAPCR扩增与测序,并构建进化树。[结果]通过Blast比对,10株放线菌属于2个属,其中8株为链霉菌属(80%),2株为拟诺卡氏菌属(20%)。[结论]广西北海红树林土壤蕴藏着种类丰富的放线菌。 展开更多

关键词 红树林土壤 放线菌 16S RDNA 链霉菌属

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紫杉烯合酶基因遗传转化金针菇的研究 被引量：6

10

作者 康林芝 林俊芳 +2 位作者 黄秀琴 郭丽琼 梁科 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期190-193,共4页

利用紫杉烯合酶基因(ts)和潮霉素抗性基因(hph),采用PEG转化法共转化金针菇的原生质体。研究结果表明,18个拟转化子中有8个转化子同时整合了ts基因和hph基因,两个基因的共转化率为44.44%;RT-PCR鉴定结果表明,7个金针菇转化子实现了外源t... 利用紫杉烯合酶基因(ts)和潮霉素抗性基因(hph),采用PEG转化法共转化金针菇的原生质体。研究结果表明,18个拟转化子中有8个转化子同时整合了ts基因和hph基因,两个基因的共转化率为44.44%;RT-PCR鉴定结果表明,7个金针菇转化子实现了外源ts基因的转录。金针菇转化子在不含潮霉素(HmB)的PDA平板上经5次继代培养后仍检测到有HmB抗性,说明外源基因在金针菇转化子的无性繁殖(即有丝分裂)过程中是稳定的。本研究为通过基因工程手段定向、快速改良金针菇品种以及利用金针菇作为生物反应器生产一些具有重大经济价值的外源基因产物奠定了基础。 展开更多

关键词 金针菇 遗传转化 紫衫烯合酶 紫杉醇前体

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银耳芽孢内源gpd启动子的克隆与功能鉴定 被引量：8

11

作者 聂燕华 林俊芳 +2 位作者 王杰 尤琳烽 郭丽琼 《食用菌学报》 北大核心 2012年第2期1-7,共7页

利用反向长距离PCR技术从银耳(Tremellafuciformis)芽孢gpd基因出发克隆上游gpd启动子序列,将预测的gpd启动子片段与多功能纤维素基因(mfc)连接构建表达载体,与潮霉素抗性质粒pBgGl-hph共转化银耳芽孢,对拟共转化子进行酶活发酵试验。... 利用反向长距离PCR技术从银耳(Tremellafuciformis)芽孢gpd基因出发克隆上游gpd启动子序列,将预测的gpd启动子片段与多功能纤维素基因(mfc)连接构建表达载体,与潮霉素抗性质粒pBgGl-hph共转化银耳芽孢,对拟共转化子进行酶活发酵试验。结果表明:4轮反向长距离PCR克隆得到了1761bp的上游序列,经预测启动子落在上游1000bp左右区域内,包含两个高分值的起始转录位点,将gpd启动子分成gpd-Tre1(885bp)、gpd-Tre2(708bp)、gpd-Tre3(466bp)3段区域,分别与多功能纤维素基因(mfc)构建表达载体pgTre1-mfc、pgTre2-mfc和pgTre3-mfc。拟共转化子酶活发酵试验结果发现3个表达载体的转化子均能检测到多功能纤维素酶活,转化子T1-2包含gpd-Tre1启动子大片段,整体酶活最高,CMC酶活为14.12U/mL,比出发菌株Tr01提高34.3%,比工程菌株yLes3提高25.7%,木聚糖酶活为34.8U/mL,比Tr01酶活提高26.3%,略低于yLes3。3个启动子片段均具有表达活性,相比之下885bp的大片段gpd启动子表达活性更高。 展开更多

关键词 银耳 芽孢 gpd启动子 反向长距离PCR 多功能纤维素酶

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安全选择标记的转基因食用菌研究进展 被引量：15

12

作者 赵姝娴 林俊芳 +1 位作者 王杰 郭丽琼 《食用菌学报》 2007年第1期55-61,共7页

在食用菌外源基因转化过程中,目的基因的导入常需要串联易于识别的选择标记基因,用于转化子的筛选。当筛选完成后,选择标记基因特别是抗性标记基因的存在即是多余的,甚至是有害的,存在生物安全隐患。有鉴于此,本文对获得安全选择标记基... 在食用菌外源基因转化过程中,目的基因的导入常需要串联易于识别的选择标记基因,用于转化子的筛选。当筛选完成后,选择标记基因特别是抗性标记基因的存在即是多余的,甚至是有害的,存在生物安全隐患。有鉴于此,本文对获得安全选择标记基因的转基因食用菌作一综述。 展开更多

关键词 转基因食用菌 选择标记基因 生物安全性

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DBAT酶的同源建模及与多样性底物对接 被引量：4

13

作者 黄佳俊 林淑玲 +5 位作者 欧阳萍兰 魏韬 郑倩望 叶志伟 郭丽琼 林俊芳 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1246-1251,共6页

10-去乙酰巴卡亭Ⅲ乙酰基转移酶(DBAT)是紫杉醇生物合成途径中催化10-去乙酰巴卡亭Ⅲ生成巴卡亭Ⅲ的一个关键酶,由于其催化效率低,使得天然巴卡亭Ⅲ和紫杉醇含量都很低,紫杉醇细胞工厂的构建也受到严重制约。本研究利用MODELLER同源建... 10-去乙酰巴卡亭Ⅲ乙酰基转移酶(DBAT)是紫杉醇生物合成途径中催化10-去乙酰巴卡亭Ⅲ生成巴卡亭Ⅲ的一个关键酶,由于其催化效率低,使得天然巴卡亭Ⅲ和紫杉醇含量都很低,紫杉醇细胞工厂的构建也受到严重制约。本研究利用MODELLER同源建模软件,构建了未报道晶体结构的DBAT三维结构模型,结合分子动力学模拟DBAT在稳定状态前后氨基酸的位置变化,分析关键氨基酸改变对酶催化活性的影响,获得位点His162和Arg365。利用虚拟定点突变和分子对接技术,推断His162为关键活性氨基酸残基,Arg365的空间位阻效应可影响催化反应过程。本研究为后续DBAT催化机理的解析提供潜在靶点,并为DBAT分子设计奠定基础。 展开更多

关键词 紫杉醇 巴卡亭Ⅲ DBAT 同源建模 分子对接 活性口袋

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甘氨酸甜菜碱对植物乳杆菌YSQ18的渗透压胁迫耐受性的影响 被引量：3

14

作者 胡文锋 余世琴 +7 位作者 袁尧 李芬芳 魏鲁宁 刘秉杰 杨益衡 吴惠玲 李铁桥 陈永泉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第23期204-208,共5页

从传统泡菜中分离出一株耐盐的酸菌,对其进行形态学、生理生化特性及16S rRNA序列分析鉴定,确定其种属地位;并初步研究相容性溶质甘氨酸甜菜碱在高渗透压环境下对所筛菌株的生长曲线和发酵糖耗速率的影响。结果表明:筛选出的乳酸菌中有... 从传统泡菜中分离出一株耐盐的酸菌,对其进行形态学、生理生化特性及16S rRNA序列分析鉴定,确定其种属地位;并初步研究相容性溶质甘氨酸甜菜碱在高渗透压环境下对所筛菌株的生长曲线和发酵糖耗速率的影响。结果表明:筛选出的乳酸菌中有一株符合乳杆菌属植物乳杆菌的鉴别特征,与16S rRNA序列鉴定和发育树分析结果一致。在含有1.2mol/L NaCl和1.5mol/L NaCl的化学合成培养基中,该植物乳杆菌的生长受到完全的抑制。在培养基中添加0.80mmol/L的甘氨酸甜菜碱对植物乳杆菌有较明显的保护作用,能减弱高渗胁迫,有效缩短迟滞期,提高耐盐能力。发酵中糖耗速率测定结果表明添加0.80mmol/L的甘氨酸甜菜碱能有效保持细菌活性。因此,在高渗环境发酵过程添加甘氨酸甜菜碱也许能有效提高微生物的活性,如传统的酿制酱油以及腌制泡菜等。 展开更多

关键词 植物乳杆菌 甘氨酸甜菜碱 渗透压胁迫 相容性溶质

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食用菌DNA提取方法研究 被引量：18

15

作者 王艺红 林俊芳 +1 位作者 张炜阳 郭丽琼 《食用菌》 北大核心 2008年第3期18-20,共3页

采用不同的方法,对白灵菇(Pleurotus nebrodensis)和赤芝(Ganoderma lucidum)的总DNA进行提取,通过对不同方法所提取到的总DNA经琼脂糖凝胶电泳和酶切鉴定分析,结果表明:不同菌种的最佳提取方法不同,白灵菇最佳提取方法是CTAB改良法,赤... 采用不同的方法,对白灵菇(Pleurotus nebrodensis)和赤芝(Ganoderma lucidum)的总DNA进行提取,通过对不同方法所提取到的总DNA经琼脂糖凝胶电泳和酶切鉴定分析,结果表明:不同菌种的最佳提取方法不同,白灵菇最佳提取方法是CTAB改良法,赤芝的最佳提取方法是FDEB法。 展开更多

关键词 白灵菇 赤芝 DNA提取

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简便高质量的食用菌总RNA提取方法 被引量：12

16

作者 税丕容 郑晓冰 +1 位作者 林俊芳 郭丽琼 《食用菌学报》 2008年第1期32-41,共10页

STE法是针对食用菌多糖含量高而设计的一种提取食用菌总RNA的有效方法。本研究以灵芝、香菇和白腐真菌TR16菌株的菌丝体为材料,采用STE法提取其总RNA,同时以Trizol法作对照。结果表明:采用STE法提取的三种菌丝的总RNAA260/A280比值在1.8... STE法是针对食用菌多糖含量高而设计的一种提取食用菌总RNA的有效方法。本研究以灵芝、香菇和白腐真菌TR16菌株的菌丝体为材料,采用STE法提取其总RNA,同时以Trizol法作对照。结果表明:采用STE法提取的三种菌丝的总RNAA260/A280比值在1.80～2.10范围内,A260/A230略大于2.00;而Trizol法提取的总RNAA260/A280比值小于1.80,A260/A230小于1.90,明显比STE法效果差;总RNA电泳检测表明:STE法的3条带(28SrRNA、18SrRNA和5SrRNA)清晰,无拖尾,无杂带,效果比Trizol法好;将STE法提取的总RNA进行反转录后合成双链cDNA,进行预扩增,电泳显示呈弥散状;再进行选择性扩增,有相同或相异的条带。进一步表明STE法提取的总RNA质量较高,可以满足后续分子生物学研究的要求。 展开更多

关键词 食用菌 总RNA STE法

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猴头菌固体发酵基质的抗氧化活性成分研究 被引量：3

17

作者 张新超 郭丽琼 +1 位作者 林俊芳 雷韵祺 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2011年第4期43-47,共5页

选用燕麦、大豆、玉米、麸皮、大米、荞麦6种培养基质,对猴头菌进行固体发酵及抗氧化活性研究。结果表明:猴头菌最佳抗氧化发酵基质为荞麦大豆培养基(荞麦79.13%,大豆20.87%),最佳发酵条件为温度30℃,培养料粒度40目,培养基含水量70%,初... 选用燕麦、大豆、玉米、麸皮、大米、荞麦6种培养基质,对猴头菌进行固体发酵及抗氧化活性研究。结果表明:猴头菌最佳抗氧化发酵基质为荞麦大豆培养基(荞麦79.13%,大豆20.87%),最佳发酵条件为温度30℃,培养料粒度40目,培养基含水量70%,初始pH值4,接种量4.5%,发酵时间12d。猴头菌荞麦发酵基质抗氧化活性成分种类丰富,含量高,其中总黄酮物质87.13μg/g,总三萜2.58mg/g,多酚4.51mg/g,还原糖21.53mg/g,花色苷68.96μg/g,VC14.07mg/g,VE205.85μg/g,GSH 853.65mg/g,SOD酶活性293.57U/g。 展开更多

关键词 猴头菌 固体发酵 发酵基质 抗氧化成分

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果冻中芽孢杆菌灭菌条件的优化 被引量：3

18

作者 莫美华 王开坤 彭志光 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期119-121,共3页

芽孢杆菌的污染是造成食品腐败变质的一个很重要的原因。在提倡食品中无防腐剂的今天,寻找有效的杀灭芽孢杆菌的措施显得非常重要。本文选择水浴灭菌温度、水浴灭菌时间、微波时间、乳酸链球菌素用量作为参试因子,应用均匀设计的方法对... 芽孢杆菌的污染是造成食品腐败变质的一个很重要的原因。在提倡食品中无防腐剂的今天,寻找有效的杀灭芽孢杆菌的措施显得非常重要。本文选择水浴灭菌温度、水浴灭菌时间、微波时间、乳酸链球菌素用量作为参试因子,应用均匀设计的方法对灭菌工艺进行了优化。结果表明,筛选的最佳灭菌条件为水浴温度80℃、水浴时间18min、微波时间30s、乳酸链球菌素用量0.16g/kg。对加有106～107cfu/mL的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)的样品,运用该灭菌工艺处理,在37℃条件下培养,样品三个月没出现芽孢杆菌的生长。 展开更多

关键词 果冻 乳酸链球菌素 均匀设计

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草菇高产新菌种的选育 被引量：2

19

作者 赵风云 林俊芳 +3 位作者 叶泽波 王艺红 杨博 郭丽琼 《食用菌学报》 北大核心 2009年第4期23-26,共4页

草菇V23原生质体再生菌丝经过0℃低温胁迫处理108 h后,筛选出菌丝较耐低温的菌株V23a,获得V23a的孢子分离菌株（Spore Isolation Strains,SIS）,经栽培后,筛选生物学效率高的菌株进行组织分离,获得组织分离菌株（Tissue Isolation Strai... 草菇V23原生质体再生菌丝经过0℃低温胁迫处理108 h后,筛选出菌丝较耐低温的菌株V23a,获得V23a的孢子分离菌株（Spore Isolation Strains,SIS）,经栽培后,筛选生物学效率高的菌株进行组织分离,获得组织分离菌株（Tissue Isolation Strains,TIS）,选出其中生物学效率最高的Va2作为草菇高产新菌种,其生物学效率比对照V23高14.27%。选育过程中分析了SIS菌株的气生菌丝密度、厚垣孢子数量和出菇率,比较了SIS和TIS菌株的菌丝生长速度、原基数、生产周期、单菇平均质量和生物学效率等主要性状。结果表明,可出菇的SIS菌株其子实体产量差异较大,但均低于对照菌株V23。TIS菌株的产量比SIS的提高了0-87.18%。 展开更多

关键词 草菇 孢子分离 组织分离 生物学效率

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草菇gpd启动子的克隆及表达载体的构建 被引量：2

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作者 王杰 林俊芳 郭丽琼 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第34期16778-16780,共3页

[目的]从草菇基因组中克隆内源强启动子,为草菇基因工程育种提供启动子元件材料。[方法]采用PCR技术从草菇基因组DNA中克隆gpd启动子片段,利用生物信息学手段对其序列特征和调控元件进行分析,并构建表达载体。[结果]从草菇基因组中克隆... [目的]从草菇基因组中克隆内源强启动子,为草菇基因工程育种提供启动子元件材料。[方法]采用PCR技术从草菇基因组DNA中克隆gpd启动子片段,利用生物信息学手段对其序列特征和调控元件进行分析,并构建表达载体。[结果]从草菇基因组中克隆出2条特异gpd启动子片段,大小分别为1056和614bp;成功构建了分别以这2条启动子片段驱动的、以gfp基因为报告基因的2个表达载体。[结论]该研究为进一步利用基因工程手段培育品质优良的草菇新菌株奠定了基础。 展开更多

关键词 草菇 gpd启动子 克隆 表达载体 构建

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