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香蕉枯萎病菌2个生理小种PL基因真核表达载体的构建与表达
1
作者
董章勇
秦世雯
王振中
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2012年第4期102-106,共5页
【目的】构建香蕉枯萎病菌1号小种(FOC1)和4号小种(FOC4)果胶裂解酶(Pectate lyases,PL)基因的真核表达载体,并进行诱导表达,为进一步研究PL在病原菌致病过程中的作用奠定基础。【方法】将质粒pMD18-pl-foc1、pMD18-pl-foc4和真核表达...
【目的】构建香蕉枯萎病菌1号小种(FOC1)和4号小种(FOC4)果胶裂解酶(Pectate lyases,PL)基因的真核表达载体,并进行诱导表达,为进一步研究PL在病原菌致病过程中的作用奠定基础。【方法】将质粒pMD18-pl-foc1、pMD18-pl-foc4和真核表达穿梭载体pPICZαA进行EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切反应,回收目的片段连接,转化至DH5α进行筛选扩繁,对菌落进行PCR鉴定后抽提质粒进行PCR和EcoRⅠ、XbaⅠ双酶切鉴定。将阳性载体线性化后电击转化毕赤酵母SMD1168感受态细胞,用甲醇进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析。【结果】成功构建了FOC1和FOC4 PL基因的真核表达载体pPICZαA-pl-foc1和pPICZαA-pl-foc4,经甲醇诱导表达后分别获得了重组的PL蛋白,其分子质量约为23.4ku。【结论】FOC1和FOC4 2个香蕉枯萎病菌小种的PL基因在酵母中得到了成功表达。
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关键词
香蕉枯萎病
香蕉枯萎病菌
果胶裂解酶
载体构建
真核表达
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题名
香蕉枯萎病菌2个生理小种PL基因真核表达载体的构建与表达
1
作者
董章勇
秦世雯
王振中
机构
仲恺
农业
工程
学院
植物
保护系
华南农业大学资源环境学院植物病理生理学研究室
出处
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2012年第4期102-106,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30671349)
国家自然科学基金-广东联合基金项目(u0771001)
公益性行业(农业)科研专项(200903049-05)
文摘
【目的】构建香蕉枯萎病菌1号小种(FOC1)和4号小种(FOC4)果胶裂解酶(Pectate lyases,PL)基因的真核表达载体,并进行诱导表达,为进一步研究PL在病原菌致病过程中的作用奠定基础。【方法】将质粒pMD18-pl-foc1、pMD18-pl-foc4和真核表达穿梭载体pPICZαA进行EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切反应,回收目的片段连接,转化至DH5α进行筛选扩繁,对菌落进行PCR鉴定后抽提质粒进行PCR和EcoRⅠ、XbaⅠ双酶切鉴定。将阳性载体线性化后电击转化毕赤酵母SMD1168感受态细胞,用甲醇进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析。【结果】成功构建了FOC1和FOC4 PL基因的真核表达载体pPICZαA-pl-foc1和pPICZαA-pl-foc4,经甲醇诱导表达后分别获得了重组的PL蛋白,其分子质量约为23.4ku。【结论】FOC1和FOC4 2个香蕉枯萎病菌小种的PL基因在酵母中得到了成功表达。
关键词
香蕉枯萎病
香蕉枯萎病菌
果胶裂解酶
载体构建
真核表达
Keywords
Fusarium wilt of banana； Fusarium oxysporum f.sp.cubense； pectate lyase； construction of expression vector； eukaryotic expression；
分类号
S432.4 [农业科学—植物病理学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
香蕉枯萎病菌2个生理小种PL基因真核表达载体的构建与表达
董章勇
秦世雯
王振中
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2012
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