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家蚕蛹变态期丝腺组织的退化与细胞凋亡特征 被引量:10
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作者 钟仰进 曾林 +5 位作者 黄志君 刘吉平 邓小娟 杨婉莹 曹阳 顾世红 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期319-324,共6页
利用形态学观察方法、分子生物学检测方法以及20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone)和放线菌酮(cycloheximide)体外培养方法,研究了家蚕Bombyxmori蛹变态期丝腺组织的退化与细胞凋亡特征。显微镜的观察显示家蚕丝腺的逐渐退化发生在吐丝... 利用形态学观察方法、分子生物学检测方法以及20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone)和放线菌酮(cycloheximide)体外培养方法,研究了家蚕Bombyxmori蛹变态期丝腺组织的退化与细胞凋亡特征。显微镜的观察显示家蚕丝腺的逐渐退化发生在吐丝期间。DNA梯度电泳的分析表明程序性细胞死亡(programmedcelldeath)可能伴随发生在丝腺的退化过程中。在离体培养条件下,用20_羟基蜕皮酮处理5龄第6天幼虫的丝腺,导致的细胞凋亡提前于对照,提示在进入蛹变态期前,20-羟基蜕皮酮提早激发了介导家蚕丝腺细胞凋亡与水解机制的遗传调控级联系统。上述结果表明,20-羟基蜕皮酮能够诱导家蚕丝腺组织在蛹变态期发生程序性细胞死亡。 展开更多
关键词 家蚕 变态 细胞凋亡 程序性细胞死亡 20-羟基蜕皮酮
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昆虫抗菌肽和抗真菌肽结构与功能的关系及分子设计 被引量:13
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作者 肖业臣 温硕洋 +2 位作者 黄亚东 杨婉莹 曹阳 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期659-669,共11页
在对GenBank和EMBL数据库中登录的昆虫抗微生物肽 (antimicrobialpeptide,AMP) ,即昆虫抗菌肽 (antibacterialpeptide)和抗真菌肽 (antifungalpeptide ,AFP)进行归类整理的基础上 ,对天蚕素族 (cecropins)抗菌肽结构与功能的关系及人工... 在对GenBank和EMBL数据库中登录的昆虫抗微生物肽 (antimicrobialpeptide,AMP) ,即昆虫抗菌肽 (antibacterialpeptide)和抗真菌肽 (antifungalpeptide ,AFP)进行归类整理的基础上 ,对天蚕素族 (cecropins)抗菌肽结构与功能的关系及人工改造的分子设计策略 ,特别是对目前新发现的一些昆虫抗真菌肽的已知结构与功能关系的研究进展、存在问题等进行了简要介绍和分析 ,为从事昆虫抗微生物肽的理论研究和发展新型抗生素药物提供了必要的信息。 展开更多
关键词 昆虫 抗菌肽 抗真菌肽 分子设计
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模拟感染家蚕微粒子病的蚕卵、蚕蛾PCR检测的初步研究 被引量:5
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作者 刘吉平 曹阳 +1 位作者 Smith J E 徐兴耀 《蚕业科学》 CAS CSCD 2004年第4期367-370,共4页
在比较研究不同浓度家蚕微孢子虫 (Nosemabombycis,N .b)孢子与模拟染毒N .b孢子蚕卵、蚕蛾的模板DNA制备方法的基础上 ,选用MP1/MP2和V1F/ 5 30R两对引物进行PCR扩增检测。结果为 :碱性条件预处理N .b孢子后再抽提的DNA ,其得率略高于... 在比较研究不同浓度家蚕微孢子虫 (Nosemabombycis,N .b)孢子与模拟染毒N .b孢子蚕卵、蚕蛾的模板DNA制备方法的基础上 ,选用MP1/MP2和V1F/ 5 30R两对引物进行PCR扩增检测。结果为 :碱性条件预处理N .b孢子后再抽提的DNA ,其得率略高于常规方法抽提的DNA ,但两者的模板质量相同 ;MP1/MP2和V1F/ 5 30R两对引物均可有效地检出N .b孢子DNA ,前者的检测灵敏度为 1μL 3× 10 6mL-1以上浓度的N .b孢子DNA ,后者为 1μL 3× 10 5mL-1以上浓度 ;对不同浓度N .b孢子DNA与蚕蛾DNA混合后进行PCR检测 ,V1F/ 5 30R引物的检测灵敏度为1μL 3× 10 6mL-1N .b孢子DNA。 展开更多
关键词 家蚕 微粒子病 PCR诊断 模拟感染 微孢子浓度
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昆虫抗真菌肽研究的科学意义及其应用前景
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作者 杨婉莹 张倩 +2 位作者 黄亚东 温硕洋 曹阳 《广东蚕业》 2001年第4期45-47,共3页
昆虫抗真菌肽是近年来刚刚起步的一个新的研究方向,国外目前已发现6种昆虫抗真菌肽因子。国内华南农业大学蚕学分子生物学与生物技术实验室课题组在此方向也取得一些重要进展,初步发现13种昆虫可能含有新的昆虫抗真菌肽基因。对昆虫抗... 昆虫抗真菌肽是近年来刚刚起步的一个新的研究方向,国外目前已发现6种昆虫抗真菌肽因子。国内华南农业大学蚕学分子生物学与生物技术实验室课题组在此方向也取得一些重要进展,初步发现13种昆虫可能含有新的昆虫抗真菌肽基因。对昆虫抗真菌肽及其基因的研究,将大大拓宽昆虫抗菌肽的生物技术应用前景。 展开更多
关键词 科学意义 应用前景 昆虫抗真菌肽 昆虫抗菌肽
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果蝇蜕皮激素诱导程序性细胞死亡的遗传调控因子 被引量:7
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作者 李庆荣 邓小娟 +4 位作者 杨婉莹 黄志君 钟仰进 曹阳 夏庆友 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期118-125,共8页
近年来关于果蝇程序性细胞死亡(programmedcelldeath,PCD)的研究结果表明,在果蝇的变态发育过程中,蜕皮激素与受体结合后诱导转录因子的表达。这些转录因子作为程序性细胞死亡调控网络中的初、次级应答信号,激活凋亡诱导因子Reaper、Hid... 近年来关于果蝇程序性细胞死亡(programmedcelldeath,PCD)的研究结果表明,在果蝇的变态发育过程中,蜕皮激素与受体结合后诱导转录因子的表达。这些转录因子作为程序性细胞死亡调控网络中的初、次级应答信号,激活凋亡诱导因子Reaper、Hid和Grim的表达。Reaper、Hid和Grim进而阻止凋亡蛋白抑制因子的活性,从而启动半胱氨酸蛋白酶caspase途径,引起细胞凋亡(apoptosis)。该文综述了蜕皮激素诱导的果蝇程序性细胞死亡中各遗传调控因子之间的关系。 展开更多
关键词 果蝇 蜕皮激素 蜕皮酮 程序性细胞死亡 细胞凋亡 遗传调控因子
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昆虫抗真菌肽Thanatin-CAD双价基因的合成、克隆及其表达 被引量:8
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作者 黄亚东 曾锦绣 +4 位作者 温硕洋 王艳 李校坤 钟仰进 曹阳 《蚕业科学》 CAS CSCD 2003年第2期162-166,共5页
为促进昆虫抗菌肽基因在转基因抗病育种和生物工程制药的应用,通过设计嵌合引物结合分段PCR的方法将抗真菌肽Thanatin基因与Cecropin AD基因(CAD基因)融合拼接为Thanatin-CAD双价基因,采用T-A克隆法将其克隆至pGEM-T Easy载体,进行测序... 为促进昆虫抗菌肽基因在转基因抗病育种和生物工程制药的应用,通过设计嵌合引物结合分段PCR的方法将抗真菌肽Thanatin基因与Cecropin AD基因(CAD基因)融合拼接为Thanatin-CAD双价基因,采用T-A克隆法将其克隆至pGEM-T Easy载体,进行测序,结果证实与预期设计的完全一致;然后再将其亚克隆至表达载体pET-21d中,用IPTG诱导含重组表达质粒的菌株,对表达产物进行生物活性测定,初步结果显示Thanatin-CAD双价基因的融合表达产物对受试细菌无抑菌活性,但对部分病原真菌有较强的抑菌作用。 展开更多
关键词 昆虫抗真菌肽 Thanatin-CAD双价基因 基因合成 基因克隆 融合基因 基因表达 病原真菌 抑菌作用
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昆虫抗真菌肽Thanatin基因的合成及原核表达 被引量:6
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作者 黄亚东 王艳 +4 位作者 温硕洋 曾锦绣 曹阳 李校坤 钟仰进 《蚕业科学》 CAS CSCD 2002年第2期104-108,共5页
斑腹刺益蝽 (Podisusmaculiventris)抗真菌肽Thanatin是目前发现的 6种昆虫抗真菌肽之一 ,对真菌具有广谱的免疫诱导杀菌活性 ,由 2 1个氨基酸残基组成 ,对革兰氏阳性和阴性细菌也有一定的杀菌作用。根据已报道的抗真菌肽Thanatin基因... 斑腹刺益蝽 (Podisusmaculiventris)抗真菌肽Thanatin是目前发现的 6种昆虫抗真菌肽之一 ,对真菌具有广谱的免疫诱导杀菌活性 ,由 2 1个氨基酸残基组成 ,对革兰氏阳性和阴性细菌也有一定的杀菌作用。根据已报道的抗真菌肽Thanatin基因的氨基酸序列 ,推导出cDNA序列 ,采用基因片段合成结合PCR扩增的策略 ,获得大量完整的Thanatin基因片段 ,通过T A克隆法克隆至pGEM TEasy载体 ,进行测序 ,结果证实合成的Thanatin基因与预期设计的完全一致。然后将其亚克隆至表达载体pET 2 1d中。经IPTG诱导表达后 ,采用RNA DNA点杂交和RT PCR检测具Thanatin基因插段的RNA转录表达活性 ,初步结果显示该融合表达产物对烟曲霉菌 (Aspergillusfumigatus)和绿色木霉菌 (Trichodermariricle) 展开更多
关键词 昆虫抗真菌肽 Tanatin基因 基因表达 斑腹刺益蝽 抑杀作用
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果蝇Drosomycin基因(drs)的克隆鉴定 被引量:2
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作者 钟仰进 肖业臣 +6 位作者 魏剑波 温硕洋 黄亚东 邓小娟 桑延霞 段云 曹阳 《蚕业科学》 CAS CSCD 2004年第1期85-89,共5页
为了克隆Drosomycin基因用于今后定点诱变修饰和生物技术开发研究 ,根据果蝇Drosomycin基因 (drs)的cDNA序列 ,分别设计Drosomycin基因含和不含信号肽序列的两对特异引物Drs1/Drs2、Dro3/Dro4 ,由黑腹果蝇(DrosophilamelanogasterMeigen... 为了克隆Drosomycin基因用于今后定点诱变修饰和生物技术开发研究 ,根据果蝇Drosomycin基因 (drs)的cDNA序列 ,分别设计Drosomycin基因含和不含信号肽序列的两对特异引物Drs1/Drs2、Dro3/Dro4 ,由黑腹果蝇(DrosophilamelanogasterMeigen)基因组PCR扩增获得目的片段drs和dro ,克隆到表达载体pET 2 1d(+)和pHIL S1之中。经测序表明 ,克隆的drs与文献报道的drs序列仅在 +116位点有 1个碱基的差异 (A/T) ,而克隆的dro序列则与文献报道的dro序列完全相同。 展开更多
关键词 果蝇 Drosomycin基因 昆虫抗真菌肽 信号肽 克隆
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