期刊文献+
共找到2篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
食品级重组乳酸乳球菌强组成型分泌猪肠道益生的pEGF-p40
1
作者 何容肖 吴杨博 +10 位作者 张淑霞 赵锃珏 黄娟 潘伟雄 任芷欣 黄浩滨 吴佳辉 吴海阳 沈世彦 孙崇军 张玲华 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第5期2243-2258,共16页
猪表皮生长因子(pEGF)与三叶因子协同给药已被证明能有效促进猪的肠道增殖与修复。本研究旨在构建食品级重组乳酸乳球菌强组成型表达系统并将其用于融合表达pEGF以及对猪肠道有益生作用的鼠李糖乳杆菌衍生蛋白p40,以克服目前乳酸乳球菌... 猪表皮生长因子(pEGF)与三叶因子协同给药已被证明能有效促进猪的肠道增殖与修复。本研究旨在构建食品级重组乳酸乳球菌强组成型表达系统并将其用于融合表达pEGF以及对猪肠道有益生作用的鼠李糖乳杆菌衍生蛋白p40,以克服目前乳酸乳球菌重组表达中组成型表达量低的现状以及避免抗生素使用的问题,并初步探索一种更强效的猪肠道益生制剂。首先,通过金黄色葡萄球菌核酸酶报告系统,以常用乳酸乳球菌组成型启动子P32为对照,从乳酸乳球菌NZ9000组成型高表达蛋白质的启动子以及前人研究发现的乳酸乳球菌强组成型启动子中,可视化地筛选出乳酸乳球菌NZ9000的伸长因子Tu的启动子(P1)活性最强。进一步地,将pNZ8148的氯霉素抗性基因替换为乳链菌肽抗性基因,成功构建了具有良好的乳链菌肽耐受性且完全失去氯霉素抗性的食品级重组乳酸乳球菌强组成型表达系统NZ9000/pP1NR。同时,本研究利用该系统成功表达pEGF和融合蛋白pEGF-p40。细胞增殖试验结果显示,含有pEGF-p40的菌株培养上清更有效地促进猪小肠上皮细胞IPEC-J2的增殖。通过qRT-PCR检测了刺激后IPEC-J2细胞的SGLT-1、GLUT-2、SUC、EGFR和GLP2R,结果显示含有pEGF-p40的培养上清调节相关基因的表达情况不同于仅含有pEGF的培养上清。本研究构建了食品级重组乳酸乳球菌强组成型表达系统,成功表达了对猪肠道具有益生作用的pEGF-p40,为其他益生物质的安全生产提供借鉴,为开发一种强效的猪肠道益生制剂做了先行探究。 展开更多
关键词 乳酸乳球菌 组成型表达 pEGF P40 肠道健康
在线阅读 下载PDF
诱导型表达H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白的乳酸乳球菌的构建及其对鸭的免疫原性分析
2
作者 吴佳辉 沈世彦 +10 位作者 邓锦波 吴海阳 任芷欣 吴杨博 黄娟 黄浩滨 潘伟雄 赵锃珏 何容肖 孙崇军 张玲华 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期774-787,共14页
禽流感是由禽流感病毒引起的高度传染性疾病,受到感染的雏禽死亡率高,给家禽健康和经济带来严重影响。尽管传统疫苗可以有效预防禽流感,但由于鸭类养殖方式多为散户散养,环境多变,在接种传统疫苗时存在操作繁琐和免疫应激强等问题。为... 禽流感是由禽流感病毒引起的高度传染性疾病,受到感染的雏禽死亡率高,给家禽健康和经济带来严重影响。尽管传统疫苗可以有效预防禽流感,但由于鸭类养殖方式多为散户散养,环境多变,在接种传统疫苗时存在操作繁琐和免疫应激强等问题。为了解决此难题,本研究旨在开发一种便捷且安全的雏鸭血凝素(hemagglutinin,HA)口服生物制剂。我们通过构建系列锚定序列(pgsA、BmpA、cA和M6)-GFP报告表达系统,可视化地评估了不同类型锚定序列对乳酸菌乳球表面展示系统的效果,成功筛选出BmpA和cA作为乳酸菌乳球中的高效锚定序列。比较优化密码子前后的HA在乳酸乳球菌的表达效果后,选取优化密码子的HA基因序列与BmpA、cA连接,构建乳酸菌表达质粒。然后把构建好的表达质粒转入基因组整合HA 1基因的乳酸乳球菌中,从而得到诱导型分泌联合表面展示HA蛋白的重组乳酸乳球菌(NZB-HA1-pNZ8148-BmpA-HA1和NZB-HA1-pNZ8148-HA1-cA)。ELISA检测结果表明,与口服单一表达型的重组乳酸乳球菌相比,口服诱导型分泌-表面展示乳酸乳球菌能诱生雏鸭血清中更佳的HA特异性IgG水平。本研究成功构建了锚定序列-GFP乳酸菌筛选系统,利用其筛选出了适合乳酸乳球菌的高效锚定序列。并将HA蛋白通过分泌联合表面展示的方式在乳酸乳球菌进行复合表达,成功获得了对雏鸭具有良好HA免疫原性的口服生物制剂,为后续开发操作简便、安全的鸭禽流感口服疫苗提供可行的实践路径。 展开更多
关键词 锚定序列 乳酸乳球菌 禽流感 雏鸭 HA
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部