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白纹伊蚊四氟甲醚菊酯抗性品系室内筛选及抗性遗传分析
1
作者 马露露 江定心 《华中农业大学学报》 北大核心 2025年第4期174-180,共7页
为明确四氟甲醚菊酯抗性白纹伊蚊(Aedes albopictus)品系的抗药性水平,选择四氟甲醚菊酯抗性品系,进行杂交和回交试验,确定四氟甲醚菊酯抗性白纹伊蚊种群的显性度(D)、细胞质影响因子和遗传基因。结果显示,FRS种群的抗性基因频率与抗性... 为明确四氟甲醚菊酯抗性白纹伊蚊(Aedes albopictus)品系的抗药性水平,选择四氟甲醚菊酯抗性品系,进行杂交和回交试验,确定四氟甲醚菊酯抗性白纹伊蚊种群的显性度(D)、细胞质影响因子和遗传基因。结果显示,FRS种群的抗性基因频率与抗性品系白纹伊蚊接近、FSR种群的敏感性强;FRS种群和FSR种群之间不交叠,分属2个不同的区间,2个杂交种群之间差异显著;4组回交后代BC1(FSR♀×SS♂)、BC2(FRS♀×SS♂)、BC3(FSR♀×RR♂)以及BC4(FRS♀×RR♂)的实际与期望剂量对数-死亡率(LD-P)曲线之间有差别,实际卡方值(χ^(2))明显大于期望卡方值。研究结果表明,白纹伊蚊对四氟甲醚菊酯的抗性遗传为多基因控制的母系遗传,这种遗传方式将使白纹伊蚊抗性种群迅速发展。在使用四氟甲醚菊酯防治白纹伊蚊时,为达到好的杀虫效果,且尽量避免害虫产生抗药性,就需要注意可能会带来不利影响的多个因素,如用药剂量、杀虫剂使用方法以及用药周期等,不同蚊虫对不同药剂产生的抗药性的遗传方式可能不同,因此在研制药剂以及用药时也要注意。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 四氟甲醚菊酯 抗性筛选 抗药性遗传 母系效应 抗性机制
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AMPKα基因介导白纹伊蚊对四氟甲醚菊酯抗药性
2
作者 吕海燕 江定心 《南方农业学报》 北大核心 2025年第3期853-861,共9页
[目的]探究白纹伊蚊(Aedes albopictus)腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)基因(AalAMPKα)与四氟甲醚菊酯的抗药性关系,揭示白纹伊蚊对四氟甲醚菊酯的抗性形成机制,为白纹伊蚊的综合治理提供理论基础。[方法]克隆AalAMPKα基因编码区(CDS)序列,... [目的]探究白纹伊蚊(Aedes albopictus)腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)基因(AalAMPKα)与四氟甲醚菊酯的抗药性关系,揭示白纹伊蚊对四氟甲醚菊酯的抗性形成机制,为白纹伊蚊的综合治理提供理论基础。[方法]克隆AalAMPKα基因编码区(CDS)序列,通过Protparam、SMART、SWISS-MODEL和GSD_v2.0等在线软件进行生物信息学分析;使用实时荧光定量PCR技术检测AalAMPKα基因在白纹伊蚊不同组织和不同发育时期的表达情况;采用微量点滴法测定白纹伊蚊对四氟甲醚菊酯的抗药性;使用RNA干扰技术探究AalAMPKα基因在白纹伊蚊抗药性中的功能。[结果]AalAMPKα基因全长1653 bp,编码545个氨基酸,蛋白质的相对分子量为61.63 kD,理论等电点(pI)为8.03,为不稳定的亲水性蛋白;序列分析结果显示,AalAMPKα基因编码的氨基酸序列与其他物种相似,有着高度保守的结构域;AalAMPKα基因编码的氨基酸序列与埃及伊蚊(Aedes aegypti)AMPKα基因编码的氨基酸序列的相似性最高,与其他双翅目昆虫之间有着较近的亲缘关系;基因组结构分析显示,AMPKα基因在不同物种中的基因组结构差异较大,表现出物种特异性。AalAMPKα基因在白纹伊蚊的不同组织和不同发育时期均有不同程度的表达,其中在脂肪体和1日雄蚊中表达量最高。白纹伊蚊抗性品系AalAMPKα基因的表达量是敏感品系的3.98倍。四氟甲醚菊酯对白纹伊蚊敏感品系和抗性品系的半致死剂量(LD_(50))分别为0.354和8.010 ng/头,抗性品系的抗性倍数为22.63,为高水平抗性;对白纹伊蚊抗性品系雌蚊显微注射双链核糖核酸(dsRNA)沉默AalAMPKα基因24 h后,注射dsGFP的对照组LD_(50)为7.876 ng/头,注射dsAalAMPKα组的LD_(50)为2.631 ng/头,沉默AalAMPKα基因后抗性倍数从22.25下降到7.43,抗药性极显著减弱(P<0.001)。[结论]AalAMPKα基因可介导白纹伊蚊对四氟甲醚菊酯的抗药性。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 腺苷酸活化蛋白激酶基因 四氟甲醚菊酯 抗药性 RNA干扰
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荷包牡丹碱对家蝇GABA受体作用机理探究
3
作者 刘夏娜 江定心 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期542-549,共8页
[目的]探究荷包牡丹碱对杀虫剂重要靶标GABA受体抑制机理。[方法]基于家蝇Musca domestica GABA受体亚基基因MdRdl在第3外显子(a或b)和第6外显子(c或d)交替拼接产生ac、ad、bc和bd剪接体,采用双电极电压钳技术研究荷包牡丹碱对MdRdl 4... [目的]探究荷包牡丹碱对杀虫剂重要靶标GABA受体抑制机理。[方法]基于家蝇Musca domestica GABA受体亚基基因MdRdl在第3外显子(a或b)和第6外显子(c或d)交替拼接产生ac、ad、bc和bd剪接体,采用双电极电压钳技术研究荷包牡丹碱对MdRdl 4个剪接体离子电流的抑制效果,鉴定其敏感性是否与外显子交替拼接有关。并采用分子对接技术分析荷包牡丹碱与家蝇GABA受体的可能结合位点。同时,采用共刺激法验证荷包牡丹碱和GABA受体变构抑制剂溴虫氟苯双酰胺是否存在互作效应。[结果]荷包牡丹碱对MdRdlac、MdRdlbc、MdRdlad和MdRdlbd4个剪接体的IC50分别为1.274、0.948、4.702和3.698 mmol/L;对I274F突变体的IC50分别为15.46、21.67、42.83和52.33 mmol/L;与野生型剪接体相比,4个突变体IC50分别增大约11、22、8和13倍。荷包牡丹碱和溴虫氟苯双酰胺与GABA受体外显子6编码的氨基酸残基存在互作效应。[结论]第274位异亮氨酸残基为荷包牡丹碱与家蝇GABA受体互作的关键靶点,且与外显子6编码的氨基酸残基一起,具有开发协同增效作用的昆虫GABA受体别构抑制剂的潜力。 展开更多
关键词 荷包牡丹碱 Γ-氨基丁酸受体 协同增效 分子对接
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