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根癌农杆菌介导CYP1A1转化菠萝的研究 被引量:3
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作者 何业华 吴会桃 +5 位作者 罗吉 方少秋 马均 卢敏 彭兵 伍成厚 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期34-38,共5页
将菠萝(Ananas comosus)愈伤组织经含有植物表达重组质粒(pUHA1-CYP1A1)的根癌农杆菌(LBA4404菌株)侵染后,在MS+3.0mg/LBA+2.0mg/LNAA+100μmol/LAS+8g/Lagar上共培养3d,转入选择培养基(MS+3.0mg/LBA+2.0mg/LNAA+20mg/LKm+400mg/LCarb+8... 将菠萝(Ananas comosus)愈伤组织经含有植物表达重组质粒(pUHA1-CYP1A1)的根癌农杆菌(LBA4404菌株)侵染后,在MS+3.0mg/LBA+2.0mg/LNAA+100μmol/LAS+8g/Lagar上共培养3d,转入选择培养基(MS+3.0mg/LBA+2.0mg/LNAA+20mg/LKm+400mg/LCarb+8g/Lagar)上培养约10d后开始分化出不定芽;28d后将绿色的抗Km不定芽转入MS+2.0mg/LNAA+30mg/LKm+300mg/LCarb+8g/Lagar上再进行连续2轮选择,随后将绿芽转入MS+1.0mg/LIBA+30mg/LKm+8g/Lagar上生根,共获得95株Km抗性植株,转化率0.12%~2.69%.对其中部分的抗Km植株进行PCR检测,PCR阳性植株率达64.29%.经Southern杂交进一步证实,CYP1A1已整合到菠萝基因中.以琼脂为培养基凝固剂、共培养基中添加AS、增加选择次数和逐渐增加新一轮选择培养基中的Km质量浓度等是根癌农杆菌介导菠萝愈伤组织获得转基因植株的重要条件. 展开更多
关键词 菠萝 CYP1A1 遗传转化 根癌农杆菌
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根癌农杆菌介导反义ACC合成酶基因对枣树的转化 被引量:18
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作者 何业华 熊兴华 +4 位作者 林顺权 吴会桃 林良斌 何钢 陈建华 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期33-36,共4页
以枣树鲜食品种鸡蛋枣为材料,通过根癌农杆菌介导ACC合成酶反义基因转化,得到了转基因植株.预培养1d的枣树幼嫩茎段经根癌农杆菌感染后共培养3d,转移至分化选择培养基MS(1/2NO3)+0.15mg/LNAA+1.75mg/LZT+10mg/LKm+500mg/LCarb上诱导产... 以枣树鲜食品种鸡蛋枣为材料,通过根癌农杆菌介导ACC合成酶反义基因转化,得到了转基因植株.预培养1d的枣树幼嫩茎段经根癌农杆菌感染后共培养3d,转移至分化选择培养基MS(1/2NO3)+0.15mg/LNAA+1.75mg/LZT+10mg/LKm+500mg/LCarb上诱导产生不定芽,将抗Km不定芽先后在15mg/LKm的生长、增殖和生根培养基上继续选择,诱导成完整植株.经PCR检测从抗Km植株中选择到7株阳性植株,进一步经Southern杂交证实有6株外源基因已整合到了枣树基因组中.Real timePCR定量检测表明,ACC合成酶反义基因在5株转基因植株中得到表达. 展开更多
关键词 枣树 ACC合成酶反义基因 转化
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枣树人工种子的研制 被引量:5
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作者 胡芳名 何业华 胡中沂 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期181-184,共4页
Adventitious buds produced from the callus of Ziziphus jujube by tissue culture, encapsulated with 4 sodium alginate (basic MS+0.1 mg·L+{-1} ZT+0.5 mg·L+{-1} IBA) and solidified for 10 minutes with 2 calcium... Adventitious buds produced from the callus of Ziziphus jujube by tissue culture, encapsulated with 4 sodium alginate (basic MS+0.1 mg·L+{-1} ZT+0.5 mg·L+{-1} IBA) and solidified for 10 minutes with 2 calcium chloride, were considered as the artificial seeds, which germinated into plantlets by a rate of 89 on aseptic MS solid medium, and 75.5 and 71 on aseptic soil and aseptic moist filter paper respectively. 展开更多
关键词 枣树 人工种子 组织培养 不定芽 快速繁殖
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