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多重PCR方法检测大肠杆菌O157∶H7的初步研究被引量：13: 1; 作者朱文冠薛素强 +2 位作者洪洁心崔剑峰郭霄峰《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期428-432,共5页; 目的研究一种快速、特异的检测大肠杆菌O157∶H7的多重PCR方法。方法以大肠杆菌O157∶H7的O157抗原基因(rfbE基因)、鞭毛H7抗原基因(fliC基因)、粘附素基因(eaeA基因)和志贺样毒素Ⅰ、Ⅱ(SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ基因)为扩增对象,设计能导至目的... 展开更多; 关键词大肠杆菌O157 H7 PCR rfbE基因 fliC基因 eaeA基因 SLT-Ⅰ基因 SLT-Ⅱ基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

ELISA与FAVN方法检测犬狂犬病抗体的比较被引量：15: 2; 作者孙招金薛素强 +2 位作者刘晓慧郭霄峰郭慧霞《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期204-206,共3页; 比较酶联免疫吸附试验(ELISA)与细胞培养病毒中和试验(FAVN)检测狂犬病疫苗免疫后血清抗体。将40只犬免疫兽用狂犬病疫苗后,第14d静脉采血分离血清,分别采用ELISA法和国际贸易指定试验FAVN法检测血清样品,试验犬免疫第21d攻击狂犬病毒B... 展开更多; 关键词狂犬病抗体 ELISA FAVN; 在线阅读下载PDF 职称材料

狂犬病毒HEP-dG株的拯救被引量：4: 3; 作者刘晓慧艾军 +3 位作者孙招金陈晶孙京臣郭霄峰《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期203-206,共4页; 目的筛选免疫原性高、致病性低的狂犬病疫苗候选株。方法应用反向遗传技术,在狂犬病毒弱毒株HEP-Flury株全基因组3'-N-P-M-G-L-5'的假基因区域(G与L之间),插入一个G基因,构建携带双G基因的全长感染性克隆,其与辅助质粒共转染BHK... 展开更多; 关键词狂犬病毒 G基因反向遗传学; 在线阅读下载PDF 职称材料

大肠杆菌O_(157):H_7 rfbE基因和fliC基因的克隆与序列分析被引量：3: 4; 作者朱文冠杨德胜郭霄峰《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2005年第9期22-24,共3页; 根据已发表的E.coliO_(157):H_7EDL933株的rfbE基因和fliC基因,设计了两对引物,分别对两个O_(157):H_7菌株的rfbE基因和一个菌株的fliC基因进行PCR,并将PCR产物克隆于pMD18-T载体质粒。测序结果表明,获得到了与理论相符的582bprfbE基因... 展开更多; 关键词 E.COLI O157:H7 rtbE基因 fliC基因克隆大肠杆菌O157:H7 FLIC E基因序列分析 O157:H7; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名多重PCR方法检测大肠杆菌O157∶H7的初步研究被引量：13: 1; 作者朱文冠薛素强洪洁心崔剑峰郭霄峰; 机构华南农业大学兽医微生物教研室广东出入境检验检疫局广东省东莞市兽医防疫检疫站; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期428-432,共5页; 基金广东省攻关项目(2002B21406) 广州市攻关项目(GK0401001)资助; 文摘目的研究一种快速、特异的检测大肠杆菌O157∶H7的多重PCR方法。方法以大肠杆菌O157∶H7的O157抗原基因(rfbE基因)、鞭毛H7抗原基因(fliC基因)、粘附素基因(eaeA基因)和志贺样毒素Ⅰ、Ⅱ(SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ基因)为扩增对象,设计能导至目的片段大小不同的5对引物,通过优化条件,建立了可用于粪便检测的大肠杆菌5重PCR。结果在同一扩增体系中,检测了5株不同来源的大肠杆菌O157∶H7及27株非大肠杆菌O157∶H7细菌。结果表明,该方法能从2株大肠杆菌O157∶H7中扩增出rfbEf、liC、eaeA、SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ基因,它们的大小分别为582 bp、802 bp、487 bp3、68 bp和177 bp。而另外3株大肠杆菌O157∶H7也能扩增出除eaeA、SLT-Ⅱ基因外的其它3个基因片段。表明该方法可用于检测大肠杆菌O157∶H7,还可检测细菌是否含有毒素基因。在检测27株非大肠杆菌O157∶H7,除O149出现SLT-II扩增产物和O1∶H7出现fliC基因扩增产物外,其它非大肠杆菌O157∶H7的扩增结果均为阴性,表明该方法有较高的特异性。当粪便样品经增菌培养12 h,用该5重PCR体系能检测出最初接种量为5cfu/g粪便的样品。结论本5重PCR方法具有较高的特异性和敏感性,可迅速、有效地将大肠杆菌O157∶H7与其它非大肠杆菌O157∶H7相区别,同时还能检测O157∶H7中的毒力因子。因此,通过进一步研究,本方法有望应用于临床大肠杆菌O157∶H7感染的辅助诊断。; 关键词大肠杆菌O157 H7 PCR rfbE基因 fliC基因 eaeA基因 SLT-Ⅰ基因 SLT-Ⅱ基因; Keywords Esherichia coli O157：H7；muhiplex PCR rfbE gene； fliC gene；eaeA gene； slt-Ⅰ gene； slt-Ⅱ gene; 分类号 R516 [医药卫生—内科学] R378.2 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ELISA与FAVN方法检测犬狂犬病抗体的比较被引量：15: 2; 作者孙招金薛素强刘晓慧郭霄峰郭慧霞; 机构华南农业大学兽医学院微生物教研室华南农业大学生物药品有限公司; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期204-206,共3页; 基金国家高技术研究发展计划(2006AA10A204) 农业公益性行业专项(200803014); 文摘比较酶联免疫吸附试验(ELISA)与细胞培养病毒中和试验(FAVN)检测狂犬病疫苗免疫后血清抗体。将40只犬免疫兽用狂犬病疫苗后,第14d静脉采血分离血清,分别采用ELISA法和国际贸易指定试验FAVN法检测血清样品,试验犬免疫第21d攻击狂犬病毒BD06株。结果表明,两种方法检测结果差异不显著(p≥0.05,p=0.19),FAVN、ELISA法检测狂犬病抗体与攻毒试验结果的阳性符合率均为100%。; 关键词狂犬病抗体 ELISA FAVN; Keywords antibody against rabies virus ELISA FAVN; 分类号 S858.292 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名狂犬病毒HEP-dG株的拯救被引量：4: 3; 作者刘晓慧艾军孙招金陈晶孙京臣郭霄峰; 机构华南农业大学兽医学院微生物教研室; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期203-206,共4页; 基金国家863计划(2006AA10A024) 国家自然科学基金(30671565) 广东省自然科学基金团队项目(5200638); 文摘目的筛选免疫原性高、致病性低的狂犬病疫苗候选株。方法应用反向遗传技术,在狂犬病毒弱毒株HEP-Flury株全基因组3'-N-P-M-G-L-5'的假基因区域(G与L之间),插入一个G基因,构建携带双G基因的全长感染性克隆,其与辅助质粒共转染BHK-21细胞,盲传十代,用荧光抗体和RT-PCR鉴定病毒。结果成功获得携带双G基因的狂犬病毒HEP-dG株,该病毒在BHK-21细胞中稳定生长,其病毒滴度达到1010FFU/mL。结论HEP-dG株会为研制高效的狂犬病病毒基因工程口服疫苗提供了良好的疫苗候选株。; 关键词狂犬病毒 G基因反向遗传学; Keywords rabies virus G gene reverse genetics; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠杆菌O_(157):H_7 rfbE基因和fliC基因的克隆与序列分析被引量：3: 4; 作者朱文冠杨德胜郭霄峰; 机构华南农业大学兽医微生物教研室广东省东莞市兽医防疫检疫站; 出处《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2005年第9期22-24,共3页; 基金本研究获广东省攻关项目的资助项目号为:2002B21406。; 文摘根据已发表的E.coliO_(157):H_7EDL933株的rfbE基因和fliC基因,设计了两对引物,分别对两个O_(157):H_7菌株的rfbE基因和一个菌株的fliC基因进行PCR,并将PCR产物克隆于pMD18-T载体质粒。测序结果表明,获得到了与理论相符的582bprfbE基因片段和802bpfliC基因片段。一株菌的rfbE基因存在无意义突变(两个)。而另一株菌fliC基因有一个有意义突变(aac→gac); 关键词 E.COLI O157:H7 rtbE基因 fliC基因克隆大肠杆菌O157:H7 FLIC E基因序列分析 O157:H7; Keywords E.coli O157：H7 rfbE gene fliC gene cloning; 分类号 Q939.121 [生物学—微生物学] TP391.41 [自动化与计算机技术—计算机应用技术]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	多重PCR方法检测大肠杆菌O157∶H7的初步研究	朱文冠薛素强洪洁心崔剑峰郭霄峰	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	13	在线阅读下载PDF 职称材料
2	ELISA与FAVN方法检测犬狂犬病抗体的比较	孙招金薛素强刘晓慧郭霄峰郭慧霞	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	15	在线阅读下载PDF 职称材料
3	狂犬病毒HEP-dG株的拯救	刘晓慧艾军孙招金陈晶孙京臣郭霄峰	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	大肠杆菌O_(157):H_7 rfbE基因和fliC基因的克隆与序列分析	朱文冠杨德胜郭霄峰	《中国动物检疫》 CAS 北大核心	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料