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非洲猪瘟病毒基因Ⅰ型的双重实时荧光定量PCR检测方法建立
被引量：
3
1
作者
常昊
邱英武
+10 位作者
彭杰
高琦
宋泽布
陈洋
李薇
林丽苗
曹雪珍
周庆丰
张桂红
李群辉
郑泽中
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第10期4428-4432,共5页
随着基因Ⅰ型非洲猪瘟(GenotypeⅠASFV)在我国开始流行,使我国对ASF的诊断、预防和控制更具挑战性。本研究使用中国动物疾病预防控制中心(CADC)推荐使用的B646L引物与探针,结合针对GenotypeⅠASFV EP402R基因保守特异性区域设计引物与探...
随着基因Ⅰ型非洲猪瘟(GenotypeⅠASFV)在我国开始流行,使我国对ASF的诊断、预防和控制更具挑战性。本研究使用中国动物疾病预防控制中心(CADC)推荐使用的B646L引物与探针,结合针对GenotypeⅠASFV EP402R基因保守特异性区域设计引物与探针,建立了一种在诊断ASF的同时可对ASFV进行GenotypeⅠASFV鉴别的快速检测方法,并对其灵敏性、特异性进行检测。结果显示,该方法具有良好的灵敏性以及特异性,可有效用于ASFV的临床诊断以及GenotypeⅠASFV的监测。
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关键词
非洲猪瘟
基因Ⅰ型ASFV
实时荧光定量PCR
EP402R
B646
L
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职称材料
一种快速检测非洲猪瘟病毒I177L基因缺失毒株的荧光定量PCR方法
被引量：
1
2
作者
邱英武
常昊
+11 位作者
彭杰
易和友
王秋梅
郭彦辰
吴倩雯
曹雪珍
林丽苗
李薇
周庆丰
张桂红
李群辉
龚浪
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第6期2521-2527,共7页
本研究旨在建立一种特异、灵敏、快速的ASFV-G-ΔI177L实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法。针对ASFV I117L基因的保守区域设计特异性引物/探针对,通过优化反应条件和反应程序,从而提高检测方法的灵敏性,并验证检测方法的重复性和特异性。...
本研究旨在建立一种特异、灵敏、快速的ASFV-G-ΔI177L实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法。针对ASFV I117L基因的保守区域设计特异性引物/探针对,通过优化反应条件和反应程序,从而提高检测方法的灵敏性,并验证检测方法的重复性和特异性。对170份临床样品进行了检测,并与OIE推荐的检测方法进行对比。结果表明,基于ASFV I117L基因所设计的特异性引物/探针对,能扩增2.2×10^(1)~2.2×10^(10)copies·μL^(-1)的pMD18-I177L标准质粒,建立的标准曲线R 2可达0.9957,最低检测模板浓度为2.2×10^(1)copies·μL^(-1);该方法扩增反应采用一步法,耗时35 min,批内、批间变异系数均<1.8%;针对ASFV I177L基因特异性扩增,但对其他5种常见猪病毒核酸样品及无酶水未见阳性扩增;用该方法对170份临床样品进行检测,本方法和OIE推荐的检测方法具有良好的一致性。本研究成功建立了一种特异、灵敏、快速ASFV-G-ΔI177L检测方法,为临床非洲猪瘟病毒的监测诊断提供了良好的技术支撑。
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关键词
ASF
ASFV
TaqMan
FQ-PCR
分子诊断
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职称材料
题名
非洲猪瘟病毒基因Ⅰ型的双重实时荧光定量PCR检测方法建立
被引量：
3
1
作者
常昊
邱英武
彭杰
高琦
宋泽布
陈洋
李薇
林丽苗
曹雪珍
周庆丰
张桂红
李群辉
郑泽中
机构
华南农业大学兽医学院非洲猪瘟防控技术研究中心
温氏食品集团股份有限公司
国家
非洲
猪瘟
区域实验室(广州)
广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室
岭南现代
农业
科学与
技术
广东省实验室茂名分
中心
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第10期4428-4432,共5页
基金
广州市基础与应用基础研究项目(202201010490)
广州市重点领域研发计划(202206010036)
+1 种基金
茂名实验室科研启动项目(2021TDQD002)
财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系资助(CARS-35)。
文摘
随着基因Ⅰ型非洲猪瘟(GenotypeⅠASFV)在我国开始流行,使我国对ASF的诊断、预防和控制更具挑战性。本研究使用中国动物疾病预防控制中心(CADC)推荐使用的B646L引物与探针,结合针对GenotypeⅠASFV EP402R基因保守特异性区域设计引物与探针,建立了一种在诊断ASF的同时可对ASFV进行GenotypeⅠASFV鉴别的快速检测方法,并对其灵敏性、特异性进行检测。结果显示,该方法具有良好的灵敏性以及特异性,可有效用于ASFV的临床诊断以及GenotypeⅠASFV的监测。
关键词
非洲猪瘟
基因Ⅰ型ASFV
实时荧光定量PCR
EP402R
B646
L
Keywords
African swine fever
genotype I ASFV
real-time fluorescence quantitative PCR
EP402R
B646L
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
一种快速检测非洲猪瘟病毒I177L基因缺失毒株的荧光定量PCR方法
被引量：
1
2
作者
邱英武
常昊
彭杰
易和友
王秋梅
郭彦辰
吴倩雯
曹雪珍
林丽苗
李薇
周庆丰
张桂红
李群辉
龚浪
机构
华南农业大学兽医学院非洲猪瘟防控技术研究中心
广东省畜禽健康养殖与环境控制企业重点实验室
国家
非洲
猪瘟
区域实验室(广州)
广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室
岭南现代
农业
科学与
技术
广东省实验室茂名分
中心
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第6期2521-2527,共7页
基金
广州市重点领域研发计划(202206010036)
广州市基础与应用基础研究项目(202201010490)
+1 种基金
茂名实验室科研启动项目(2021TDQD002)
财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系资助(CARS-35)
文摘
本研究旨在建立一种特异、灵敏、快速的ASFV-G-ΔI177L实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法。针对ASFV I117L基因的保守区域设计特异性引物/探针对,通过优化反应条件和反应程序,从而提高检测方法的灵敏性,并验证检测方法的重复性和特异性。对170份临床样品进行了检测,并与OIE推荐的检测方法进行对比。结果表明,基于ASFV I117L基因所设计的特异性引物/探针对,能扩增2.2×10^(1)~2.2×10^(10)copies·μL^(-1)的pMD18-I177L标准质粒,建立的标准曲线R 2可达0.9957,最低检测模板浓度为2.2×10^(1)copies·μL^(-1);该方法扩增反应采用一步法,耗时35 min,批内、批间变异系数均<1.8%;针对ASFV I177L基因特异性扩增,但对其他5种常见猪病毒核酸样品及无酶水未见阳性扩增;用该方法对170份临床样品进行检测,本方法和OIE推荐的检测方法具有良好的一致性。本研究成功建立了一种特异、灵敏、快速ASFV-G-ΔI177L检测方法,为临床非洲猪瘟病毒的监测诊断提供了良好的技术支撑。
关键词
ASF
ASFV
TaqMan
FQ-PCR
分子诊断
Keywords
ASF
ASFV
TaqMan FQ-PCR
molecular diagnosis
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
非洲猪瘟病毒基因Ⅰ型的双重实时荧光定量PCR检测方法建立
常昊
邱英武
彭杰
高琦
宋泽布
陈洋
李薇
林丽苗
曹雪珍
周庆丰
张桂红
李群辉
郑泽中
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
一种快速检测非洲猪瘟病毒I177L基因缺失毒株的荧光定量PCR方法
邱英武
常昊
彭杰
易和友
王秋梅
郭彦辰
吴倩雯
曹雪珍
林丽苗
李薇
周庆丰
张桂红
李群辉
龚浪
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
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