狂犬病病毒的起源、传播及遗传演化 被引量：1

1

作者 郑艳虹 吴梓琦 +3 位作者 刘谕儒 罗均 郭霄峰 罗永文 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2613-2625,共13页

狂犬病(rabies)是由弹状病毒科(Rhabdoviridae)狂犬病病毒属(Lyssavirus,也称丽沙病毒属)病毒引起的一种人兽共患的烈性传染病。根据国际病毒分类学委员会第10次报告的最新分类,狂犬病病毒属目前被分为17个种。其中,血清I型狂犬病病毒(r... 狂犬病(rabies)是由弹状病毒科(Rhabdoviridae)狂犬病病毒属(Lyssavirus,也称丽沙病毒属)病毒引起的一种人兽共患的烈性传染病。根据国际病毒分类学委员会第10次报告的最新分类,狂犬病病毒属目前被分为17个种。其中,血清I型狂犬病病毒(rabies virus,RABV)是狂犬病病毒属的成员之一,是最常见的狂犬病病原体。随着测序技术的发展,越来越多狂犬病病毒的全基因组序列被测定,这有助于人们在分子水平更深入地理解该病毒的流行情况和自然演化过程。本文对狂犬病病毒的分布、传播规律、起源及系统进化等方面进行综述,为追溯狂犬病病毒的起源,掌握其传播及遗传演化规律,制定科学的狂犬病防控策略提供理论参考。 展开更多

关键词 狂犬病病毒属 狂犬病病毒 进化 起源 遗传谱系

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华南地区猪流行性腹泻病毒的分离鉴定及其S基因抗原表位片段的遗传变异分析 被引量：14

2

作者 田野 苏丹萍 +4 位作者 蒋伟 钟望 张显浩 陈瑞爱 贺东生 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第5期3-5,8,共4页

应用RT-PCR方法对华南地区某大型猪场疑似猪流行性腹泻病料检测,选取阳性病料接种到Vero细胞,命名为CH/GDGZ/2012(简称GD-12)株。用病毒RNA抽提物为模板,对GD-12的S基因抗原区片段的扩增、克隆后进行核苷酸测序。序列分析表明,CH/GDGZ/2... 应用RT-PCR方法对华南地区某大型猪场疑似猪流行性腹泻病料检测,选取阳性病料接种到Vero细胞,命名为CH/GDGZ/2012(简称GD-12)株。用病毒RNA抽提物为模板,对GD-12的S基因抗原区片段的扩增、克隆后进行核苷酸测序。序列分析表明,CH/GDGZ/2012与CV777、Chinju99、Br1/87、DR13和SM98的核苷酸序列同源性分别为96.9%、93.0%、95.7%、96.7%和96.0%,氨基酸序列的同源性分别为97.7%、91.5%、95.4%、98.0%和94.8%。进化树分析结果显示,华南地区CH/GD-01/2011、CH/GDGZ/2012、GDHSY/2011、CH/GXQZ/2011毒株与经典毒株的遗传距离较大,处于不同的亚群。研究表明,PEDV GD-12株已发生遗传变异、关键抗原表位发生较大变化,该研究可为诊断和防控该病提供参考。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻 S基因 变异

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒YA株的分离鉴定及动物回归试验 被引量：5

3

作者 王福广 孙彦伟 +5 位作者 赵志权 王连想 余小利 苏丹萍 罗满林 贺东生 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第5期3-5,共3页

广东省某猪场暴发以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染病。采集该猪场濒死猪的肺脏,接种Marc-145细胞,产生典型的细胞病变,收集病毒液并命名该病毒为PRRSV YA株。实时荧光RT-PCR试验显示YA株是基因缺失型变异株。扩增YA株的Nsp2基... 广东省某猪场暴发以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染病。采集该猪场濒死猪的肺脏,接种Marc-145细胞,产生典型的细胞病变,收集病毒液并命名该病毒为PRRSV YA株。实时荧光RT-PCR试验显示YA株是基因缺失型变异株。扩增YA株的Nsp2基因的部分序列并进行核苷酸克隆、测序,结果显示Nsp2基因缺失第481位和第532-560位氨基酸。扩增Gp5基因序列并测序,绘制遗传进化树,结果显示YA株属于美洲型毒株,与其他7株已发表的高致病性PRRSV同源性达98.8%以上。用YA株病毒接种4头仔猪,其发病率和死亡率分别为100%（4/4）和75%（3/4）。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 测序 NSP2 GP5 攻毒

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鸡4种艾美耳球虫单一虫种与产气荚膜梭菌共感染对鸡生产性能的影响 被引量：1

4

作者 龙航宇 吕梦娜 +2 位作者 郭宸旭 尹乐子 林瑞庆 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第9期30-33,共4页

对鸡的4种艾美耳球虫的单一虫种与产气荚膜梭菌共感染引致的试验性坏死性肠炎(NE)进行比较分析。将14日龄的鸡先分别口服巨型艾美耳球虫(30000个孢子化卵囊/只)、毒害艾美耳球虫(10000个孢子化卵囊/只)、柔嫩艾美耳球虫(20000个孢子化卵... 对鸡的4种艾美耳球虫的单一虫种与产气荚膜梭菌共感染引致的试验性坏死性肠炎(NE)进行比较分析。将14日龄的鸡先分别口服巨型艾美耳球虫(30000个孢子化卵囊/只)、毒害艾美耳球虫(10000个孢子化卵囊/只)、柔嫩艾美耳球虫(20000个孢子化卵囊/只)和堆型艾美耳球虫(30000个孢子化卵囊/只)单一种球虫,17日龄时饲料转为高蛋白饲料,18日龄再感染产气荚膜梭菌的临床分离广东株Cp2-4(1×10^9 CFU/只),统计相对增重、料肉比、病变评分等指标进行试验性NE的比较分析。结果显示,除堆型艾美耳球虫和产气荚膜梭菌的共感染组合外,其余3种共感染组均促进NE病变的发生。其中,毒害/巨型艾美耳球虫+产气荚膜梭菌共感染引致试验鸡产生NE作用明显,本试验为进一步建立稳定的共感染NE动物模型奠定基础。 展开更多

关键词 产气荚膜梭菌 艾美耳球虫 坏死性肠炎 动物模型

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒GD07b株的分离鉴定及Nsp2基因同源性分析

5

作者 邱深本 苏丹萍 +3 位作者 黄爱芳 罗映霞 赵志权 贺东生 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第3期91-94,共4页

在某集约化猪场采集疑似高致病性猪繁殖与呼吸综合征病死猪的肺、淋巴结等病料,进行检测,将RT-PCR检测结果为阳性的病料处理后接种Marc-145细胞,培养72-96 h后细胞单层出现明显的CPE。收获病毒经RT-PCR方法检测,并将此PCR产物经纯化后... 在某集约化猪场采集疑似高致病性猪繁殖与呼吸综合征病死猪的肺、淋巴结等病料,进行检测,将RT-PCR检测结果为阳性的病料处理后接种Marc-145细胞,培养72-96 h后细胞单层出现明显的CPE。收获病毒经RT-PCR方法检测,并将此PCR产物经纯化后连同引物送相关公司进行测序,结果显示,该病毒为繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2基因缺失株,将该病毒命名为HPPRRSV-GD07b株。将GD07b株序列与国内外19株PRRSVNsp2基因进行比较分析,结果表明,该毒株Nsp2基因与CH-1a株等4株PRRSV经典株同源性较低,为60.5%-81.6%;而与14株变异株同源性较高,为90.6%-98.9%。 展开更多

关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 分离 鉴定 NSP2基因

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宏转录组测序技术在一起仔猪病毒性腹泻疾病诊断中的运用及分析 被引量：1

6

作者 李跃 张长春 +11 位作者 刘光裕 高梦源 符超俊 邢家宝 徐思佳 邝麒元 刘静 高校鹏 王衡 龚浪 张桂红 孙彦阔 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3579-3589,共11页

为了确定2023年春季广西贺州地区猪场仔猪腹泻病原,采用宏转录组测序技术筛查该地区猪群发病和感染情况,为当地仔猪腹泻疾病的防控提供依据。采集2023年3月广西贺州地区10 km范围内6个相邻并同时暴发腹泻的猪场仔猪的肛拭子和粪便,运用M... 为了确定2023年春季广西贺州地区猪场仔猪腹泻病原,采用宏转录组测序技术筛查该地区猪群发病和感染情况,为当地仔猪腹泻疾病的防控提供依据。采集2023年3月广西贺州地区10 km范围内6个相邻并同时暴发腹泻的猪场仔猪的肛拭子和粪便,运用MGISEQ 200测序平台进行宏转录组测序开展猪病原感染组学研究,系统性地筛查该区域仔猪腹泻的病原谱,使用实时荧光定量RT-PCR对最主要病毒进行确认,定量分析各病原的丰度并选取鉴定到的病毒基因序列进行系统发育分析,Pearson分析解析病原混合感染的相关性。结果显示:通过宏转录组测序技术在这些样品中共检测到17种致病性细菌、12种病毒和3种寄生虫。病毒以猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)代表的腹泻相关病毒为主,包括猪札幌病毒(porcine sapovirus, SaV)、猪嵴病毒(porcine kobuvirus, PKV)、猪星状病毒(porcine astrovirus, PAstV)、猪猴禽猪肠病毒(porcine sapelovirus, PSV)、轮状病毒A(rotavirus, RVA)等;细菌主要包括3种肠杆菌科(Enterobacteriaceae)、3种乳杆菌科(Lactobacillaceae)、2种芽胞杆菌科(Bacillaceae)等;寄生虫包括两种滴虫和碘阿米巴原虫。来自5个场区的PEDV刺突基因(spike gene,S基因)系统发育分析显示,毒株均属于G2c簇群,毒株之间核苷酸相似性为99.99%,毒株S基因存在重组情况;其中,一发病猪场还检测到P[6]基因型的rotavirus A部分VP4序列,与人源轮状病毒的核苷酸相似性最高。此外,在4个猪场检测到2种以上的仔猪腹泻相关病毒,系统发育分析结果提示,此区域存在腹泻病原多谱系共同流行的情况。病原相关性分析显示,PEDV/PSV(P<0.001)、PEDV/猪环曲病毒(porcine torovirus, PToV)(P<0.001)和PEDV/PAstV(P<0.05)有显著的负相关,而PEDV/PKV(P<0.05)有显著的正相关。以上结果提示,在该地区相邻养殖区域中,仔猪腹泻的病原谱具有多样性,其中,直接致病病原是PEDV,同时,PEDV与样品中其他腹泻相关病毒之间存在关联。本研究较为全面地展示该地区仔猪腹泻病原的感染谱,并鉴定出导致腹泻发生最直接的病原体;同时也能分析小范围养殖区域内腹泻相关病原的相关性,为该区域仔猪腹泻疾病防控提供更加精准的参考和指导。 展开更多

关键词 宏转录组测序技术 仔猪腹泻疾病 病原识别 PEDV 遗传进化分析 相关性分析

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基于N基因的RT-LAMP技术检测PEDV、TGEV、PDCoV三种猪腹泻冠状病毒的研究 被引量：1

7

作者 邓可辉 陈志飞 +6 位作者 俞婷 王志林 王修武 郭智轩 李松倍 魏文康 贺东生 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期70-79,共10页

本研究成功建立了检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪丁型冠状病毒(PDCoV)3种猪冠状病毒的反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),为现场快速诊断提供技术支持。根据GenBank公布的PEDV、TGEV、PDCoV的N基因保守序... 本研究成功建立了检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪丁型冠状病毒(PDCoV)3种猪冠状病毒的反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),为现场快速诊断提供技术支持。根据GenBank公布的PEDV、TGEV、PDCoV的N基因保守序列作为靶序列设计了3套LAMP检测引物,并通过反应条件优化、敏感性试验、特异性试验以及临床样品检测,分别建立了3种快捷、敏感的猪冠状病毒RT-LAMP检测方法。结果显示:所建立的PEDV、TGEV、PDCoV 3种冠状病毒RT-LAMP检测方法的最佳反应温度分别为65℃、63℃、63℃,3种检测方法均可在45 min左右完成恒温扩增,扩增出特异性阶梯状条带,且不依赖于PCR仪等昂贵设备,仅需普通恒温装置即可反应。所建立的检测方法对PEDV、TGEV、PDCoV分别可以达到的检测下限为20、23、10拷贝/μL,敏感性较好;所建立的3种检测方法分别只检测出PEDV、TGEV、PDCoV,且与常见的猪源性病毒均无交叉反应,特异性好。用所建立的3种RT-LAMP检测方法对45份猪腹泻病料进行检测,PEDV、TGEV、PDCoV阳性率分别为33.33%(15/45)、22.22%(10/45)、13.33%(6/45),均比常规RT-PCR检测阳性率高。与常规RT-PCR相比较,本研究建立的方法操作简便快速、经济,且检测设备门槛低,更适用于基层临床检测。 展开更多

关键词 猪 冠状病毒 反转录环介导等温扩增 检测方法

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒病和副猪嗜血杆菌病混合感染的诊断与防制 被引量：18

8

作者 苏丹萍 王文豪 +2 位作者 张显浩 张丹琳 贺东生 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第8期186-189,共4页

目前在集约化养殖场的猪群中经常出现病毒病和细菌病的混合感染,严重影响中国养猪业的发展。2011年9月,广东某个千头母猪场的猪群大量发病,表现为高热、咳嗽、食欲下降、皮肤发绀、关节肿大等临床症状。通过流行病学调查、剖检、细菌分... 目前在集约化养殖场的猪群中经常出现病毒病和细菌病的混合感染,严重影响中国养猪业的发展。2011年9月,广东某个千头母猪场的猪群大量发病,表现为高热、咳嗽、食欲下降、皮肤发绀、关节肿大等临床症状。通过流行病学调查、剖检、细菌分离鉴定、药敏试验、PCR和RT-PCR等实验室检测最终确诊为高致病性猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒病和副猪嗜血杆菌病的混合感染,在此基础上提出和实施了该病的防控方案。 展开更多

关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒 副猪嗜血杆菌 诊断 防制

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猪β-干扰素的基因改造表达及其抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性测定 被引量：4

9

作者 张显浩 苏丹萍 +2 位作者 张艳萍 蒋爱翔 贺东生 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第10期63-67,共5页

本研究根据GenBank上登录的猪β-干扰素基因成熟肽核苷酸序列(mPoIFNβ),在保持原猪β-干扰素蛋白序列不变的基础上,对猪β-干扰素基因进行了毕赤酵母偏嗜性改造,并构建了毕赤酵母重组表达质粒pPICZαC-PoIFNβ。pPICZαC-PoIFNβ经Sac... 本研究根据GenBank上登录的猪β-干扰素基因成熟肽核苷酸序列(mPoIFNβ),在保持原猪β-干扰素蛋白序列不变的基础上,对猪β-干扰素基因进行了毕赤酵母偏嗜性改造,并构建了毕赤酵母重组表达质粒pPICZαC-PoIFNβ。pPICZαC-PoIFNβ经SacⅠ酶切线性化后,电击转化导入感受态的毕赤酵母菌株X-33中,转化子经YPDS+Zeocin抗性平板筛选和PCR鉴定后获得多株阳性菌株。阳性酵母菌株经甲醇诱导分泌表达了重组PoIFNβ,其表达量约为127.9mg/L。表达产物经SDS-PAGE和Western blotting检测,结果表明,表达产物为分子质量约25和28ku的混合物,并且二者都可与PoIFNβ阳性血清结合。以细胞病变抑制法测定重组β-干扰素在BHK-21细胞上的抗水泡性口炎病毒活性为2.8×103 IU/mL;对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在Marc-145细胞上抗病毒活性达到1.6×103 IU/mL。 展开更多

关键词 猪β-干扰素 毕赤酵母 分泌表达 抗病毒活性 猪繁殖与呼吸综合征病毒

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猪伪狂犬病病毒流行毒株gE/gI缺失突变株的构建及生物学特性研究 被引量：4

10

作者 潘慧 李艳华 +4 位作者 向柯宇 唐栋 程珍珠 罗永文 琚春梅 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期9-15,共7页

【目的】为研制针对猪伪狂犬病病毒流行毒株的疫苗提供候选毒株。【方法】构建针对猪伪狂犬病病毒流行毒株的gE/gI缺失重组转移质粒pMD-LA-RA及携带EGFP标记基因的重组转移质粒pMD-LA-EGFP-RA,将pMDLA-EGFP-RA与伪狂犬病病毒流行毒株PRV... 【目的】为研制针对猪伪狂犬病病毒流行毒株的疫苗提供候选毒株。【方法】构建针对猪伪狂犬病病毒流行毒株的gE/gI缺失重组转移质粒pMD-LA-RA及携带EGFP标记基因的重组转移质粒pMD-LA-EGFP-RA,将pMDLA-EGFP-RA与伪狂犬病病毒流行毒株PRV AH进行同源重组,利用EGFP为筛选标记,获得携带EGFP基因的gE/gI基因缺失突变株PRV AH gE~–/gI~–/EGFP^+,以此毒株与pMD-LA-RA进行第2次同源重组,筛选去除EGFP基因的gE/gI基因缺失突变株PRV AH gE~–/gI~–,并通过生长曲线、易感细胞连续传代和动物免疫评价其增殖能力、遗传稳定性及免疫原性。【结果】通过2次同源重组,结合荧光观察、空斑纯化和PCR检测,成功获得了PRV AH gE~–/gI~–,经PCR鉴定、荧光观察及测序鉴定,证实该毒株g E和g I基因被成功缺失,且不携带EGFP标记基因。生物学特性研究结果表明,该毒株增殖能力与亲本毒株相当,遗传稳定性及免疫原性良好。【结论】采用同源重组技术成功构建了免疫原性良好的猪伪狂犬病病毒流行毒株gE/gI基因缺失突变株,为研制针对流行毒株的基因缺失疫苗奠定了一定的基础。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病病毒 流行毒株 基因缺失 同源重组 生物学特性

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噬菌体裂解酶Cp51在重组乳酸菌中的表达及对A型产气荚膜梭菌的抗菌活性 被引量：2

11

作者 龙航宇 陶佳梦 +4 位作者 姜亚杰 李晓斌 邹佳汝 翁亚彪 林瑞庆 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期42-47,共6页

【目的】构建A型产气荚膜梭菌Clostridium perfringens裂解酶重组表达乳酸菌Lactococcus lactis,并检测重组菌及其表达产物的抗菌效果。【方法】全基因合成噬菌体裂解酶Cp51基因,构建PNZ8148-Cp51原核表达重组载体,电转化至乳酸菌NZ9000... 【目的】构建A型产气荚膜梭菌Clostridium perfringens裂解酶重组表达乳酸菌Lactococcus lactis,并检测重组菌及其表达产物的抗菌效果。【方法】全基因合成噬菌体裂解酶Cp51基因,构建PNZ8148-Cp51原核表达重组载体,电转化至乳酸菌NZ9000,经乳链菌肽诱导表达可溶性Cp51蛋白;用比浊法检测表达蛋白对A型产气荚膜梭菌的抗菌活性;利用细菌液混合培养检测重组菌对A型产气荚膜梭菌增殖的抑制作用。【结果】噬菌体裂解酶Cp51在乳酸菌中成功表达,为1268 bp;质量浓度1μg·mL^−1以上的重组蛋白对A型产气荚膜梭菌具有高效抗菌活性;重组乳酸菌对A型产气荚膜梭菌增殖有一定的抑制效果,混合培养后使产气荚膜梭菌活菌数从9×10^9 CFU·mL^−1下降到约9×10^8 CFU·mL^−1。【结论】A型产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶重组乳酸菌构建成功,为后续优化表达和临床应用研究奠定了基础。 展开更多

关键词 产气荚膜梭菌 乳酸菌 裂解酶 重组蛋白 抗菌活性

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不同免疫途径对猪流行性腹泻血清抗体的影响 被引量：1

12

作者 田野 张海明 贺东生 《养猪》 2013年第5期128-128,共1页

猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的一种仔猪腹泻、呕吐、脱水和食欲下降的传染病。从2010年春季至今，我国的广东、广西、江西、湖南、福建、浙江、安徽、江苏、湖北、河北和山东、吉林、辽宁、黑龙江等省份的部分地区，... 猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的一种仔猪腹泻、呕吐、脱水和食欲下降的传染病。从2010年春季至今，我国的广东、广西、江西、湖南、福建、浙江、安徽、江苏、湖北、河北和山东、吉林、辽宁、黑龙江等省份的部分地区，甚至泰国、菲律宾、韩国等亚洲国家的规模化猪场发生严重的腹泻病例。应用疫苗进行免疫预防是控制该病最有效的方法，PEDV抗体的检测主要应用间接酶联免疫吸附试验。本试验于2012年9月进行，通过对不同的免疫途径与血清抗体相关性研究，为猪流行性腹泻病的防控提供试验和理论依据。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 血清抗体 免疫途径 间接酶联免疫吸附试验 规模化猪场 仔猪腹泻 食欲下降 亚洲国家

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猪流行性腹泻病毒的分离及RT-PCR方法的建立 被引量：2

13

作者 田野 苏丹萍 +4 位作者 钟望 张显浩 张海明 陈瑞爱 贺东生 《猪业科学》 2013年第2期94-95,共2页

应用RT-PCR方法对2012年华南地区某大型猪场疑似猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)病料检测,选取阳性病料接种vero细胞,培养至15代,出现明显的细胞病变。为了更好的检测该病毒,根据M基因设计引物,建立了一个快速的RT-... 应用RT-PCR方法对2012年华南地区某大型猪场疑似猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)病料检测,选取阳性病料接种vero细胞,培养至15代,出现明显的细胞病变。为了更好的检测该病毒,根据M基因设计引物,建立了一个快速的RT-PCR方法。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 分离鉴定 RT-PCR

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广东地区5种优势血清型猪大肠杆菌的外膜蛋白型研究 被引量：1

14

作者 张丹琳 王文豪 贺东生 《广东畜牧兽医科技》 2012年第4期21-23,共3页

对从广东地区部分猪场分离的大肠杆菌进行血清型鉴定后,选取优势血清型O_9、O_(26)、O_(60)、O_(101)和O_(107)的8个致病性较强的分离株,采用超声波裂解、N-十二烷基肌氨酸钠处理和超速离心技术提取大肠杆菌的外膜蛋白(OMP),利用SDS-PAG... 对从广东地区部分猪场分离的大肠杆菌进行血清型鉴定后,选取优势血清型O_9、O_(26)、O_(60)、O_(101)和O_(107)的8个致病性较强的分离株,采用超声波裂解、N-十二烷基肌氨酸钠处理和超速离心技术提取大肠杆菌的外膜蛋白(OMP),利用SDS-PAGE电泳进行OMP分型。结果8个菌株共有3个OMP型(Ⅰ～Ⅲ型),其中O_(26)、O_(101)、O_(107)型的3个分离株的外膜蛋白型由1条带组成,为OMP-Ⅰ型;O_(60)、O_(101)、O_(107)型的4个分离株的外膜蛋白型由2条带组成,为OMP-Ⅱ型;O_9型的1个分离株的外膜蛋白型由3条带组成,为OMP-Ⅲ型。这表明,优势血清型O_9、O_(26)、O_(60)、O_(101)、O_(107)的分离株OMP型不单一;同一血清型的分离株,存在不同OMP型;而不同血清型的分离株却可有相同的OMP型。 展开更多

关键词 猪 大肠杆菌 O血清型 外膜蛋白 分型

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猪流行性腹泻病毒GD12株的细胞传代致弱与驯化

15

作者 田野 张海明 +4 位作者 张必兴 苏丹萍 倪挺 贺东生 陈瑞爱 《养猪》 2014年第1期108-108,共1页

猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）属于冠状病毒成员，为有囊膜的单股正链RNA病毒，可导致以腹泻、呕吐、脱水和哺乳仔猪高致死率为主要特征的肠道传染病。1971年在比利时和英国该病毒被首次报道，之后在很多... 猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）属于冠状病毒成员，为有囊膜的单股正链RNA病毒，可导致以腹泻、呕吐、脱水和哺乳仔猪高致死率为主要特征的肠道传染病。1971年在比利时和英国该病毒被首次报道，之后在很多国家都暴发了该病。我国从1976年开始陆续有猪流行性腹泻（PED）的报道，2010年后我国发生PED大面积流行。为弄清原因和防控的需要，我们于2013年10月在分离鉴定野毒株GD12株的基础上，对其进行细胞传代致弱并研究其生物学特性。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 致弱 细胞 正链RNA病毒 驯化 PEDV virus 肠道传染病

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上海市肉鸽沙门氏菌的分离鉴定及流行血清型和耐药性分析 被引量：25

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作者 梁德媚 许学斌 +5 位作者 王伟芳 詹泽强 任行星 林嘉特 廖明 张建民 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第12期3322-3328,共7页

为了解上海市农贸市场肉鸽群体中沙门氏菌流行血清型和耐药情况,本试验于2011—2014年间从上海市各区农贸市场采集肉鸽新鲜粪便样本92份,用XLD平板和沙门氏菌属显色培养基分离疑似沙门氏菌,革兰氏染色镜检并进行生化试验,共获得沙门氏... 为了解上海市农贸市场肉鸽群体中沙门氏菌流行血清型和耐药情况,本试验于2011—2014年间从上海市各区农贸市场采集肉鸽新鲜粪便样本92份,用XLD平板和沙门氏菌属显色培养基分离疑似沙门氏菌,革兰氏染色镜检并进行生化试验,共获得沙门氏菌24株,分离率为26.1%。采用Kauffmann-White法和K-B纸片法对24株沙门氏菌进行血清型鉴定和16种抗生素的药敏试验。血清型鉴定显示,24株沙门氏菌可分为鼠伤寒(66.7%)、阿贡纳(25.0%)和科瓦利斯(8.3%)3种血清型。药敏试验结果显示,有75.0%(18株)的分离株表现出不同程度耐药,其中分离株对四环素和磺胺异唑耐药率最高,均达到62.5%,其次为链霉素(58.3%)、萘啶酸(50.0%)、氨苄西林(20.8%)。多重耐药菌株15株(62.5%),耐4种抗菌药物的菌株最多,占16.7%(7株)。另外,分离菌株对头孢吡肟、头孢噻肟、头孢噻甲羧肟、亚胺培南、氧氟沙星等5种药物的敏感率为100.0%,对奥格门丁和环丙沙星有12.5%的中介敏感率。本研究结果表明,上海市肉鸽中沙门氏菌的携带率较高,且菌株多重耐药现象较严重,这为食品中沙门氏菌的防控工作带来较大的挑战和风险,肉鸽沙门氏菌的流行和耐药情况应值得密切关注。 展开更多

关键词 肉鸽 沙门氏菌 血清型 耐药性

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A型产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶Cp51的原核表达及活性检测 被引量：7

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作者 吕梦娜 龙航宇 +3 位作者 王丽梅 唐陶 陈冰冰 林瑞庆 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期19-23,共5页

【目的】原核表达A型产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶Cp51并研究其对A型产气荚膜梭菌Clostridium perfringens的体外抗菌活性。【方法】合成噬菌体裂解酶Cp51基因,并构建了pET-32a-Cp51原核表达载体,转化到大肠埃希菌Escherichia coli BL21(DE... 【目的】原核表达A型产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶Cp51并研究其对A型产气荚膜梭菌Clostridium perfringens的体外抗菌活性。【方法】合成噬菌体裂解酶Cp51基因,并构建了pET-32a-Cp51原核表达载体,转化到大肠埃希菌Escherichia coli BL21(DE3),经终浓度为0.5 mmol·L^(-1)的IPTG诱导以及镍柱纯化后,获得了可溶性的Cp51重组蛋白;用比浊法检测Cp51重组蛋白的杀菌活性。【结果】噬菌体裂解酶Cp51重组蛋白能够有效降低7株A型产气荚膜梭菌的浊度,裂解酶质量浓度在5μg·m L^(-1)以上、作用30 min对A型产气荚膜梭菌的杀菌率可达到99.99%以上,而对其他种类细菌无杀菌效果。【结论】A型产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶Cp51重组蛋白对A型产气荚膜梭菌有较强的体外杀菌活性和特异性,研究结果为后续裂解酶Cp51的临床应用奠定基础。 展开更多

关键词 产气荚膜梭菌 噬菌体 裂解酶 蛋白表达 杀菌活性

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广东地区口蹄疫病毒VP1和3A基因的序列分析 被引量：1

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作者 李琪 谢增胜 +8 位作者 石庆伟 陈耀 孙彦阔 冯松林 汪志 冀池海 刘艺兴 邢秀琳 张桂红 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期13-18,共6页

【目的】了解广东地区口蹄疫病毒(FMDV)的遗传变异情况,为我国FMDV流行病学的研究及防控提供基础数据。【方法】对2015—2016年间收集的广东地区猪的病料进行FMDV VP1和3A基因的扩增测序和序列分析。【结果】11株O型FMDV均属耿马谱系毒... 【目的】了解广东地区口蹄疫病毒(FMDV)的遗传变异情况,为我国FMDV流行病学的研究及防控提供基础数据。【方法】对2015—2016年间收集的广东地区猪的病料进行FMDV VP1和3A基因的扩增测序和序列分析。【结果】11株O型FMDV均属耿马谱系毒株,7株A型FMDV均属Asia型毒株。11株O型FMDV的VP1基因与流行毒株相比,GD-MM-3株与O/BY/CHA/2010株序列相似性最高,为95.3%;GD-1株、GD-MM-1株和GD-MM-3株与O/MYA/1/98株序列相似性最高,为90.8%。7株A型FMDV的VP1基因与流行毒株相比,A/GDMM/CHA/2013株与GD-3株序列相似性最高,为99.8%;A/HuBWH/CHA/2009株与GD-3株序列相似性最高,为91.4%。11株O型FMDV的3A蛋白不存在氨基酸的缺失,7株A型FMDV的3A蛋白存在较多氨基酸的缺失。【结论】广东部分地区FMDV基因型复杂,预防控制困难。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 VP1基因 3A基因 序列相似性 遗传变异

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3种猪冠状病毒N基因密码子偏好性及宿主适应机制研究 被引量：1

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作者 孙守湖 陈志飞 +5 位作者 郭智轩 俞婷 王修武 李松倍 魏文康 贺东生 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2403-2413,共11页

【目的】研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪丁型冠状病毒(PDCoV)的N基因密码子偏好性差异及其影响因素。【方法】从GenBank数据库中下载上述3种猪冠状病毒(PoCoV)的全基因组序列,通过EMBOSS explorer、CALcal、... 【目的】研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪丁型冠状病毒(PDCoV)的N基因密码子偏好性差异及其影响因素。【方法】从GenBank数据库中下载上述3种猪冠状病毒(PoCoV)的全基因组序列,通过EMBOSS explorer、CALcal、DAMBE及CodonW等网站及软件计算有效密码子数(ENC)、相对同义密码子使用度(RSCU)等参数并进行ENC绘图、奇偶偏好性和中性绘图分析等。【结果】3种猪冠状病毒的N基因序列的ENC分布在48.99~54.96,其中PEDV、TGEV和PDCoV的ENC分别为53.74±0.61、50.09±0.88和0.72±0.65;RSCU分析显示,3种猪冠状病毒N基因偏好的密码子各不相同,但一般都偏好以U结尾;ENC绘图分析显示,3种猪冠状病毒的N基因数值点均位于标准曲线下方位置;奇偶偏好性分析显示全部散点位于y=0.5以下,且矢量向左下侧偏倚;中性绘图分析显示,3种病毒N基因绘图分析中回归曲线的斜率均接近0。3种猪冠状病毒的S和N基因在牛、猪、犬、人、鸡中的CAI值逐渐增高,RCDI值逐渐降低并接近于1。【结论】PEDV、TGEV、PDCoV的N基因密码子偏好性存在差异且密码子偏好性均较弱,3种猪冠状病毒的N基因表现为“CpG二核苷酸缺失”;自然选择作用是这3种猪冠状病毒N基因密码子偏好性形成的主要进化压力;人、猪、鸡3种宿主均适合3种猪冠状病毒的N基因表达,且PDCoV的S和N基因均更适合在鸡中表达。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 猪丁型冠状病毒 N基因 密码子偏好性

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狂犬病病毒强、弱毒株糖蛋白调节Ⅰ型干扰素作用的差异分析 被引量：3

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作者 肖宇 吴凡 +5 位作者 张宝石 徐孟磊 龙家慧 罗均 郭霄峰 罗永文 《华南农业大学学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期190-198,共9页

【目的】狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)引起的一种高致死性人兽共患传染病。Ⅰ型干扰素(IFN-I)通路在抵抗RABV感染中发挥重要作用。RABV可通过磷蛋白及核蛋白的功能逃逸IFN-I的抗病毒作用,本研究旨在探讨对RABV的致... 【目的】狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)引起的一种高致死性人兽共患传染病。Ⅰ型干扰素(IFN-I)通路在抵抗RABV感染中发挥重要作用。RABV可通过磷蛋白及核蛋白的功能逃逸IFN-I的抗病毒作用,本研究旨在探讨对RABV的致病性有重要影响的糖蛋白(Glycoprotein,G)在调节IFN-I通路方面扮演怎样的角色。【方法】将RABV弱毒株Hep-Flury的G基因替换成致病株CVS-11的G基因,拯救得到重组病毒HepG,分析Hep-Flury、CVS-11和HepG这3种毒株在体内和体外感染对IFN-I通路激活和调控的差别,比较它们在神经细胞中对抗IFN-I抗病毒作用的差异性。【结果】替换了CVS-11的G基因后,重组病毒HepG致病力增强,能够100%致死小鼠,在鼠脑中的增殖水平显著高于亲本株Hep-Flury。在感染鼠脑早期及体外神经细胞时,弱毒株Hep-Flury能够较快地激活IFN-I通路相关基因的表达,重组病毒HepG的激活能力介于HepFlury和CVS-11之间。利用Poly(I:C)激活神经细胞的IFN-I通路后,Hep-Flury的增殖被显著抑制,CVS-11和HepG的复制几乎不受影响,表现出一定的抵抗能力。【结论】RABV的G蛋白在调节和抵抗IFN-I通路方面发挥重要功能,为进一步探究RABV致病毒株的G蛋白如何协助病毒在中枢神经系统中逃逸IFN-I提供了线索和依据。 展开更多

关键词 狂犬病 狂犬病病毒 Ⅰ型干扰素 糖蛋白 免疫逃逸

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