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鸡α干扰素/白细胞介素18基因的融合表达及抗病毒活性研究 被引量：6
1
作者 何静 张盼盼 +6 位作者 孙敏华 康银峰 谢鹏 向斌 韩翡 谭阳通 任涛 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期18-22,共5页
【目的】构建原核表达载体p ET28a-r Ch IFN-α-Ch IL-18、大肠埃希菌Escherichia coli表达及产物纯化与活性检测,研究高效广谱鸡基因工程重组复合抗病毒制剂,以对鸡的病毒性疾病进行防治.【方法】采用融合PCR(Fusion PCR)方法,利用具... 【目的】构建原核表达载体p ET28a-r Ch IFN-α-Ch IL-18、大肠埃希菌Escherichia coli表达及产物纯化与活性检测,研究高效广谱鸡基因工程重组复合抗病毒制剂,以对鸡的病毒性疾病进行防治.【方法】采用融合PCR(Fusion PCR)方法,利用具有互补末端的引物,形成具有重叠链的PCR产物,通过PCR产物重叠链的延伸将鸡α干扰素(Chicken interferon alpha,Ch IFN-α)与鸡白细胞介素18(Chicken interleukin-18,Ch IL-18)基因构建Ch IFN-α-Ch IL-18融合基因并克隆入p ET-28a原核表达载体中进行原核表达.通过镍柱亲和层析法纯化可溶性蛋白,并进行SDSPAGE分析、Western-blot鉴定.采用细胞病变抑制法检测r Ch IFN-α-Ch IL-18蛋白在细胞上抑制水泡性口炎病毒(VSV)及新城疫病毒(NDV)增殖活性.【结果和结论】成功构建并克隆了p ET28a-r Ch IFN-α-Ch IL-18融合基因.融合基因在大肠埃希菌中表达的r Ch IFN-α-Ch IL-18蛋白相对分子质量约为38 000,蛋白经纯化后纯度在90%以上.r Ch IFN-α-Ch IL-18蛋白在鸡胚成纤维(CEF)细胞上具有明显抗病毒活性,其抗VSV和NDV的活性明显高于单一r Ch IFN-α、r Ch IL-18蛋白的抗病毒活性. 展开更多
关键词 鸡α干扰素 鸡白细胞介素18 融合PCR 抗病毒活性
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鸽TLR7基因的克隆、鉴定及表达分析 被引量：3
2
作者 韩翡 焦培荣 +7 位作者 韦良孟 何静 宋亚芬 康银峰 崔进 张烁 廖明 任涛 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期18-23,共6页
【目的】克隆鸽Toll样受体(Toll-like receptor 7,TLR7)全基因,预测其主要功能区域并分析在鸽的各种组织中的表达情况.【方法】通过RT-PCR、RACE、相对荧光定量PCR、生物信息学软件分析方法进行研究.【结果和结论】研究发现鸽TLR7基因c... 【目的】克隆鸽Toll样受体(Toll-like receptor 7,TLR7)全基因,预测其主要功能区域并分析在鸽的各种组织中的表达情况.【方法】通过RT-PCR、RACE、相对荧光定量PCR、生物信息学软件分析方法进行研究.【结果和结论】研究发现鸽TLR7基因cDNA全长3 516 bp,ORF全长3 175 bp,编码1 048个氨基酸.其蛋白结构主要由胞外的富含亮氨酸的结构域(LRRs)、跨膜域(TM)和胞内的Toll/白介素-1受体结构域(TIR)3部分构成.鸽TLR7基因编码的氨基酸序列与鸿雁Anser cygnoides、绿头鸭Anas platyrhynchos、鸡Gallus gallus和麻雀Taeniopygia guttata的相似性均高于78%,与哺乳动物的相似性约为60%,与鱼类的相似性低于55%.鸽TLR7基因在小肠、脾脏、肾脏、肝脏中表达量较高,而在大脑、肺脏、气管、心脏、胰腺、肌肉、皮肤中表达量相对较低.该研究克隆了鸽TLR7全基因,并预测其主要功能区域. 展开更多
关键词 鸽 TLR7基因 序列分析 受体表达
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当前我国H7N9亚型禽流感状况分析 被引量：9
3
作者 王霞 何婉婷 +7 位作者 李伟强 刘智婷 王文清 张友 陈祖贤 赵冰兵 廖明 焦培荣 《动物医学进展》 北大核心 2018年第9期126-129,共4页
2013年,华东地区报告了全球首例H7N9亚型禽流感病例,引起了国内外广泛的关注。2016年以来,H7N9亚型禽流感病毒感染人和动物的数量大幅度增加,对人类健康和养禽业造成了一定的威胁。论文总结了2016年至2017年7月H7N9亚型禽流感在人群和... 2013年,华东地区报告了全球首例H7N9亚型禽流感病例,引起了国内外广泛的关注。2016年以来,H7N9亚型禽流感病毒感染人和动物的数量大幅度增加,对人类健康和养禽业造成了一定的威胁。论文总结了2016年至2017年7月H7N9亚型禽流感在人群和家禽中的流行状况及其在全国家禽养殖和交易场所中的监测情况,分析了其流行特点,进一步从公共卫生学和家禽养殖等方面提出了防控策略,以期为当前我国H7N9亚型禽流感的防控提供参考。 展开更多
关键词 H7N9亚型禽流感 流行特点 防控策略
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