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线粒体载体同源蛋白2通过调控线粒体功能促进CAL-27细胞转移
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作者 郑深 刘辉 +2 位作者 武燃 邓云龙 张强 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第7期1308-1316,共9页
目的:探讨线粒体载体同源蛋白2(mitochondrial carrier homolog 2,MTCH2)对口腔鳞状细胞癌转移的影响及其作用机制。方法:选择人舌鳞癌细胞CAL-27作为研究对象,采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术和过表达质粒构建MTCH2敲... 目的:探讨线粒体载体同源蛋白2(mitochondrial carrier homolog 2,MTCH2)对口腔鳞状细胞癌转移的影响及其作用机制。方法:选择人舌鳞癌细胞CAL-27作为研究对象,采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术和过表达质粒构建MTCH2敲减和过表达模型,按照实验设计将细胞分为siRNA阴性对照(siRNA-NC)组、MTCH2 siRNA(siRNA-MTCH2)组、空载体阴性对照(OE-NC)组和MTCH2过表达(OE-MTCH2)组。应用Transwell实验和细胞划痕实验检测各组细胞侵袭和迁移能力;微丝红色荧光探针检测各组细胞纤维型肌动蛋白(F-actin)的表达情况;线粒体膜电位检测试剂盒检测各组细胞线粒体膜电位水平;活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测各组细胞ROS水平;三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)检测试剂盒检测各组细胞ATP生成水平;免疫荧光和Western blot检测各组细胞MTCH2和基质金属蛋白酶14(matrix metalloproteinase 14,MMP14)的蛋白表达水平。结果:siRNA-MTCH2组侵袭细胞数量显著减少,细胞迁移率明显降低,OE-MTCH2组侵袭细胞数量显著增多,细胞迁移率明显升高(P<0.01);siRNA-MTCH2组F-actin和MTCH2荧光强度显著降低,OE-MTCH2组F-actin和MTCH2荧光强度显著升高(P<0.01);siRNA-MTCH2组CAL-27细胞ROS水平较siRNA-NC组显著升高,而ATP和线粒体膜电位水平显著降低,OE-MTCH2组ROS水平较OE-NC组显著降低,ATP和线粒体膜电位水平显著升高(P<0.01);siRNA-MTCH2组CAL-27细胞MTCH2和MMP14蛋白表达水平较siRNA-NC组显著降低,OEMTCH2组MTCH2和MMP14蛋白表达水平较OE-NC组显著升高(P<0.01)。结论:MTCH2可通过调控线粒体功能和MMP14蛋白表达促进CAL-27细胞转移,MTCH2可能作为口腔癌治疗的新靶点。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 线粒体功能障碍 线粒体载体同源蛋白2 细胞侵袭 细胞迁移
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MCU通过LETM1维持线粒体钙稳态调节口腔鳞状细胞癌细胞转移 被引量:2
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作者 武燃 刘辉 +5 位作者 郑深 左伟文 毕磊 陈晖 张春光 许晓亮 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期411-416,共6页
目的:探讨线粒体钙离子单向转运蛋白(mitochondrial calcium uniporter,MCU)与亮氨酸拉链/EF跨膜蛋白-1(leucine zipper/EF hand-containing transmembrane-1,LETM1)在调控线粒体钙稳态机制中的作用以及对口腔鳞状细胞癌细胞转移的影响... 目的:探讨线粒体钙离子单向转运蛋白(mitochondrial calcium uniporter,MCU)与亮氨酸拉链/EF跨膜蛋白-1(leucine zipper/EF hand-containing transmembrane-1,LETM1)在调控线粒体钙稳态机制中的作用以及对口腔鳞状细胞癌细胞转移的影响。方法:选用口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞株作为研究对象,构建MCU慢病毒干扰载体和过表达质粒,合成LETM1 siRNA干扰序列。采用细胞划痕实验、Transwell细胞侵袭实验检测MCU表达水平对CAL-27细胞侵袭、迁移的影响;细胞内钙离子荧光探针(Fluo-4 AM)以及JC-1线粒体膜电位测定实验检测MCU表达水平对CAL-27细胞内钙离子浓度及线粒体膜电位的影响;免疫荧光和Western blot检测CAL-27细胞内MCU、LETM1以及上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白表达水平。结果:MCU过表达促进CAL-27细胞迁移和侵袭,MCU沉默组及MCU过表达联合LETM1 siRNA组细胞迁移和侵袭能力均明显受到抑制(F=45.302、1300.246;均P>0.05);MCU过表达组细胞内钙荧光强度和线粒体膜电位明显上调,MCU沉默组和MCU过表达联合LETM1 siRNA组细胞内钙荧光强度和线粒体膜电位水平均明显降低(F=75.585、141.767;均P<0.01);MCU过表达组MCU、LETM1、N-cadherin以及Vimentin蛋白表达水平明显升高,而E-cadherin蛋白表达水平明显降低;MCU沉默组MCU、LETM1、N-cadherin及Vimentin蛋白表达水平较其他处理组明显降低,而E-cadherin蛋白表达水平明显升高(均P<0.01)。结论:MCU可调控LETM1及EMT标志物的表达,干扰LETM1可阻断MCU上调线粒体钙离子浓度和线粒体膜电位水平,降低口腔鳞状细胞癌细胞侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 线粒体钙单向传递体 侵袭 迁移 上皮-间充质转化
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过表达miR-509对人舌鳞癌细胞SCC15纳武单抗敏感性的影响及机制研究
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作者 潘睿 韩炜 卢娜 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期93-97,共5页
目的:探讨miR-509对人舌鳞癌细胞SCC15纳武单抗敏感性的影响及机制。方法:纳入40例舌鳞癌患者的癌组织及癌旁组织,PCR法检测miR-509水平。取0~80μmol/L纳武单抗处理后以及分别转染miR-509 mimic和mimic NC的SCC15细胞,PCR法检测miR-50... 目的:探讨miR-509对人舌鳞癌细胞SCC15纳武单抗敏感性的影响及机制。方法:纳入40例舌鳞癌患者的癌组织及癌旁组织,PCR法检测miR-509水平。取0~80μmol/L纳武单抗处理后以及分别转染miR-509 mimic和mimic NC的SCC15细胞,PCR法检测miR-509水平、流式细胞仪检测细胞凋亡率、蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白。结果:癌组织中miR-509水平低于癌旁组织。细胞存活率随纳武单抗浓度的增加而降低(P<0.05)。与mimic-NC组比较,miR-509 mimic组miR-509表达水平、细胞凋亡率、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved caspase3)以及Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达升高,B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达降低(P<0.05)。结论:过表达miR-509增强SCC15细胞对纳武单抗的敏感性,可能是通过激活促凋亡蛋白表达,抑制抗凋亡蛋白表达发挥调控作用。 展开更多
关键词 舌鳞癌 纳武单抗 miR-509
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