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PERK通路在吗啡保护心肌H9c2细胞过程中的作用
被引量：
4
1
作者
赵苗
韩雅茹
+4 位作者
贺翼飞
付宇
刘宇琳
习瑾昆
贺永贵
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期9-16,共8页
目的:探讨吗啡(morphine)是否通过PERK通路降低内质网应激,阻止线粒体膜通透性转换孔(mPTP)开放,从而保护氧化应激损伤的心肌细胞。方法:体外培养大鼠心肌H9c2细胞,用H2O2建立氧化应激模型,随机分为对照组、H2O2组、H2O2+morphine组、H2...
目的:探讨吗啡(morphine)是否通过PERK通路降低内质网应激,阻止线粒体膜通透性转换孔(mPTP)开放,从而保护氧化应激损伤的心肌细胞。方法:体外培养大鼠心肌H9c2细胞,用H2O2建立氧化应激模型,随机分为对照组、H2O2组、H2O2+morphine组、H2O2+morphine+PERK通路抑制剂GSK2656157组、morphine组和GSK2656157组。免疫组化法检测吗啡对氧化应激引起葡萄糖调节蛋白(GRP)78和GRP94表达的影响;Western blot法检测PERK信号通路相关蛋白的水平;利用共聚焦显微镜观察吗啡对氧化应激所致mPTP开放及内质网的影响;乳酸脱氢酶(LDH)和MTT试剂盒分别检测细胞毒性和细胞活力。结果:与对照组相比,H2O2组GRP78和GRP94蛋白为强阳性表达,棕黄色颗粒明显增加,吗啡明显抑制此过程。与对照组相比,不同浓度GSK2656157使PERK的磷酸化明显减少,其中2μmol/L的作用效果最为显著(P<0.05)。氧化应激使GRP78、GRP94、p-PERK和CHOP的蛋白水平明显增加,使糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)磷酸化明显减少;线粒体TMRE和内质网ER-Tracker Red红色荧光强度均明显减少;细胞毒性明显增强,细胞活力明显减弱。吗啡明显抑制H2O2引起的改变,而GSK2656157可进一步加强吗啡的作用(P<0.05)。结论:吗啡通过抑制PERK通路降低内质网应激,使GSK-3β失活,进而阻止mPTP开放,保护受氧化应激损伤的心肌H9c2细胞。
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关键词
吗啡
心肌保护
氧化应激
内质网应激
PERK信号通路
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职称材料
题名
PERK通路在吗啡保护心肌H9c2细胞过程中的作用
被引量：
4
1
作者
赵苗
韩雅茹
贺翼飞
付宇
刘宇琳
习瑾昆
贺永贵
机构
华北理工大学附属医院华北理工大学临床医学院
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期9-16,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.NSFC81570275)
河北省自然科学基金资助项目(No.H2018209309)
+2 种基金
河北省高校百名优秀创新人才计划(No.SLRC2017051)
河北省高层次人才计划(No.A2017010069)
大学生创新性实验设计项目(No.X2017361)
文摘
目的:探讨吗啡(morphine)是否通过PERK通路降低内质网应激,阻止线粒体膜通透性转换孔(mPTP)开放,从而保护氧化应激损伤的心肌细胞。方法:体外培养大鼠心肌H9c2细胞,用H2O2建立氧化应激模型,随机分为对照组、H2O2组、H2O2+morphine组、H2O2+morphine+PERK通路抑制剂GSK2656157组、morphine组和GSK2656157组。免疫组化法检测吗啡对氧化应激引起葡萄糖调节蛋白(GRP)78和GRP94表达的影响;Western blot法检测PERK信号通路相关蛋白的水平;利用共聚焦显微镜观察吗啡对氧化应激所致mPTP开放及内质网的影响;乳酸脱氢酶(LDH)和MTT试剂盒分别检测细胞毒性和细胞活力。结果:与对照组相比,H2O2组GRP78和GRP94蛋白为强阳性表达,棕黄色颗粒明显增加,吗啡明显抑制此过程。与对照组相比,不同浓度GSK2656157使PERK的磷酸化明显减少,其中2μmol/L的作用效果最为显著(P<0.05)。氧化应激使GRP78、GRP94、p-PERK和CHOP的蛋白水平明显增加,使糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)磷酸化明显减少;线粒体TMRE和内质网ER-Tracker Red红色荧光强度均明显减少;细胞毒性明显增强,细胞活力明显减弱。吗啡明显抑制H2O2引起的改变,而GSK2656157可进一步加强吗啡的作用(P<0.05)。结论:吗啡通过抑制PERK通路降低内质网应激,使GSK-3β失活,进而阻止mPTP开放,保护受氧化应激损伤的心肌H9c2细胞。
关键词
吗啡
心肌保护
氧化应激
内质网应激
PERK信号通路
Keywords
Morphine
Myocardial protection
Oxidative stress
Endoplasmic reticulum stress
PERK signaling pathway
分类号
R363.2 [医药卫生—病理学]
R542.2 [医药卫生—心血管疾病]
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出处
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被引量
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1
PERK通路在吗啡保护心肌H9c2细胞过程中的作用
赵苗
韩雅茹
贺翼飞
付宇
刘宇琳
习瑾昆
贺永贵
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
4
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