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RECK与MMP-9在人骨肉瘤组织中的表达及相关性分析 被引量:1
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作者 付文娟 董桂兰 +2 位作者 孙芳初 王连立 郭静 《中国医药导报》 CAS 2016年第33期16-20,F0003,共6页
目的探讨伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)与基质金属蛋白酶9(MMP-9)在人骨肉瘤组织中的表达及相关性。方法选取唐山市人民医院2001年1月~2010年12月临床及病理资料完整存档的人骨肉瘤组织标本34例为观察组,另取临床及病... 目的探讨伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)与基质金属蛋白酶9(MMP-9)在人骨肉瘤组织中的表达及相关性。方法选取唐山市人民医院2001年1月~2010年12月临床及病理资料完整存档的人骨肉瘤组织标本34例为观察组,另取临床及病理资料完整存档的骨软骨瘤组织标本34例为对照组,采用免疫组织化学法检测RECK和MMP-9,采用定量PCR法检测RECK和MMP-9的mRNA,并分析指标相关性。结果观察组RECK阳性率(58.8%)低于对照组(91.2%),而MMP-9阳性率(64.7%)高于对照组(11.8%),差异有统计学意义(P<0.05)。RECK阳性率、RECK的mRNA表达、MMP-9阳性率、MMP-9的mRNA表达在年龄、性别、病发部位方面比较,差异无统计学意义(P>0.05)。RECK阳性率、RECK的mRNA表达、MMP-9阳性率、MMP-9的mRNA表达在转移、复发以及生存时间方面比较,差异有统计学意义(P<0.05)。RECK与人骨肉瘤组织呈明显负相关(r=-0.561,P=0.000)。MMP-9与人骨肉瘤组织呈明显正相关(r=0.613,P=0.000)。结论 RECK可抑制MMP-9表达,发挥抑癌作用,有望成为未来诊断以及治疗人骨肉瘤的潜在靶标。 展开更多
关键词 伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白 基质金属蛋白酶9 人骨肉瘤 相关性
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QDPR基因表达水平对肾小管上皮细胞系NRK-52E细胞DHFR表达的影响 被引量:1
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作者 杨向君 蒲志杰 +6 位作者 孟令宇 马艳红 何海兰 熊浩 吴雪静 张浩军 李治国 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第5期460-464,共5页
目的 OLETF大鼠醌式二氢生物喋呤还原酶(Quinoid dihydropteridine reductase,QDPR)存在K93T点突变,QDPR催化醌型二氢生物喋呤还原成四氢生物喋呤(tetrahydrobiopterin,BH4);二氢叶酸还原酶(dihydrofolate reductase,DHFR)能将二氢喋呤... 目的 OLETF大鼠醌式二氢生物喋呤还原酶(Quinoid dihydropteridine reductase,QDPR)存在K93T点突变,QDPR催化醌型二氢生物喋呤还原成四氢生物喋呤(tetrahydrobiopterin,BH4);二氢叶酸还原酶(dihydrofolate reductase,DHFR)能将二氢喋呤还原成BH4,提示生物喋呤代谢与叶酸代谢通路之间有串扰。文中通过研究QDPR基因表达水平对肾小管上皮NRK-52E细胞DHFR表达的影响,探讨QDPR基因在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)中的作用机制。方法 Western blot检测高糖环境下NRK-52E细胞及OLETF大鼠DHFR蛋白表达情况。利用慢病毒技术感染NRK-52E细胞,制作空载过表达、过表达QDPR敲低随机序列对照和敲低QDPR模型。每组再分别给予5.4 mmol/L正常糖培养基和30 mmol/L高糖培养基培养细胞72 h,模拟DN模型。实验分组:NRK-52E对照组、NRK-52E高糖组、空载过表达病毒对照组、空载过表达病毒高糖组、QDPR基因过表达组、QDPR基因过表达高糖组、敲低随机序列对照组、敲低随机序列高糖组、QDPR基因敲低组、QDPR基因敲低高糖组。观察高糖环境QDPR基因的表达情况对DHFR蛋白表达水平的影响。结果 NRK-52E高糖组DHFR蛋白含量(0.33±0.16)低于NRK-52E对照组(0.64±0.05),差异有统计学意义(P<0.05);OLETF大鼠DHFR蛋白的表达水平(1.03±0.12)明显低于LETO大鼠的表达水平(1.56±0.16),差异有统计学意义(P<0.01)。与空载过表达病毒高糖组(0.63±0.08)相比,QDPR基因过表达高糖组DHFR蛋白含量(0.12±0.09)降低,差异有统计学意义(P<0.01);与敲低随机序列对照组(0.52±0.08)相比,QDPR基因敲低高糖组DHFR表达量(0.62±0.27)差异无统计学意义(P>0.05)。结论DHFR蛋白在DN的发生发展中可能起到重要作用,QDPR基因过表达使DHFR蛋白表达含量下降,QDPR基因过表达通过下调DHFR蛋白的表达水平进而影响DN的发展。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 二氢生物喋呤还原酶 二氢叶酸还原酶 肾小管上皮细胞
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食品级纳米二氧化硅对小鼠器官功能影响的研究 被引量:1
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作者 刘嘉褀 候晓敏 +2 位作者 彭子荷 刘和亮 郝小惠 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第13期292-296,共5页
目的:通过测定小鼠连续性口服食品级纳米二氧化硅(Nano silicon dioxide,Nano-SiO_2)12周后血清及肝、肾、睾丸组织中硅元素的含量,并对小鼠肝肾等器官进行观察,初步评价纳米二氧化硅对机体的安全性。方法:将雄性昆明小鼠随机分为对照组... 目的:通过测定小鼠连续性口服食品级纳米二氧化硅(Nano silicon dioxide,Nano-SiO_2)12周后血清及肝、肾、睾丸组织中硅元素的含量,并对小鼠肝肾等器官进行观察,初步评价纳米二氧化硅对机体的安全性。方法:将雄性昆明小鼠随机分为对照组(0.05%BSA)、纳米SiO_2低剂量组(100 mg/kg/day)、中剂量组(500 mg/kg/day)、高剂量组(1000 mg/kg/day)和微米SiO_2组(1000 mg/kg/day),各组按上述剂量分别连续灌胃二氧化硅84 d后全部处死,利用HE染色观察各组动物的肝脏、肾脏、睾丸等组织病理学变化;ICP-OES检测血清及肝、肾、睾丸组织中硅元素的含量;检测各组动物血清中的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和尿素氮(BUN)的含量。结果:病理学观察在纳米低、中、高剂量组均发现肝脏、肾脏和睾丸组织有形态上的异常改变,以高剂量组更严重;纳米组血清中ALT、AST和BUN的含量均显著增高(p<0.01或p<0.05);同时在血清及肝、肾、睾丸组织中纳米组的硅离子含量增高并呈现剂量依赖性;上述指标中同等剂量纳米组和微米组相比,纳米组含量高且病理变化更明显。结论:较长时间口服摄入食品级纳米二氧化硅可能在机体的肝脏、肾脏、睾丸等脏器内蓄积,造成一定程度的肝脏、肾脏等的病理学损害并影响其功能。长期多量食入纳米二氧化硅可能会对机体造成不良影响。 展开更多
关键词 食品添加剂 纳米二氧化硅 ICP-OES 谷草转氨酶 谷丙转氨酶
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肝激酶B1过表达对人甲状腺乳头状癌K1细胞增殖及转移的影响 被引量:2
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作者 黄志强 曹文斌 +4 位作者 葛志鹏 田炜 张琪 程文炜 张国志 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第9期36-38,共3页
目的探讨肝激酶B1(LKB1)过表达对人甲状腺乳头状癌K1细胞增殖及转移的影响。方法将培养好的甲状腺乳头状癌K1细胞随机分为空白组、阴性对照组和实验组,将空载病毒、LKB1重组真核体分别转染入阴性对照组、实验组,空白组不做任何处理。RT-... 目的探讨肝激酶B1(LKB1)过表达对人甲状腺乳头状癌K1细胞增殖及转移的影响。方法将培养好的甲状腺乳头状癌K1细胞随机分为空白组、阴性对照组和实验组,将空载病毒、LKB1重组真核体分别转染入阴性对照组、实验组,空白组不做任何处理。RT-PCR技术检测各组LKB1 mRNA表达,Western blotting法检测细胞内LKB1蛋白表达,用MTT法检测细胞增殖能力(OD值),用Transwell侵袭试验检测细胞转移能力,流式细胞术检测细胞周期分布。结果实验组LKB1 mRNA、蛋白相对表达量高于阴性对照组、空白组(P均<0.05)。转染72 h,继续培养24、48、72、96 h实验组OD值低于阴性对照组、空白组(P均<0.05)。转染24 h,实验组穿膜细胞数少于阴性对照组、空白组(P均<0.05)。转染24 h,与阴性对照组、空白组比较,实验组G0/G1期细胞增多,S期、G2/M期细胞减少(P均<0.05)。结论 LKB1过表达能抑制人甲状腺乳头状癌K1细胞增殖、转移。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 甲状腺乳头状癌 肝激酶B1 细胞增殖 细胞转移 细胞周期
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糖代谢在月经病寒证证候研究中的意义 被引量:3
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作者 徐丁洁 徐洪 +5 位作者 董玉山 杜晨光 曹颖 白素芬 柳月娟 杜惠兰 《中国医药导报》 CAS 2016年第10期66-68,99,共4页
寒证为八纲之一,而月经病寒证是临床较为多见的病证之一,其主要病因为感受寒邪。目前对月经病寒证发生机制的研究多集中于盆腔微循环、能量代谢、免疫功能等系统,糖代谢是能量代谢的核心组成部分,已有研究证实,寒冷刺激下会引起糖代谢... 寒证为八纲之一,而月经病寒证是临床较为多见的病证之一,其主要病因为感受寒邪。目前对月经病寒证发生机制的研究多集中于盆腔微循环、能量代谢、免疫功能等系统,糖代谢是能量代谢的核心组成部分,已有研究证实,寒冷刺激下会引起糖代谢的异常,而胰岛素的主要信号通路PI3K-Akt通路参与了糖代谢的病理生理机制。本文通过总结月经病寒证的生物学机制,分析糖代谢及PI3K-Akt通路在其中的作用,希望对今后的研究提供新思路。 展开更多
关键词 月经病 寒证 糖代谢 PI3K-AKT
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动式染尘构建矽肺大鼠模型及ACE2-Ang(1-7)-Mas轴动态变化规律 被引量:8
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作者 高学敏 耿玉聪 +8 位作者 李世峰 魏中秋 张博男 张丽娟 刘燕 王小君 徐洪 徐丁洁 杨方 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第12期1276-1280,共5页
目的肾素-血管紧张素系统(renin-angiotesin system,RAS)与肺纤维化的发生发展密切相关,文中拟观察RAS系统重要靶向轴血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)2-血管紧张素(angiotensin,Ang)(1-7)-Mas轴在动式染尘法矽肺... 目的肾素-血管紧张素系统(renin-angiotesin system,RAS)与肺纤维化的发生发展密切相关,文中拟观察RAS系统重要靶向轴血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)2-血管紧张素(angiotensin,Ang)(1-7)-Mas轴在动式染尘法矽肺大鼠模型中动态变化规律。方法实验分为对照组以及染尘2、4、8、16、24周组,每组10只。实验组采用HOPE-MED8050动式染尘控制系统构建大鼠矽肺模型,分别染尘2、4、8、16、24周。对照组未行染尘处理。采用HE、Masson染色观察病理形态;免疫组化染色检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、波形蛋白(vimentin)、ACE2在肺组织中的定位和表达;Western blot法检测肺组织I型胶原、α-SMA、vimentin、ACE2和Mas的表达;ELISA检测肺组织中Ang(1-7)的含量。结果 HE、Masson染色结果显示染尘8周可出现细胞性矽结节,染尘16周可出现多个结节的融合,至染尘24周时可出现细胞纤维性结节。免疫组化染色结果显示,ACE2主要定位于支气管纤毛上皮细胞、肺泡上皮细胞,而在矽结节中ACE2表达明显减弱。Western blot结果显示,与对照组Ⅰ型胶原(0.05±0.01)、α-SMA(0.03±0.01)比较,染尘2、4、8、16、24周组Ⅰ型胶原(0.11±0.01,0.22±0.02,0.42±0.01,0.90±0.03,1.48±0.02)、α-SMA表达(0.08±0.01,0.17±0.02,0.28±0.01,0.43±0.01,0.42±0.01)均明显升高(P<0.05),染尘8、16、24周Vimentin表达明显升高(P<0.05)。与对照组比较,染尘4、8、16、24周组ACE2表达降低(P<0.05),染尘2、4、8、16、24周Mas表达降低(P<0.05)。ELISA法检测肺组织中Ang(1-7)含量结果显示,随着染尘时间的延长Ang(1-7)的表达逐渐降低。结论动式染尘能够构建矽肺大鼠模型,而ACE2-Ang(1-7)-Mas轴表达水平下调参与了矽肺大鼠纤维化的进展。 展开更多
关键词 矽肺病 动式染尘 血管紧张转换酶2 血管紧张素(1-7) MAS受体
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癌易感性候选基因2通过NF-κB信号通路对甲状腺乳头状癌细胞增殖及迁移的影响 被引量:5
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作者 张洁 孙国欣 +6 位作者 戴亮 马煜 孙雅涵 王岚玉 田炜 张国志 陈建立 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第10期1043-1048,共6页
目的在甲状腺乳头状癌细胞中lncRNA癌易感性候选基因2(CASC2)与NF-κB信号通路的关系研究较少。文中旨在探讨lncRNA CASC2a通过NF-κB信号通路对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1增殖、迁移的影响。方法选取TPC-1,构建lncRNA CASC2a过表达质粒,... 目的在甲状腺乳头状癌细胞中lncRNA癌易感性候选基因2(CASC2)与NF-κB信号通路的关系研究较少。文中旨在探讨lncRNA CASC2a通过NF-κB信号通路对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1增殖、迁移的影响。方法选取TPC-1,构建lncRNA CASC2a过表达质粒,分为质粒组[转染过表达质粒pcDNA3.1(+)-CASC2a]、空载组[转染等量pcDNA3.1(+)空载质粒]、空白组(未做任何处理)。检测过表达lncRNA CASC2a对各组TPC-1细胞中CASC2a表达的影响。选取转染后的质粒组细胞,随机分为转染组[只转染过表达质粒pcDNA3.1(+)-CASC2a]、转染+PMA组[转染过表达质粒pcDNA3.1(+)-CASC2a+丙二醇甲醚醋酸酯(PMA)刺激]、对照组(未做任何处理)、PMA组(只增加PMA刺激),通过CCK-8、细胞划痕实验验证24、48、72、96 h时lncRNA CASC2a对细胞增殖、迁移能力的影响。Western blot检测NF-κB信号通路相关抗体蛋白p105/p50、p65的表达,并通过给与NF-κB信号通路激动剂PMA观察NF-κB信号通路相关抗体蛋白p105/p50、p65的表达情况。结果转染过表达质粒pcDNA3.1(+)-CASC2a后,质粒组细胞中CASC2a的表达量明显高于空载组(P<0.05)。转染+PMA组24 h时细胞增殖能力(0.191±0.005)明显低于转染组(0.217±0.013)、PMA组(0.247±0.009)、对照组(0.260±0.004),差异有统计学意义(P<0.01);转染组亦明显低于PMA组和对照组(P<0.01)。转染+PMA组的细胞迁移能力([0.208±0.109)%]低于转染组([1.775±0.061)%]、PMA组([1.622±0.519)%]、对照组([2.927±0.136)%],差异有统计学意义(P<0.05),转染组、PMA组低于对照组(P<0.05)。质粒组p105/p50、p65蛋白相对表达量明显低于空白组(P<0.05)。转染+PMA组p105/p50、p65蛋白表达量([0.674±0.007)、(0.713±0.014)]较转染组([0.581±0.003)、(0.570±0.012)]明显增加(P<0.05)。结论lncRNA CASC2a可能通过NF-κB信号通路抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖和迁移能力。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 癌易感性候选基因2 甲状腺乳头状癌 NF?κB信号通路 丙二醇甲醚醋酸酯 细胞增殖
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辛伐他汀与阿仑膦酸钠对去卵巢大鼠骨丢失及力学性能退变干预效果的比较 被引量:5
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作者 张岩 刘昊 +3 位作者 邢磊 张国彬 贾忠宝 田发明 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第4期375-379,共5页
目的阿仑磷酸钠是目前一线抗骨质疏松药物,辛伐他汀作为降脂类药物因表现出促骨形成作用潜能而备受关注,文中旨在比较辛伐他汀与阿仑膦酸钠对卵巢切除大鼠骨丢失的作用。方法 6月龄SD大鼠32只,随机数字表法分为假手术组、模型组、辛伐... 目的阿仑磷酸钠是目前一线抗骨质疏松药物,辛伐他汀作为降脂类药物因表现出促骨形成作用潜能而备受关注,文中旨在比较辛伐他汀与阿仑膦酸钠对卵巢切除大鼠骨丢失的作用。方法 6月龄SD大鼠32只,随机数字表法分为假手术组、模型组、辛伐他汀组和阿仑膦酸钠组,每组8只。假手术组:只暴露卵巢,不予切除,直接缝合;其余大鼠接收双侧卵巢切除术。模型组术后给予双蒸水;辛伐他汀组:10 mg/m L辛伐他汀溶于双蒸水制成混悬液,给药剂量5 mg/(kg·d)灌胃;阿仑膦酸钠组:25μg/m L阿仑膦酸钠溶液,皮下注射,每周70μg/kg。以上干预措施持续12周,3个月后处死大鼠。ELISA法分析血清Ⅰ型前胶原氨基端前肽(procollagen typeⅠN-terminal propeptide,PINP)、Ⅰ型胶原羧基端交联端肽(cross-linked Ctelopeptides of Type I collagen,ICTP)含量,双能X线法检测大鼠第4腰椎骨密度、骨组织形态计量学分析其松质骨骨量和微观结构,取第5腰椎行压缩试验,分析其最大载荷、弹性模量等生物力学性能。结果血清学指标:假手术组PINP、ICTP血清水平均显著低于其余3组(P<0.05),阿仑膦酸钠组ICTP水平低于模型组和辛伐他汀组(P<0.05)。骨密度:模型组骨密度[(0.238±0.007)g/cm^2]低于假手术组[(0.276±0.015)g/cm^2]、辛伐他汀组[(0.250±0.014)g/cm^2]、阿仑膦酸钠组[(0.269±0.014)g/cm^2],差异均有统计学意义(P<0.05),辛伐他汀组显著低于假手术和阿仑膦酸钠组(P<0.05),假手术组与阿仑膦酸钠组比较的差异无统计学意义(P>0.05)。骨组织形态计量学分析:模型组骨小梁相对体积[(19.90±1.69)%]显著低于假手术组[(29.03±2.59)%]和阿仑膦酸钠组[(27.05±1.91)%],差异有统计学意义(P<0.05),骨小梁分离度[(357.33±26.55)μm]显著高于假手术组[(211.17±16.56)μm]和阿仑膦酸钠组[(252.50±19.35)μm],差异有统计学意义(P<0.05)。生物力学性能:模型组最大载荷和弹性模量均显著低于其余各组(P<0.05)。结论辛伐他汀和阿仑膦酸钠均可抑制卵巢切除大鼠骨量丢失,两者对该模型生物力学性能的维持作用无显著区别,但后者维持骨密度的作用更加显著。 展开更多
关键词 卵巢切除 辛伐他汀 阿仑磷酸钠 骨密度 生物力学
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FOXQ1基因调控甲状腺乳头癌TPC-1细胞上皮-间质转化的机制研究 被引量:5
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作者 刘春辉 钟烨 +5 位作者 曹文斌 王晓涛 陈建立 王长友 田炜 张国志 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第11期1145-1151,共7页
目的在甲状腺乳头状癌中沉默叉头框Q1(Forkhead box Q1,FOXQ1)呈异常高表达状态且与肿瘤的恶性行为呈正相关,文章探讨了FOXQ1对甲状腺乳头癌TPC-1细胞的上皮间质化(EMT)的作用及其与转化生长因子-β1(TGF-β1)之间的关系。方法通过脂质... 目的在甲状腺乳头状癌中沉默叉头框Q1(Forkhead box Q1,FOXQ1)呈异常高表达状态且与肿瘤的恶性行为呈正相关,文章探讨了FOXQ1对甲状腺乳头癌TPC-1细胞的上皮间质化(EMT)的作用及其与转化生长因子-β1(TGF-β1)之间的关系。方法通过脂质体lipofectamine TM 2000将小干扰siRNA转染甲状腺乳头癌TPC-1细胞,并分为3组:空白对照组、阴性对照组(NC-siRNA组)和干扰组(FOXQ1-siRNA组);采用qRT-PCR和Western blot法分别检测细胞中的FOXQ1 mRNA和蛋白的相对表达量;肿瘤细胞黏附实验观察体外细胞黏附能力的变化,利用Western blot检测细胞中上皮间质标志性蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的相对表达量变化。用TGF-β1(终浓度5 ng/mL)首先诱导TPC-1细胞48 h后,然后再分别诱导NC-siRNA组和FOXQ1-siRNA组的细胞;Transwell小室法检测细胞体外侵袭及迁移的能力的变化;Western blot观察诱导前后E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、FOXQ1的蛋白表达差异。结果与空白对照组和阴性对照组相比,干扰组有效地沉默TPC-1细胞中FOXQ1的表达(P<0.01);细胞的黏附能力明显受到抑制(P<0.05),干扰组细胞中E-cadherin蛋白表达升高,而N-cadherin和Vimentin的蛋白表达下调(P<0.01);TGF-β1诱导48 h后,抑制E-cadherin表达表达,促进N-cadherin和Vimentin的蛋白的表达(P<0.05);沉默FOXQ 1基因后,与NC-siRNA组细胞穿透数[(39.67±6.93)个]相比,NC-siRNA+TGF-β1组中[(58.62±6.92)个]明显增多(P<0.05);而FOXQ1-siRNA+TGF-β1组细胞穿透数[(22.32±5.37)个]较NC-siRNA+TGF-β1组明显减少(P<0.01)。结论沉默FOXQ 1基因可逆转TPC-1细胞的EMT和侵袭迁移能力,这一作用可能受TGF-β1信号通路的调控,表明靶向转录因子FOXQ1可能是PTC患者一种新型的疗法。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 FOXQ1 转化生长因子-β1(TGF-β1) 上皮间质转化
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沉默ADAM17蛋白对人结肠癌HT29细胞增殖能力的影响及机制探讨 被引量:4
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作者 张琪 杨光华 +4 位作者 刘少鹏 丁家杉 韩学超 张国志 王长友 《山东医药》 CAS 2018年第18期5-7,共3页
目的观察沉默解整合素样金属蛋白酶17(ADAM17)表达对结肠癌HT29细胞增殖的影响,并探讨其可能的机制。方法将HT29细胞分为3组,沉默组和阴性对照组分别转染ADAM17小干扰RNA(ADAM17-shRNA)及对照序列(nonsense shRNA),空白对照组加入等量P... 目的观察沉默解整合素样金属蛋白酶17(ADAM17)表达对结肠癌HT29细胞增殖的影响,并探讨其可能的机制。方法将HT29细胞分为3组,沉默组和阴性对照组分别转染ADAM17小干扰RNA(ADAM17-shRNA)及对照序列(nonsense shRNA),空白对照组加入等量PBS;转染后48 h,采用real-time PCR法检测细胞ADAM17mRNA,CCK-8法观察细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Western blotting法检测细胞周期相关蛋白细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21。结果转染48 h,与阴性对照组和空白对照组比较,沉默组细胞ADAM17 mRNA及蛋白表达减少,细胞增殖率下降,G0/G1期细胞比例增多,G2/M期细胞比例降低,cyclin D1蛋白表达降低,p21蛋白表达升高(P均<0.01)。结论沉默ADAM17蛋白可抑制结肠癌HT29细胞增殖,可能与其影响细胞周期蛋白cyclin D1、p21表达从而调控细胞周期有关。 展开更多
关键词 结肠癌 解整合素样金属蛋白酶17 细胞增殖 细胞周期 细胞周期蛋白D1 P21蛋白
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FOXQ1-siRNA对甲状腺乳头癌TPC-1细胞侵袭迁移的影响及其机制 被引量:3
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作者 钟烨 杨光华 +3 位作者 肖童 王晓涛 田炜 张国志 《山东医药》 CAS 2018年第13期9-12,共4页
目的探讨叉头框Q1(FOXQ1)-siRNA对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞侵袭迁移能力的影响及其相关机制。方法通过LipofectamineTM2000将FOXQ1-siRNA和无意义序列siRNA分别转入TPC-1细胞,分别作为实验组和无义序列组,空白组不给予任何处理。转染成... 目的探讨叉头框Q1(FOXQ1)-siRNA对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞侵袭迁移能力的影响及其相关机制。方法通过LipofectamineTM2000将FOXQ1-siRNA和无意义序列siRNA分别转入TPC-1细胞,分别作为实验组和无义序列组,空白组不给予任何处理。转染成功后,利用qRT-PCR和Western blotting法分别检测FOXQ1 mRNA和蛋白的表达水平,采用Western blotting法检测TPC-1细胞中磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、基质金属蛋白酶7、9(MMP7、MMP9)的表达水平。转染48 h,采用Transwell小室试验观察细胞体外的侵袭、迁移能力。结果与空白组和无义序列组相比,实验组中FOXQ1 mRNA和蛋白的相对表达水平降低(P均<0.05);实验组中p-AKT、MMP7及MMP9蛋白的相对表达水平低于空白组和无义序列组(P均<0.05)。转染48 h,实验组中穿过小室膜的细胞数低于空白组和无义序列组(P均<0.05)。结论 FOXQ1-siRNA可抑制TPC-1细胞的侵袭迁移,这一作用可能是通过抑制PI3K/AKT信号通路实现。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 甲状腺乳头状癌 叉头框Q1 微小RNA 细胞侵袭 细胞迁移
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沉默ADAM17基因对人甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响 被引量:3
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作者 葛志鹏 张博 +4 位作者 王晓涛 黄志强 张琪 田炜 张国志 《山东医药》 CAS 2018年第10期9-12,共4页
目的研究靶向沉默解聚素-金属蛋白酶-17(ADAM17)基因对人甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法取人甲状腺乳头状癌K1细胞,分为空白对照组、无意义序列组、转染组,转染组、无意义序列组分别用整合有ADAM17-shRNA、无意义序列-... 目的研究靶向沉默解聚素-金属蛋白酶-17(ADAM17)基因对人甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法取人甲状腺乳头状癌K1细胞,分为空白对照组、无意义序列组、转染组,转染组、无意义序列组分别用整合有ADAM17-shRNA、无意义序列-shRNA的慢病毒转染,空白对照组加入等量PBS液。采用RT-PCR方法检测各组ADAM17 mRNA相对表达量,Western blotting法测定ADAM17蛋白相对表达量,MTT法评估细胞增殖能力,流式细胞仪测定细胞周期,Transwell迁移和侵袭实验观察细胞的迁移及侵袭能力。结果与空白对照组、无意义序列组对比,转染组ADAM17 mRNA及蛋白的相对表达量均降低(P均<0.05);转染组在培养24、48、72 h时的细胞增殖OD值均低于空白对照组、无意义序列组(P均<0.05);与空白对照组和无意义序列组比较,转染组细胞周期中G0/G1期细胞所占百分比升高(P均<0.05);与空白对照组、无意义序列组相比,转染组Transwell迁移及侵袭实验穿膜细胞数目减少(P均<0.05)。结论靶向沉默ADAM17基因可抑制K1细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 解聚素-金属蛋白酶17 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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SNP位点rs6983267相关非编码RNAG/U对结肠癌细胞转移活性的影响 被引量:2
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作者 蔡文臣 郝小惠 +3 位作者 沈阳丽 孟晨雪 田洁 郭志义 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第45期9-11,共3页
目的探讨染色体8q24区域中单核苷酸多态性(SNP)位点rs6983267相关非编码RNA G/U对结肠癌细胞转移活性的影响。方法运用生物信息学方法分析SNP rs6983267位点的非编码RNA;收集KM12C和KM12SM细胞,提取细胞总RNA,逆转录和PCR扩增,片段回收... 目的探讨染色体8q24区域中单核苷酸多态性(SNP)位点rs6983267相关非编码RNA G/U对结肠癌细胞转移活性的影响。方法运用生物信息学方法分析SNP rs6983267位点的非编码RNA;收集KM12C和KM12SM细胞,提取细胞总RNA,逆转录和PCR扩增,片段回收后用Tsp45Ⅰ进行酶切,对酶切(酶切组)和不做酶切(对照组)的模板做PCR扩增分析。通过限制性内切酶-PCR方法检测两组SNP rs6983267位点的非编码RNA G/U相对表达量;KM12C和KM12SM细胞分别进行p GL3-Gs-LUC(p GL3-Gs-LUC组)、p GL3-Ts-LUC(p GL3-Ts-LUC组)和p GL3-Basic-LUC质粒转染,应用双荧光素酶报告基因方法检测两组KM12C和KM12SM细胞中rs6983267非编码RNA启动子活性。结果 ENCODE数据库显示,染色体8q24区域SNP rs6983267位点附近存在非编码基因。KM12C细胞中酶切组、对照组SNP rs6983267位点相关非编码RNA G/U为0.80±0.10、5.60±1.30,KM12SM细胞中分别为0.71±0.09、1.43±0.11。与对照组比较,KM12C细胞中酶切组SNP rs6983267位点相关非编码RNA G/U差异无统计学意义(P﹥0.05),KM12SM细胞中升高(P<0.05)。KM12C细胞中,p GL3-Gs-LUC组、p GL3-TsLUC组rs6983267位点相关G型与T型非编码RNA启动子相对活性分别为0.81±0.14、0.82±0.25,KM12SM细胞中分别为1.00±0.26、1.85±0.58。在KM12SM细胞中,两组比较,P<0.05;在KM12C细胞中,两组比较,P﹥0.05。结论 SNP rs6983267位点相关非编码RNA G/U可能与结肠癌细胞的转移活性相关。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 肿瘤转移 单核苷酸多态性 rs6983267 非编码基因
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Ac-SDKP调控Gαs/Gαi信号抑制大鼠矽肺纤维化的作用 被引量:6
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作者 刘燕 耿玉聪 +5 位作者 徐洪 张丽娟 王建辉 王瑞雪 胡启峰 杨方 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期24-28,共5页
目的观察N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)能否通过调控激动型G蛋白α(Gαs)/抑制型G蛋白α(Gαi)信号对大鼠矽肺纤维化发挥保护作用。方法雄性Wistar大鼠随机分为3组(n=10):对照16周组,矽肺模型16周组,Ac-SDKP预防治... 目的观察N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)能否通过调控激动型G蛋白α(Gαs)/抑制型G蛋白α(Gαi)信号对大鼠矽肺纤维化发挥保护作用。方法雄性Wistar大鼠随机分为3组(n=10):对照16周组,矽肺模型16周组,Ac-SDKP预防治疗组。采用HE染色观察肺组织病理形态的改变,Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、纤连蛋白(Fn)、Gαs、Gαi2、Gαi3和环磷酸腺苷(cAMP)的含量,采用免疫荧光染色检测矽肺组织α-SMA/Gαi3的共表达。结果在矽肺模型16周组,HE染色显示肺组织内出现多个细胞性结节的融合和间质纤维化的形成,并可见细胞纤维性结节的形成。免疫荧光化学染色显示在纤维化病变区域α-SMA/Gαi3共表达增强。与对照组比较,矽肺模型16周组α-SMA、CollagenⅠ、Fn、Gαi2及Gαi3的蛋白表达明显升高,Gαs和cAMP的表达明显下降;与矽肺模型16周组相比,Ac-SDKP预防治疗组肺组织病理损伤减轻,α-SMA/Gαi3共表达减少,α-SMA、CollagenⅠ、Fn、Gαi2及Gαi3的蛋白表达显著降低,Gαs和cAMP的表达明显升高。结论 Ac-SDKP能够通过调节Gαs、Gαi促进cAMP的生成对矽肺大鼠肺纤维化产生保护作用。 展开更多
关键词 N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸 矽肺病 环磷酸腺苷 激动型G蛋白α/抑制性G蛋白α
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沉默FOXQ1基因对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 钟烨 刘春辉 +4 位作者 苏军涛 刘洋 田炜 王晓涛 张国志 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第1期64-68,共5页
目的 FOXQ1基因在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中呈现高表达,有关FOXQ1在PTC的生物学功能尚不清楚。文中旨在探讨FOXQ1-siRAN对PTC的TPC-1细胞增殖的影响及其可能的机制。方法通过lipofectamineTM2000将3条人工合成的FOXQ1-siRNA和NC-siRNA... 目的 FOXQ1基因在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中呈现高表达,有关FOXQ1在PTC的生物学功能尚不清楚。文中旨在探讨FOXQ1-siRAN对PTC的TPC-1细胞增殖的影响及其可能的机制。方法通过lipofectamineTM2000将3条人工合成的FOXQ1-siRNA和NC-siRNA分别转入到PTC的TPC-1细胞,实验分为空白对照组(加入等量的磷酸盐缓冲液PBS)、NC-siRAN组(转染无意义序列siRNA)、FOXQ1-1组(空白培养基+lipofectamineTM2000+FOXQ1-1)、FOXQ1-2组(空白培养基+lipofectamineTM2000+FOXQ1-2)、FOXQ1-3组(空白培养基+lipofectamineTM2000+FOXQ1-3)。利用qRT-PCR和Western blot法分别检测FOXQ1 mRNA和蛋白的表达水平,MTT法观察细胞增殖活性的变化,qRT-PCR和Western blot分别检测细胞中细胞周期蛋白(cyclin D1)和c-Myc的表达水平。结果与空白对照组、NC-siRNA组FOXQ1 mRNA相对表达量比较,FOXQ1-3组明显抑制FOXQ1mRNA的表达(P<0.05)。FOXQ1-1组、FOXQ1-2组、FOXQ-3组的FOXQ1蛋白相对表达量(0.54±0.07、0.40±0.07、0.26±0.06)较NC-siRNA组(0.78±0.08)明显降低,FOXQ1-3组下降最为明显(P<0.05)。MTT结果显示,与空白对照组、NC-siRAN组比较,FOXQ1-3组可明显抑制TPC-1细胞的增殖活性(P<0.05)。FOXQ1-3组c-Myc、cyclin D1蛋白表达量(0.57±0.04、0.51±0.10)较空白对照组(1.05±0.07、0.94±0.12)、NC-siRNA组(0.92±0.06、0.91±0.11)明显降低(P<0.05)。结论沉默FOXQ1基因可以有效地抑制PTC的TPC-1细胞的增殖活性,这一作用可能通过抑制cyclin D1和c-Myc的表达水平来实现的。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 FOXQ1 SIRNA 增殖
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辛伐他汀对去势大鼠椎体骨量及椎间盘退变的作用 被引量:2
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作者 田发明 李舒扬 +3 位作者 骆阳 杨凯 王文雅 张柳 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第2期127-131,共5页
目的辛伐他汀作为降脂类药物表现出一定的促进骨形成作用。文中旨在探讨辛伐他汀对卵巢切除大鼠椎体骨的骨量、微观结构以及椎间盘退变的作用。方法所有大鼠采用随机数字表法分为3组:假手术组,模型组、辛伐他汀组,每组10只。假手术组切... 目的辛伐他汀作为降脂类药物表现出一定的促进骨形成作用。文中旨在探讨辛伐他汀对卵巢切除大鼠椎体骨的骨量、微观结构以及椎间盘退变的作用。方法所有大鼠采用随机数字表法分为3组:假手术组,模型组、辛伐他汀组,每组10只。假手术组切开暴露卵巢,但不予切除;其余2组大鼠均行双侧卵巢切除术,并分别灌胃给予等渗盐水和辛伐他汀干预(10 mg/m L)溶于双蒸水制成混悬液,给药剂量5 mg/(kg·d)。取大鼠L3椎体行micro-CT分析其微观结构,取L5-6椎体,双能X线检测其骨密度后常规脱钙包埋,制备切片并行VG染色,经组织学观察和半定量评分评估L5-6椎间盘退变情况。结果与假手术组L5、L6、L5-6骨密度[(0.2933±0.011 0)、(0.290 7±0.015 0)、(0.286 0±0.011 5)g/cm2]比较,模型组[(0.242 3±0.008 1)、(0.239 5±0.006 1)、(0.238 0±0.005 9)g/cm2]降低,辛伐他汀组[(0.2598±0.0249)、(0.2572±0.0121)、(0.2528±0.0126)g/cm2]降低(P<0.05);与模型组比较,辛伐他汀组L5、L6、L5-6骨密度升高(P<0.05)。三维重建图显示,与假手术组比较,模型组和辛伐他汀组骨小梁稀疏,连结性较差。BV/TV、Tb.N降低,Tb.Sp升高(P<0.05);辛伐他汀组Tb.Sp升高(P<0.05)。椎间盘组织学观察及评分:假手术组脊索细胞较多、细胞外基质较丰富、纤维环排列整齐。模型组、辛伐他汀组相比于假手术组,脊索细胞数量减少并被软骨样细胞取代,有黏液样改变,纤维环与髓核边界模糊、排列紊乱。模型组、辛伐他汀组半定量评分[(4.35±0.90)分、(3.53±0.42)分]显著高于假手术组[(2.48±0.92)分],差异有统计学意义(P<0.05),辛伐他汀与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论卵巢切除大鼠不仅椎体骨量丢失,椎间盘也有退变表现;辛伐他汀可以部分抑制卵巢切除大鼠腰椎骨量丢失,但对该模型椎间盘退变无显著影响。 展开更多
关键词 辛伐他汀 骨密度 卵巢切除 椎间盘退变
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城市社区卫生服务存在的问题及相应的建议
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作者 杨静博 杨宇 +7 位作者 王敏 胡寒 魏敏 田消消 刘瑞婷 曹佳丽 李硕峰 田炜 《中国卫生产业》 2017年第9期173-174,共2页
城市社区卫生服务是国家卫生服务体系的一部分,是一种基本卫生服务模式。目前,我国城市社区卫生服务快速发展,尽管有些城市在社区卫生服务方面取得了突破,但就全国而言,还没有形成一个完善的管理体系。该文分析了我国社区卫生服务存在... 城市社区卫生服务是国家卫生服务体系的一部分,是一种基本卫生服务模式。目前,我国城市社区卫生服务快速发展,尽管有些城市在社区卫生服务方面取得了突破,但就全国而言,还没有形成一个完善的管理体系。该文分析了我国社区卫生服务存在的主要问题,并提出了一些基本的建议。 展开更多
关键词 社区卫生服务 问题 建议 卫生服务发展现状
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