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Toll样受体4在蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤中的作用及对海马区神经元自噬的影响 被引量:5
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作者 王一超 刘俊杰 +4 位作者 刘海宁 王婧瑶 张婧曦 赵雅宁 李建民 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期864-870,共7页
目的探讨Toll样受体4(TLR4)在蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)大鼠早期脑损伤中的作用及其对海马CA1区神经元自噬的影响。方法 192只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH模型组(模型组)、SAH+DMSO溶剂组(溶剂组)、SAH+T... 目的探讨Toll样受体4(TLR4)在蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)大鼠早期脑损伤中的作用及其对海马CA1区神经元自噬的影响。方法 192只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH模型组(模型组)、SAH+DMSO溶剂组(溶剂组)、SAH+TLR4抑制剂组(CLI-095组),每组再依据取材时间不同分为24 h和48 h两个时间点。采用颈内动脉穿刺法建立SAH模型,溶剂组与CLI-095组在制备SAH模型前侧脑室分别注射DMSO溶液10 μL或100 μg/mL的CLI-095溶液10 μL。Garcia评分检测大鼠行为学改变;干湿重法检测脑水肿情况;HE染色观察海马CA1区神经元形态;免疫组化和免疫印迹法检测大鼠海马CA1区TLR4、LC3和Beclin1蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组各时间点Garcia评分均降低(P<0.05),脑水肿程度加重,存活神经元数量减少(P<0.05),海马CA1区TLR4、LC3及 Beclin1 表达增多(P<0.05)。与模型组比较,CLI-095组各时间点Garcia 评分增多(P<0.05),脑水肿程度减轻,存活神经元数量增多(P<0.05),海马CA1区TLR4、LC3及Beclin1表达降低(P<0.05)。结论 TLR4可能通过调控SAH诱导的自噬,参与并加重SAH继发性脑损伤的过程。 展开更多
关键词 蛛网膜下腔出血 早期脑损伤 TOLL样受体4 自噬
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头孢曲松对蛛网膜下腔出血大鼠海马神经细胞的保护作用及其机制 被引量:3
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作者 刘俊杰 杜鹃 +5 位作者 杨雅菊 王雪 孙玉婷 刘瑶 赵雅宁 李建民 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1069-1074,I0004,I0005,共8页
目的:探讨头孢曲松对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠的治疗作用,并阐明其作用机制。方法: 48只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、SAH组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组和头孢曲松(CEF)组,每组12只。血管内穿刺法建立SAH模型,腹腔注射给药,3-MA给药剂量... 目的:探讨头孢曲松对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠的治疗作用,并阐明其作用机制。方法: 48只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、SAH组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组和头孢曲松(CEF)组,每组12只。血管内穿刺法建立SAH模型,腹腔注射给药,3-MA给药剂量为15 mg·kg^-1 ,CEF给药剂量为 500 mg·kg^-1。造模后24 h处死大鼠,HE染色观察大鼠脑组织病理表现,TUNEL染色法检测神经细胞凋亡情况,免疫组织化学Western blotting法检测各组大鼠海马组织中自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ阳性细胞数和蛋白表达水平及凋亡因子Caspase-3蛋白表达水平。结果:与SAH组比较,CEF组大鼠神经功能评分明显升高( P <0.01);HE染色检测,SAH组大鼠海马区神经细胞肿胀,胞质疏松,核明显固缩、碎裂和溶解;与 SAH组比较,CEF组大鼠神经变性有所逆转,出现较多正常神经组织形态;3-MA组神经细胞损伤更为严重,满视野死亡神经细胞,细胞层次紊乱。定量分析显示,与SAH组比较,CEF组坏死神经细胞数明显降低(P <0.05),3-MA组坏死神经细胞数明显升高( P <0.05)。免疫组织化学法检测,与SAH组比较,CEF组大鼠海马组织中Beclin-1和LC3-Ⅱ阳性细胞数明显升高(P <0.05),3-MA组大鼠海马组织中Beclin-1和LC3-Ⅱ阳性细胞数明显降低(P <0.05)。TUNEL染色法检测,与SAH组比较,CEF组凋亡细胞数明显减少(P <0.05),3-MA组凋亡细胞数明显升高(P <0.05)。Western blotting法检测,与SAH组比较,CEF组大鼠海马组织中Caspase-3蛋白表达水平明显降低(P <0.05),3-MA组Caspase-3蛋白表达水平明显升高(P <0.05)。结论:头孢 曲松对蛛网膜下腔出血大鼠神经损伤具有保护作用,其作用机制可能与上调神经细胞自噬和减少细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 蛛网膜下腔出血 头孢曲松 细胞自噬 细胞凋亡
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亚低温通过调控内质网应激激活自噬改善蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤 被引量:2
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作者 刘仁杰 刘俊杰 +6 位作者 张尧 王婧瑶 王一超 张婧曦 梁文吉 赵雅宁 李建民 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期824-828,833,共6页
目的检测亚低温干预后蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠神经细胞内质网应激及自噬的激活程度,探讨亚低温治疗的保护作用及机制。方法将48只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(S组)、SAH组、全身亚低温组(H组)和内质网应激抑制剂组(TUDCA组)。采用... 目的检测亚低温干预后蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠神经细胞内质网应激及自噬的激活程度,探讨亚低温治疗的保护作用及机制。方法将48只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(S组)、SAH组、全身亚低温组(H组)和内质网应激抑制剂组(TUDCA组)。采用颈内动脉穿刺法建立大鼠SAH模型,H组于颈外动脉穿刺后即刻向大鼠全身喷洒乙醇进行体表降温,将直肠温度维持在30~32℃4 h;TUDCA组于颈动脉穿刺前1 h腹腔注射溶于生理盐水(100 mg/m L)的牛磺熊去氧胆酸(TUDCA,内质网应激抑制剂)溶液,剂量4.5 mg/kg。术后24 h取脑,HE染色法观察海马区神经细胞形态;免疫组织化学方法检测内质网应激相关因子GRP78、CHOP及自噬相关因子Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达。结果与S组相比,SAH组海马区存活神经细胞数量减少(P<0.05),海马区GRP78、CHOP蛋白及Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与SAH组相比,H组海马区存活神经细胞数量明显减少(P<0.05),GRP78、CHOP及Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与SAH组相比,TUDCA组海马区存活神经细胞数量明显减少(P<0.05),GRP78、CHOP蛋白及Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论亚低温可通过调控内质网应激激活神经细胞自噬,减轻蛛网膜下腔出血的早期脑损伤。 展开更多
关键词 蛛网膜下腔出血 亚低温 内质网应激 自噬
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头孢曲松对蛛网膜下腔出血大鼠星形胶质细胞活化和炎症反应的影响 被引量:1
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作者 龚泽华 刘俊杰 +1 位作者 徐继伟 李建民 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1462-1468,共7页
目的:探讨头孢曲松(CEF)对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠的神经保护作用,并阐明其可能的作用机制。方法:将48只清洁级雄性SD大鼠随机分为假手术组、SAH组和CEF组,每组16只。采用改良后的血管内穿刺法制备SAH大鼠模型,CEF组大鼠术前5 d开始腹... 目的:探讨头孢曲松(CEF)对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠的神经保护作用,并阐明其可能的作用机制。方法:将48只清洁级雄性SD大鼠随机分为假手术组、SAH组和CEF组,每组16只。采用改良后的血管内穿刺法制备SAH大鼠模型,CEF组大鼠术前5 d开始腹腔注射给药,药物剂量为200 mg·kg^(-1)。模型建立24 h后,对各组大鼠进行神经功能评分,HE染色法观察各组大鼠脑组织神经细胞形态表现并计算其神经细胞坏死数,免疫组织化学染色检测各组大鼠脑组织中星形胶质细胞的活化数,ELISA法检测各组大鼠脑组织中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素33(IL-33)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:与假手术组比较,SAH组大鼠组神经功能评分明显降低(P<0.05);与SAH组比较,CEF组大鼠神经功能评分明显升高(P<0.05)。HE染色,假手术组大鼠神经细胞分布排列有序、形态规整,细胞匀称,细胞核居中,染色清楚;SAH组大鼠的神经细胞排列杂乱,形态不规则,呈锥状,胞核收缩、破裂和溶解;CEF组大鼠脑组织神经细胞结构较完整,胞核固缩减轻。与假手术组比较,SAH组大鼠神经细胞坏死数明显增加(P<0.05);与SAH组比较,CEF组大鼠神经细胞坏死数明显减少(P<0.05)。免疫组织化学染色,活化的星形胶质细胞形态多呈"分支状",细胞体较小,以细胞质染色为主,突起增粗延长且长短不一。与假手术组比较,SAH组大鼠星形胶质细胞活化数明显增多(P<0.05);与SAH组比较,CEF组大鼠星形胶质细胞活化数明显减少(P<0.05)。ELISA法检测,与假手术组比较,SAH组大鼠脑组织中IL-1β、IL-33、IL-6和TNF-α水平明显升高(P<0.05);与SAH组比较,CEF组大鼠脑组织中IL-1β、IL-33、IL-6和TNF-α水平明显降低(P<0.05)。结论:CEF能够减轻SAH大鼠脑组织神经细胞的坏死,提高大鼠神经功能评分,具有神经保护作用,其机制可能与抑制星形胶质细胞活化和减轻炎症反应有关。 展开更多
关键词 蛛网膜下腔出血 头孢曲松 炎症反应 星形胶质细胞
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