目的:探讨应用RNAi技术沉默信号转导与激活因子3(Signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)基因对人卵巢癌SKOV3细胞的影响。方法:根据siRNA(Small interference RNAs,iRNA)设计原则,结合pSilencer2.1-U6-neo质粒特...目的:探讨应用RNAi技术沉默信号转导与激活因子3(Signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)基因对人卵巢癌SKOV3细胞的影响。方法:根据siRNA(Small interference RNAs,iRNA)设计原则,结合pSilencer2.1-U6-neo质粒特点,针对STAT3基因设计并合成2条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒,应用脂质体将重组质粒转染SKOV3细胞。通过RT-PCR及Western blot检测STAT3基因不同水平的表达,采用MTT实验、流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡的变化。结果:目的siRNA实验组细胞STAT3蛋白及mRNA表达水平均明显下降,细胞增殖能力显著降低,而细胞凋亡率则显著升高。结论:应用RNAi技术沉默STAT3基因可以降低卵巢癌SKOV3细胞STAT3的表达,进而抑制细胞的生长、增殖及诱导细胞的凋亡。展开更多
文摘目的:探讨应用RNAi技术沉默信号转导与激活因子3(Signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)基因对人卵巢癌SKOV3细胞的影响。方法:根据siRNA(Small interference RNAs,iRNA)设计原则,结合pSilencer2.1-U6-neo质粒特点,针对STAT3基因设计并合成2条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒,应用脂质体将重组质粒转染SKOV3细胞。通过RT-PCR及Western blot检测STAT3基因不同水平的表达,采用MTT实验、流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡的变化。结果:目的siRNA实验组细胞STAT3蛋白及mRNA表达水平均明显下降,细胞增殖能力显著降低,而细胞凋亡率则显著升高。结论:应用RNAi技术沉默STAT3基因可以降低卵巢癌SKOV3细胞STAT3的表达,进而抑制细胞的生长、增殖及诱导细胞的凋亡。
