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企业技术创新能力研究——华北制药集团股份有限公司企业技术创新能力分析 被引量：6
1
作者 阎军印 高伶 张研 《地质技术经济管理》 2001年第1期35-40,78,共7页
本文运用了定量与定性相结合的评价方法 ,从创新资源投入、决策者的创新倾向、企业创新基础、研究与开发能力、创新管理能力五个方面 ,用十三个指标对华北制药集团有限公司 1996年至 1999年的技术创新能力进行了评价 ,并对评价结果和影... 本文运用了定量与定性相结合的评价方法 ,从创新资源投入、决策者的创新倾向、企业创新基础、研究与开发能力、创新管理能力五个方面 ,用十三个指标对华北制药集团有限公司 1996年至 1999年的技术创新能力进行了评价 ,并对评价结果和影响因素进行了分析 ,客观地预测了公司未来的发展趋势。最后在综合评价的基础上 ,针对其存在的问题 。 展开更多
关键词 技术创新 综合评价 企业 决策者 管理创新 评价模型
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响应面法优化非达霉素发酵培养基及中试应用
2
作者 张莉 米贯东 +3 位作者 王昂 任风芝 林旸 李晓露 《中国抗生素杂志》 北大核心 2025年第1期41-49,共9页
目的筛选非达霉素游动放线菌FD-13-194,优化发酵培养基组分,提高非达霉素发酵产量,为其工业化生产奠定基础。方法基于单因素实验结果,通过Plackett-Burman实验、最陡爬坡实验和响应面法,进行产非达霉素发酵培养基配方的优选。结果产非... 目的筛选非达霉素游动放线菌FD-13-194,优化发酵培养基组分,提高非达霉素发酵产量,为其工业化生产奠定基础。方法基于单因素实验结果,通过Plackett-Burman实验、最陡爬坡实验和响应面法,进行产非达霉素发酵培养基配方的优选。结果产非达霉素的最优发酵培养基配方为:葡萄糖30 g/L、糊精60.4 g/L、玉米蛋白粉10 g/L、黄豆饼粉10 g/L、蛋白胨20 g/L、NaCl 2.3 g/L、Tween-802 g/L和CaCO_(3)4 g/L。使用该配方,在2 T罐中非达霉素的平均发酵产量达到3501 mg/L,比原配方提高了36.1%,同时有效去除了副产物杂质1和2,杂质3的比例降低10%以上,中试放大效果良好。结论采用响应面法优化菌株FD-13-194的发酵培养基,在实验室和中试生产中显著提高了非达霉素的发酵产量,展现出极大的工业应用潜力。 展开更多
关键词 非达霉素 游动放线菌 响应面法 中试发酵
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ARTP诱变及高通量筛选选育米尔贝霉素高产菌株
3
作者 张莉 米贯东 +4 位作者 戴梦 谢新宇 安兰兰 马婕 任风芝 《中国兽药杂志》 2025年第3期25-33,共9页
为选育米尔贝霉素(milbemycin)优良菌株,提高发酵产量,以吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)MB230906作为出发菌株,通过常压室温等离子体(ARTP),结合自身代谢产物抗性,以及高通量筛选技术,获得了1株遗传性状稳定的高产突变菌株AM24... 为选育米尔贝霉素(milbemycin)优良菌株,提高发酵产量,以吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)MB230906作为出发菌株,通过常压室温等离子体(ARTP),结合自身代谢产物抗性,以及高通量筛选技术,获得了1株遗传性状稳定的高产突变菌株AM2405-228,50 L罐发酵产量平均达到3494μg/mL,较出发菌株提升28.31%,A3∶A4达到了1∶3.98。结果表明,运用ARTP诱变结合抗性和高通量筛选,可以高效、快速获得发酵产量显著提高的米尔贝霉素突变株,为进一步推进米尔贝霉素的工业化生产奠定坚实的研究基础。 展开更多
关键词 米尔贝霉素 吸水链霉菌 ARTP 高通量筛选
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东南亚金融危机对我国制药业的影响与启示
4
作者 刘寿文 郝秀丽 《经济与管理》 1999年第4期40-41,共2页
关键词 东南亚金融危机 影响与启示 制药业 华北制药集团 中国与东南亚 中国经济 发展模式 资本市场 直接投资 利用外资
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制药废水活性污泥中高效异养硝化-好氧反硝化菌分离及特性研究
5
作者 朱研研 王耀耀 +6 位作者 任风芝 马岩 乔玲 张雪霞 张鹏 王勇军 张利利 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期859-864,I0001,共7页
目的从制药废水活性污泥中筛选高效异养硝化好氧反硝化菌株。方法通过富集培养,BTB平板培养基快速筛选,纯化株通过形态生理生化鉴定和16S rRNA分析确定分类地位。在好氧条件下,对筛选株进行脱氮性能研究以及pH、碳源及含量和基础氨氮耐... 目的从制药废水活性污泥中筛选高效异养硝化好氧反硝化菌株。方法通过富集培养,BTB平板培养基快速筛选,纯化株通过形态生理生化鉴定和16S rRNA分析确定分类地位。在好氧条件下,对筛选株进行脱氮性能研究以及pH、碳源及含量和基础氨氮耐受进行考察。结果获取PWAS17,PWAS21和PWAS343株异氧硝化好氧反硝化菌株。初步鉴定PWAS17为水生产碱杆菌(Alcaligenes aquatilis)、PWAS21为蜡状芽胞杆菌(Bacillus cereus),PWAS34为斯惠假单胞菌(Pseudomonas sihuiensis)。其中Alcaligenes aquatilis和Pseudomonas sihuiensis少有报道。针对3株菌脱氮性能进行研究,结果表明三株菌均能在去除氨氮同时降解COD,并且在去除氨氮过程中几乎无硝基氮和亚硝基氮的积累,均具有异养硝化好氧反硝化特性。通过对菌株脱氮条件优化,得出当pH为9.0,以0.8%柠檬酸钠为碳源,摇床转速220 r/min,接种量5%,温度30℃时最高氨氮去除率,PWAS17最高达92.1%,PWAS21最高达88.7%,PWAS34最高达92.1%。且基础氨氮浓度在50~500 mg/L范围内对3株菌的去除氨氮能力没有明显的抑制。 展开更多
关键词 制药废水活性污泥 异养硝化好氧反硝化 斯惠假单胞菌 水生产碱杆菌 蜡状芽胞杆菌 脱氮性能
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制药企业供应商的选择与管理 被引量：2
6
作者 侯彦秋 刘娜 +1 位作者 徐秋霞 侯新丽 《中国兽药杂志》 2009年第4期59-60,共2页
在现代制药生产过程中,供应商的作用越发重要。介绍了从基本经营资质评估、价格评估、质量与质量管理评估等方面对供应商进行选择,如何对已选定的供应商进行动态管理。
关键词 制药企业 供应商 选择 管理
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雷莫拉宁的提取精制工艺研究
7
作者 周站云 彭亮 +3 位作者 周博 李敏 张雪霞 郭月玲 《化学与生物工程》 CAS 北大核心 2024年第9期48-52,56,共6页
研究了雷莫拉宁的提取精制工艺。雷莫拉宁发酵液经预处理、树脂HZ801富集纯化、乙醇-1%磷酸二氢钠水溶液(酒精度80%)解吸、500D有机纳滤膜浓缩和丙酮结晶,得到雷莫拉宁粗粉;再通过轴向压缩技术(洗脱剂为乙腈-3‰乙酸水溶液,体积比50∶50... 研究了雷莫拉宁的提取精制工艺。雷莫拉宁发酵液经预处理、树脂HZ801富集纯化、乙醇-1%磷酸二氢钠水溶液(酒精度80%)解吸、500D有机纳滤膜浓缩和丙酮结晶,得到雷莫拉宁粗粉;再通过轴向压缩技术(洗脱剂为乙腈-3‰乙酸水溶液,体积比50∶50)分离、浓缩、2.0%活性炭脱色和丙酮重结晶,得到雷莫拉宁精粉。该工艺绿色环保、易操作,适合工业化放大生产。 展开更多
关键词 雷莫拉宁 树脂 轴向压缩 纳滤膜 结晶 精制
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健康与患根腐病三七根际和根内微生物群落结构与多样性研究 被引量：1
8
作者 丁子元 赵学强 +6 位作者 李宁 陈欣怡 孙玉婷 郑晓卫 李睿尧 夏冰 杨娟 《安徽农业科学》 CAS 2024年第19期151-157,共7页
[目的]研究三七健康植株和根腐病植株根内及根际土的微生物群落结构,探究其与三七根腐病发生的相关性。[方法]利用Illumina高通量测序技术对云南文山连作3年的健康植株根内及其根际土壤、根腐病植株根内及其根际土壤中的微生物群落结构... [目的]研究三七健康植株和根腐病植株根内及根际土的微生物群落结构,探究其与三七根腐病发生的相关性。[方法]利用Illumina高通量测序技术对云南文山连作3年的健康植株根内及其根际土壤、根腐病植株根内及其根际土壤中的微生物群落结构及多样性进行分析。[结果]健康植株及其根际土壤与根腐病植株及其根际土壤中微生物群落的丰富度存在显著差异。黄腐植株根际土中的优势微生物为节杆菌属(Arthrobacter)、毛壳菌属(Chaetomium)和周刺座霉属(Volutella),绿腐植株根际土中的优势微生物为节杆菌属(Arthrobacter)和短梗蠕孢属(Trichocladium)。黄腐植株根内优势微生物为被孢霉属(Mortierella)和木霉属(Trichoderma),绿腐植株根内优势微生物为假单胞菌属(Pseudomonas)、土赤壳菌属(Ilyonectria)和小不整球壳属(Plectosphaerella)。[结论]三七根腐病的发生与植株根际及根内微生物多样性和群落结构密切相关。 展开更多
关键词 三七 根腐病 根际微生物 高通量测序 群落结构 微生物多样性
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他克莫司的分离提纯研究
9
作者 王圆超 赵辉 +3 位作者 王月 谷岩翡 高月麒 李晓露 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期175-180,共6页
目的 开发一种他克莫司的分离提纯工艺。方法 采用离子交换树脂脱色除杂、纳滤、结晶等手段得到高质量的他克莫司粗粉,再经反相色谱硅胶层析、复合溶液结晶,得到符合USP标准的他克莫司精粉。结果 优选的脱色树脂为D002,所得他克莫司粗... 目的 开发一种他克莫司的分离提纯工艺。方法 采用离子交换树脂脱色除杂、纳滤、结晶等手段得到高质量的他克莫司粗粉,再经反相色谱硅胶层析、复合溶液结晶,得到符合USP标准的他克莫司精粉。结果 优选的脱色树脂为D002,所得他克莫司粗粉效价大于800μg/mg,二氢他克莫司含量小于4%;该粗粉经UniSil C8Ultra Plus层析纯化,精粉含量大于99.5%,最大单杂小于0.1%。结论 该工艺操作简单、能耗低、收率高,适于他克莫司的产业化应用。 展开更多
关键词 他克莫司 分离提纯 离子交换树脂 层析 结晶
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他克莫司高产菌株选育及发酵配方优化
10
作者 王会会 赵建辉 +3 位作者 孙术超 刘雨 任风芝 赵建强 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期168-174,共7页
目的 选育他克莫司高产菌株,优化培养基配方,提高发酵产量。方法 采用原生质体融合技术对2株筑波链霉菌进行基因组重排,并经响应面设计对发酵培养基配方进行优化。结果 以紫外灭活作为遗传标记经过4轮基因组重排育种后,摇瓶筛选获得3株... 目的 选育他克莫司高产菌株,优化培养基配方,提高发酵产量。方法 采用原生质体融合技术对2株筑波链霉菌进行基因组重排,并经响应面设计对发酵培养基配方进行优化。结果 以紫外灭活作为遗传标记经过4轮基因组重排育种后,摇瓶筛选获得3株高产菌株,其中菌株FK22-71菌丝球松散、椭圆状,发酵浸泡液颗粒状。该菌株稳定高产,采用响应面设计优化后的配方在50 L罐发酵产量平均达1684 mg/L。结论 基因组重排技术应用于他克莫司高产菌株选育,可大幅提高发酵产量,为其工业化发酵生产奠定了基础。 展开更多
关键词 基因组重排 他克莫司 响应面设计 培养基优化
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穿琥宁注射液在犬病治疗中的应用 被引量：1
11
作者 王海 王艳艳 +1 位作者 邓菲 刘娜 《中国动物保健》 2024年第10期42-43,46,共3页
穿琥宁注射液是一种抗菌抗病毒的水溶性注射液,用于细菌或病毒性肺炎、上呼吸道感染等,对于肺炎链球菌所致的犬呼吸道感染有显著疗效。本文通过对穿琥宁注射液在犬病治疗中的应用进行综述,为临床使用该产品提供参考依据。
关键词 穿琥宁注射液 犬 应用
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自动灯检机在兽药生产中的应用
12
作者 任艳 徐秋霞 +2 位作者 王红霄 林绍杰 高天祥 《中国动物保健》 2024年第8期106-107,共2页
人工灯检与自动灯检是各个药厂通常使用的灯检方法,随着设备自动化程度的提高,越来越多的企业倾向于使用自动灯检,本文从自动灯检原理、应用实例、优劣势分析多方面对自动灯检机进行了详细介绍。
关键词 人工灯检 自动灯检 应用原理 漏检率 效率
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复方布他磷注射液在围产期奶牛的应用
13
作者 耿雅丽 段鹏 +2 位作者 王艳艳 刘娜 邓菲 《中国动物保健》 2024年第8期118-119,40,共3页
复方布他磷注射液是一种内源性抗应激的水溶性注射液,对于各种动物营养不良,饲养管理不当及疾病引起的代谢紊乱、幼畜生长发育不良、免疫功能下降以及各种应激均有很好的疗效。本文通过对复方布他磷注射液在围产期奶牛的应用进行综述,... 复方布他磷注射液是一种内源性抗应激的水溶性注射液,对于各种动物营养不良,饲养管理不当及疾病引起的代谢紊乱、幼畜生长发育不良、免疫功能下降以及各种应激均有很好的疗效。本文通过对复方布他磷注射液在围产期奶牛的应用进行综述,为临床使用该产品提供参考依据。 展开更多
关键词 复方布他磷注射液 围产期 奶牛 应用
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提高贴标机贴标牢固性
14
作者 任艳 徐秋霞 +2 位作者 王红霄 张坤然 陈鹏 《中国动物保健》 2024年第3期129-130,共2页
粉针西林瓶装盒后,为了防止药品丢失,大部分企业采取用盒封贴将盒子的扣盖处贴牢,随着兽药生产自动化程度越来越高,装箱操作由原来人工码盒到纸箱中,变化为机器人装箱。原理是依靠真空吸力将盒子吸到纸箱中,吸吊位置为整个盒子的扣盖平... 粉针西林瓶装盒后,为了防止药品丢失,大部分企业采取用盒封贴将盒子的扣盖处贴牢,随着兽药生产自动化程度越来越高,装箱操作由原来人工码盒到纸箱中,变化为机器人装箱。原理是依靠真空吸力将盒子吸到纸箱中,吸吊位置为整个盒子的扣盖平面,这就对盒封贴的牢固性提出了更高要求。如何提高贴签牢固性,本文围绕这一生产难题,提出改造贴标按压装置及传输轨道持续加压的两种思路。 展开更多
关键词 贴标机 贴签牢固性 按压装置 增压装置
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兽药生产企业仓库设置要点
15
作者 陈磊 东贤 刘娜 《中国动物保健》 2024年第10期134-135,145,共3页
兽药生产企业仓库是存贮兽药原辅料、成品等物料的区域,设置和条件是否适当直接影响原辅料、成品等物料的质量。文章介绍了仓库的设置、布局、设施要求和管理注意事项,为兽药生产企业仓库的设置和日常管理提供了参考。
关键词 仓库 物料质量 设置 布局 设施
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产生大环聚酮类天然产物放线菌的分子筛选研究 被引量：20
16
作者 徐平 李文均 +5 位作者 张永光 唐蜀昆 高惠英 徐丽华 贺秉坤 姜成林 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期321-324,375,共5页
目的　建立一套简便、快速、高效的大环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系 ,为聚酮类药物筛选搭建一个新的技术平台 ;认识 PKS- I基因在不同环境放线菌群中的分布规律 ,为新药筛选中微生物资源的定向分离提供依据。方法　通过对大环聚酮... 目的　建立一套简便、快速、高效的大环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系 ,为聚酮类药物筛选搭建一个新的技术平台 ;认识 PKS- I基因在不同环境放线菌群中的分布规律 ,为新药筛选中微生物资源的定向分离提供依据。方法　通过对大环聚酮类化合物生物合成途径所用的 I型聚酮合成酶氨基酸和核苷酸序列的同源性比较分析 ,设计了一对引物用于扩增 KS/ AT功能域约 1.6 kb目的基因片段 ,依据放线菌基因组中 I型 PKS合成酶基因的存在与否标定可能的大环聚酮类天然产物产生菌。结果　利用建立的大环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系对 98株嗜碱放线菌、99株链霉菌、46株嗜盐放线菌和 75 7株稀有放线菌进行了筛选 ,研究表明嗜碱放线菌、链霉菌、嗜盐放线菌和稀有放线菌 I型聚酮合成酶基因的阳性率分别为 2 6 .5 %、2 0 .4%、15 .2 %和 9.35 %。结论　利用组合放线菌基因组 DNA快速提取技术和 PKS- I基因兼并引物 PCR扩增技术建立了快速、简便、高效的大环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系 ,并对不同环境条件的放线菌菌群的PKS- I基因分布进行了研究 ,结果不仅表明了放线菌 PKS I聚酮合成酶分布的广泛性 ,而且表明极端环境放线菌 ,尤其是嗜碱放线菌是大环聚酮类化合物潜在的丰富资源 ,为新药筛选有效菌源的确定提供了? 展开更多
关键词 聚酮合成酶 大环聚酮类化合物 聚合酶链反应 极端环境 分子筛选 放线菌
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均匀设计法优化咪唑立宾发酵培养基配方 被引量：12
17
作者 关亚鹏 娄忻 +3 位作者 张莉 刘靓 张玉莲 刘静 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期471-473,共3页
本文采用均匀设计试验方法对咪唑立宾的发酵培养基配方进行优化,考察淀粉、麸质粉、黄豆饼粉和葡萄糖对其发酵效价和菌体生长量的影响,得到了四个因素的优化配比(淀粉1.8%,麸质粉1.5%,黄豆饼粉2.5%,葡萄糖0.6%),发酵效价比对照培养基提... 本文采用均匀设计试验方法对咪唑立宾的发酵培养基配方进行优化,考察淀粉、麸质粉、黄豆饼粉和葡萄糖对其发酵效价和菌体生长量的影响,得到了四个因素的优化配比(淀粉1.8%,麸质粉1.5%,黄豆饼粉2.5%,葡萄糖0.6%),发酵效价比对照培养基提高约21.3%。 展开更多
关键词 咪唑立宾 均匀设计法 发酵培养基 优化
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香加皮提取物杠柳苷抑制SMMC-7721细胞Stat3信号通路诱导细胞凋亡的研究 被引量：13
18
作者 张丽杰 鹿刚 +2 位作者 张引娟 刘刚叁 单保恩 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第15期1448-1451,共4页
目的研究香加皮提取物杠柳苷对Stat3信号通路的影响,及其诱导细胞凋亡的分子机制。方法MTT比色法检测人肝癌细胞SMMC-7721增殖活性,流式细胞术分析肿瘤细胞的周期变化和凋亡,Western blot检测细胞内Stat3蛋白表达,RT-PCR检测细胞Mcl-1、... 目的研究香加皮提取物杠柳苷对Stat3信号通路的影响,及其诱导细胞凋亡的分子机制。方法MTT比色法检测人肝癌细胞SMMC-7721增殖活性,流式细胞术分析肿瘤细胞的周期变化和凋亡,Western blot检测细胞内Stat3蛋白表达,RT-PCR检测细胞Mcl-1、Survivin和XIAP mRNA的表达。结果杠柳苷可明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,诱导SMMC-7721细胞凋亡,并使细胞周期停滞在G2/M期。杠柳苷作用后,细胞核内Stat3量降低,而细胞质中的量未见明显改变,细胞内Mcl-1、Survivin和XIAP基因的表达明显降低,并呈时间依赖性。结论香加皮提取物杠柳苷通过抑制Stat3信号转导通路和Mcl-1、Survivin和XIAP mRNA的表达,进而抑制SMMC-7721细胞的增殖,诱导其凋亡。 展开更多
关键词 香加皮杠柳苷 信号转导 转录活化因子 Star3 Western blot 流式细胞术 SMMC-7721细胞株
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木鳖子单体化合物对羟基桂皮醛诱导小鼠黑素瘤B16细胞的分化及其机制 被引量：8
19
作者 赵连梅 耿艺曼 +3 位作者 孙士萍 任风芝 韩丽娜 单保恩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期282-287,共6页
目的:探讨从中药木鳖子中提取的单体化合物对羟基桂皮醛(p-hydroxylcinnamaldehyde,PHD)对小鼠黑素瘤B16细胞分化的影响及其可能的作用机制。方法:以10、20、40μmol/L PHD作用B16细胞,设空白对照及福司克林(Forskelin)阳性对照组。磺... 目的:探讨从中药木鳖子中提取的单体化合物对羟基桂皮醛(p-hydroxylcinnamaldehyde,PHD)对小鼠黑素瘤B16细胞分化的影响及其可能的作用机制。方法:以10、20、40μmol/L PHD作用B16细胞,设空白对照及福司克林(Forskelin)阳性对照组。磺酰罗丹明(suphrhodamineB,SRB)法检测PHD对B16细胞生长的抑制率,平板克隆集落形成实验检测细胞的克隆形成能力,Giemsa染色观察细胞形态,比色法检测细胞中黑色素含量和酪氨酸酶(tyrosinase,Tyr)活性,划痕愈合实验检测细胞的迁移能力,Western blotting检测Tyr、酪氨酸酶相关蛋白1(tyrosinase protein,Trp1)及MAPK信号转导通路中p-P38、pJNK和p-ERK1/2的表达。结果:PHD对黑素瘤B16细胞具有明显的增殖抑制作用,10、20、40μmol/L PHD作用B16细胞48h后,其增殖抑制率与对照组相比明显增加[(12.78±0.87)%、(37.70±2.28)%、(42.17±4.18)%vs 0,P<0.05],20、40μmol/L PHD组增殖抑制率与Forskelin组相比明显增加[(37.70±2.28)%、(42.17±4.18)%vs(22.00±1.13)%,P<0.05]。40μmol/L PHD处理B16细胞24、48、72 h后,B16细胞呈典型分化形态,黑色素含量及Tyr活性与对照组相比均明显增加[(0.097±0.02)、(0.13±0.04)、(0.15±0.05)vs(0.085±0.003);(1.11±0.31)、(1.43±0.05)、(1.67±0.49)vs(0.64±0.10),P<0.05];细胞集落形成能力和迁移能力都明显降低(均P<0.05)。与空白对照组相比,PHD处理组细胞Tyr和Trp1的表达明显增加(P<0.05),MAPK信号通路中p-P38和p-JNK的表达水平也明显增加(P<0.05),而p-ERK活性差异则无统计学意义(P>0.05)。结论:PHD通过上调MAPK信号通路中p-P38和p-JNK的活性而对小鼠黑素瘤B16细胞产生明显的增殖抑制,并在形态和功能上诱导黑素瘤细胞的分化。 展开更多
关键词 对羟基桂皮醛 木鳖子 黑素瘤 B16细胞 分化 MAKPS通路
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产生芳香环聚酮类天然产物放线菌的分子筛选研究 被引量：12
20
作者 徐平 李文均 +5 位作者 高慧英 孙玉民 张华 徐丽华 贺建功 姜成林 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期134-137,共4页
目的建立一套简便、快速、高效的芳香环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系,为聚酮类药物筛选搭建一个新的技术平台;认识PKS-II基因在不同环境放线菌群中的分布规律,为新药筛选中微生物资源的定向分离提供依据。方法通过对芳香环聚酮类化... 目的建立一套简便、快速、高效的芳香环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系,为聚酮类药物筛选搭建一个新的技术平台;认识PKS-II基因在不同环境放线菌群中的分布规律,为新药筛选中微生物资源的定向分离提供依据。方法通过对芳香环聚酮类化合物生物合成途径所用的II型聚酮合酶氨基酸和核苷酸序列的同源性比较分析,设计一对简并引物且以微波炉法提取的基因组DNA为模板扩增KS/CLF功能域约0.8kb目的基因片段,依据放线菌基因组中II型PKS合酶基因的存在与否标定可能的芳香环聚酮类天然产物产生菌。结果利用建立的芳香环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系对99株嗜碱放线菌、100株链霉菌、47株嗜盐放线菌和776株一般放线菌进行了筛选,研究表明链霉菌、嗜碱放线菌、嗜盐放线菌和一般放线菌II型聚酮合酶基因的阳性率分别为54%、29.3%、25.5%和24.1%。结论组合放线菌基因组DNA快速提取技术和PKSII基因简并引物PCR扩增技术建立了快速、简便、高效的芳香环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系并对不同环境条件的放线菌菌群的PKSII基因分布进行了研究。结果表明放线菌PKSII聚酮合酶分布具有广泛性;而且同时表明链霉菌是芳香环聚酮类化合物的最丰富来源;在极端环境放线菌中,嗜盐放线菌的PKSII基因在中度嗜盐放线菌分布的频率远高? 展开更多
关键词 聚酮合酶 芳香环聚酮类化合物 聚合酶链反应 极端环境 分子筛选放线菌
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