实验动物伦理福利执行及思考——以华兰基因工程有限公司为例

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作者 师方园 赵云霞 江魁 《湖北畜牧兽医》 2020年第8期41-43,共3页

通过梳理华兰生物工程股份有限公司试验设施配置,结合其日常工作中动物饲养、试验操作、人员素质提升等各个环节工作情况,分析了各环节对动物伦理福利的影响,并对今后具体伦理福利工作的执行进行了思考。

关键词 动物伦理福利 设施 试验

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鲤RNF14基因的生物学功能及其对病原刺激的免疫响应

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作者 张美娜 张子豪 +8 位作者 洪佳乐 郭朝辉 李海洁 于光晴 董鹏生 黄小城 杨振江 王延晖 刘变枝 《河南农业大学学报》 北大核心 2025年第2期255-265,共11页

【目的】探究鲤环指蛋白14(ring finger protein 14,RNF14)基因的生物学功能,为阻断鲤春季病毒血症病毒(spring viremia of Cyprinus carpio virus, SVCV)感染提供新思路。【方法】采用PCR技术、生物信息学分析和实时荧光定量PCR方法,对... 【目的】探究鲤环指蛋白14(ring finger protein 14,RNF14)基因的生物学功能,为阻断鲤春季病毒血症病毒(spring viremia of Cyprinus carpio virus, SVCV)感染提供新思路。【方法】采用PCR技术、生物信息学分析和实时荧光定量PCR方法,对鲤RNF14基因功能进行初步分析,研究其在病毒刺激后的表达规律。【结果】鲤RNF14基因编码区全长1 362 bp,编码453个氨基酸;鲤RNF14与犀角金线鲃亲缘关系较近,与原鸽亲缘关系较远;该蛋白属酸性不稳定亲水性蛋白;功能结构域预测显示该蛋白为典型的RBR E3s;泛素化底物分析结果显示,该蛋白与RBCK1、Nedd4l、Notch1a等蛋白相互作用的置信度较高。组织表达谱分析表明,鲤RNF14基因在各组织或器官中广泛表达,以心脏中相对表达量最高。与对照组相比,高剂量SVCV在体感染鲤24 h后,RNF14基因的mRNA表达水平在肌肉中显著升高;多肌胞苷酸(polyinosinic acid-polycytidylic acid,ploy(I:C))在体刺激鲤24 h后,RNF14基因的mRNA表达水平在肾脏和头肾中显著升高。与对照组相比,低剂量SVCV和poly(I:C)离体刺激下,鲤RNF14基因mRNA表达水平在各取样时间点均极显著升高。在体和离体病原刺激结果表明,鲤RNF14基因参与了病原刺激后的免疫应答过程,提示鲤RNF14基因可能是阻断SVCV感染的潜在靶点。【结论】成功克隆了鲤RNF14基因的基因编码区,揭示了鲤RNF14基因在SVCV和poly(I:C)刺激下免疫响应规律。 展开更多

关键词 鲤 环指蛋白14 生物信息学 鲤春季病毒血症病毒 多肌胞苷酸 病原刺激 免疫响应

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鲤环指蛋白145基因克隆、生物信息学及功能分析 被引量：1

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作者 郭朝辉 张子豪 +5 位作者 李海洁 张美娜 江鑫 于光晴 李明 刘变枝 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3882-3895,共14页

【目的】试验旨在克隆鲤(Cyprinus carpio)环指蛋白145(ring finger protein145,RNF145)基因CDS区,并对其进行生物信息学分析及功能初探。【方法】对鲤RNF 145基因进行了克隆并测序,通过在线软件对鲤RNF145蛋白进行生物信息学分析;采用... 【目的】试验旨在克隆鲤(Cyprinus carpio)环指蛋白145(ring finger protein145,RNF145)基因CDS区,并对其进行生物信息学分析及功能初探。【方法】对鲤RNF 145基因进行了克隆并测序,通过在线软件对鲤RNF145蛋白进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR分析鲤RNF 145基因在不同发育阶段、不同组织中及在鲤春病毒血症病毒(Spring Viremia of Carp virus,SVCV)和Poly(I∶C)刺激下的mRNA表达变化。【结果】鲤RNF 145基因CDS序列全长2049 bp,编码682个氨基酸,其氨基酸序列与鲫相似性最高;鲤RNF145蛋白分子质量为76.56 ku,理论等电点为6.16,脂肪系数为115.32%,不稳定指数为41.87,无信号肽,含有11个跨膜螺旋,属跨膜蛋白;亚细胞定位预测结果显示,其定位于细胞质膜(87%)和内质网(13%);该蛋白含有TRC8-N、RING_H2_RNF145和RAD18结构域,具有α-螺旋(56.45%)、延伸链(9.68%)、β-转角(2.35%)及无规则卷曲(31.52%),与MFN2、NUGGC.1、ASZ1和TRIM36相互作用的置信度较高。早期发育阶段鲤RNF 145基因mRNA表达呈先显著下降后上升,再显著下降趋势(P<0.05);组织表达谱分析表明,其在脾脏中表达量最高,在肝脏中表达量最低;SVCV1(5.6×107 TCID 50/mL)在体感染24 h后,RNF 145基因在肌肉、脾脏、头肾、心脏中表达量均显著升高,在肝脏中则显著下降(P<0.05);该剂量感染鲤上皮瘤细胞(Epithelioma papulosum crprini,EPC)时,RNF 145基因表达量在12 h时开始显著升高,于48 h时仍显著高于对照组(P<0.05);SVCV2(5.6×104 TCID 50/mL)感染EPC时,鲤RNF 145基因mRNA表达量在感染后24 h时显著高于对照组,48 h后显著低于对照组(P<0.05)。与SVCV1刺激结果不同,在体注射Poly(I∶C)(1000μg/mL)24 h后,该基因在脾脏和头肾中表达量均显著低于对照组(P<0.05);Poly(I∶C)(10μg/mL)感染EPC时,鲤RNF 145基因mRNA表达量在感染后24 h时显著高于对照组,48 h后显著低于对照组(P<0.05)。【结论】本试验成功克隆了鲤RNF 145基因的CDS全长序列,揭示了其在不同组织、早期不同发育阶段及SVCV和Poly(I∶C)刺激下的表达变化,为进一步研究该基因功能提供了前期基础。 展开更多

关键词 鲤 RNF 145基因 克隆 生物信息学 鲤春病毒血症病毒 Poly(I∶C)

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肠道病毒71型安徽、河南株的分离与VP1序列进化分析 被引量：2

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作者 邵强 杨全中 +2 位作者 冯真真 于翔 苏志国 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期150-154,共5页

旨在研究手足口病患者中肠道病毒71型分离株的病毒基因型特征。采集手足口病患者的粪便标本,进行病毒分离和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)特异性扩增进行鉴定,同时选取其中9株EV71分离株,对其抗原决定簇部位VP1区进行核酸序列测定,并参... 旨在研究手足口病患者中肠道病毒71型分离株的病毒基因型特征。采集手足口病患者的粪便标本,进行病毒分离和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)特异性扩增进行鉴定,同时选取其中9株EV71分离株,对其抗原决定簇部位VP1区进行核酸序列测定,并参考EV71 A、B、C各基因型的参考株和以往中国EV71的分离株进行同源分析和构建系统发生树。结果显示,所分析的9株病毒株均为C4亚型,3株安徽株H7、H8和H9的VP1序列相似度很高(≥98.8%,其中H7、H9的相似度为100.0%),4株河南株H3、H4、H5和H6相似度较高(≥98.4%,H3、H4和H5≥99.6%,其中H3、H4的相似度为100.0%),它们同河南株H1、H5的相似度也较高(≥97.2%),河南株H2虽然与其他河南株具有较高的序列相似度,但进化分析表明,其与安徽株同源性较高。结果表明,安徽株H7、H8和H9株变异速率明显加快,这可能导致了手足口病在安徽省的率先爆发与大流行,河南株H2最初可能由安徽传入河南。 展开更多

关键词 肠道病毒71型 基因型 手足口病 同源性 系统进化分析

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H1N1亚型流感病毒鸡胚增殖参数的优化 被引量：2

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作者 徐银兰 王三虎 +2 位作者 董永军 张鹏飞 杨猛 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第3期805-813,共9页

为了研究最佳的H1N1亚型流感病毒鸡胚增殖参数,本试验进行了孵化前种蛋的选择与保存、鸡胚孵化中各参数设定等因素对H1N1亚型流感病毒产毒量影响的研究。其中种蛋的选择与保存,主要考察了蛋重、蛋形指数、保存期、消毒时间及方法等因素... 为了研究最佳的H1N1亚型流感病毒鸡胚增殖参数,本试验进行了孵化前种蛋的选择与保存、鸡胚孵化中各参数设定等因素对H1N1亚型流感病毒产毒量影响的研究。其中种蛋的选择与保存,主要考察了蛋重、蛋形指数、保存期、消毒时间及方法等因素,结果显示,蛋重为55～65g,蛋形指数为1.30～1.35,种蛋保存期为1～4d,保存温度为16～18℃,保存湿度为70%～80%,保存期种蛋的甲醛熏蒸消毒时间为30min时,可以为H1N1亚型流感疫苗生产提供最佳的种蛋。孵化过程中孵化参数对H1N1亚型流感病毒产毒量的影响,本试验主要将孵化温度、湿度、翻蛋、通风等参数作为研究对象,结果显示在生产H1N1亚型流感疫苗时,最佳孵化参数设定为：温度1～7d为38.2℃、8～9d为38.0℃、10d为37.8℃,湿度1～10d为65%～70%,翻蛋频率为1次/2h,前后倾角各为45°,通风风门设定为1～5d为4、6～10d为5。本试验结果为H1N1亚型流感疫苗生产提供优质的鸡胚孵化技术,确保鸡胚尿囊液的质量和收获量。 展开更多

关键词 H1N1亚型流感病毒 鸡胚孵化参数 病毒增殖

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荧光定量PCR法检测重组汉逊酵母中HBsAg基因的拷贝数 被引量：2

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作者 邵强 冯真真 +2 位作者 张勇朝 潘若文 徐玉国 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期178-180,193,共4页

重组汉逊酵母基因中外源基因拷贝数是影响目的基因表达水平和检测传代稳定性的重要因素,因此外源基因拷贝数的检测成为研究和分析重组基因的重要内容。利用快速、灵敏的荧光定量PCR法检测外源基因HBsAg拷贝数,以Mox基因为内源参照基因,... 重组汉逊酵母基因中外源基因拷贝数是影响目的基因表达水平和检测传代稳定性的重要因素,因此外源基因拷贝数的检测成为研究和分析重组基因的重要内容。利用快速、灵敏的荧光定量PCR法检测外源基因HBsAg拷贝数,以Mox基因为内源参照基因,通过梯度稀释法,建立了Mox基因和HBsAg基因的循环数(Ct值)与起始模板数的相关标准曲线,其相关系数分别达到0.9996和0.9982。通过比较目的基因HBsAg和内源参照基因Mox在同一荧光强度下出峰的循环数,获得了目的基因HBsAg在重组汉逊酵母中的拷贝数为39。发酵前后HBsAg基因在重组汉逊酵母中稳定存在,发酵前后拷贝数相差均小于6.2%。本方法快速、简便、准确,可以满足基因拷贝数检测的需要。 展开更多

关键词 荧光定量PCR HBsAg基因 Mox基因 重组汉逊酵母 拷贝数

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氧及活性氧代谢相关基因在大鼠肝脏再生中的作用

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作者 蔺芳 张家洋 +1 位作者 皮川真 徐存拴 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第10期32-37,共6页

为了在基因转录水平了解氧及活性氧代谢相关基因在大鼠肝脏再生(LR)中的作用,用Rat Genome 230 2.0芯片检测了上述在大鼠再生肝中表达变化,用真、假手术比较方法确定肝再生相关基因。初步证实上述基因中81个与肝再生相关。其中,肝再生... 为了在基因转录水平了解氧及活性氧代谢相关基因在大鼠肝脏再生(LR)中的作用,用Rat Genome 230 2.0芯片检测了上述在大鼠再生肝中表达变化,用真、假手术比较方法确定肝再生相关基因。初步证实上述基因中81个与肝再生相关。其中,肝再生启动、G0/G1过渡、细胞增殖、细胞分化和组织结构功能重建等四个阶段起始表达的基因数为42、9、35和2;基因的总表达次数为42、31、77和50。表明相关基因主要在肝再生启动阶段起始表达,在不同阶段发挥作用。它们共上调317次,下调161次,分为6类表达方式,表明肝再生中这些基因的表达变化多样和复杂。芯片结果分析表明,肝再生早期和前期过氧化氢和超氧化物代谢增强;几乎在整个肝再生中氧化反应和谷胱甘肽结合反应增强。 展开更多

关键词 部分肝切除 RAT Genome2302.0芯片 氧及活性氧代谢 肝再生相关基因

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镁合金点焊接头组织的耐蚀性

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作者 马天凤 李泽 程艳艳 《腐蚀与防护》 CAS 北大核心 2015年第7期640-642,676,共4页

为提高镁合金焊点的耐蚀性，利用DN-100型固定式点焊机对AZ31B镁合金进行焊接，经拉伸试验和金相观察得出最佳焊接参数下的焊点，对该焊点的耐蚀性进行测试。根据母材及焊点试样在3．5％NaCl溶液中腐蚀不同时间的微观组织观察发现，焊... 为提高镁合金焊点的耐蚀性，利用DN-100型固定式点焊机对AZ31B镁合金进行焊接，经拉伸试验和金相观察得出最佳焊接参数下的焊点，对该焊点的耐蚀性进行测试。根据母材及焊点试样在3．5％NaCl溶液中腐蚀不同时间的微观组织观察发现，焊点及母材均不耐蚀。通过对焊点试样和表面化学镀后的焊点试样进行电偶腐蚀试验，经极化曲线分析得出，化学镀后的焊点试样耐蚀性提高。化学镀膜层在-0．2～0．5V（SCE）腐蚀电位区间，电流变化很小，表现出了明显的钝化特征。 展开更多

关键词 镁合金 点焊 耐蚀性

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镁合金焊点表面化学镀镍磷膜层分析

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作者 马天凤 李泽 程艳艳 《腐蚀与防护》 CAS 北大核心 2016年第1期43-46,共4页

采用化学镀镍的措施对镁合金AZ31B焊点和母材进行防护,并对化学镀镍磷膜层进行X射线和透射电镜分析,研究了膜层的耐蚀性。结果表明,母材镀层是由微晶和非晶组成的多晶混合体,焊点镀层为微晶体;母材镀层的耐蚀性比焊点镀层的更好。

关键词 镁合金 化学镀 膜层分析

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实验动物福利与人的保护 被引量：13

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作者 张鹏飞 章莲保 赵天保 《中国比较医学杂志》 CAS 2009年第10期68-71,共4页

实验动物学是一门研究实验动物和动物实验的综合性学科。是生命科学研究的基础和支撑条件。随着社会经济的长足发展和生命科学研究的突飞猛进,国际交流与合作的不断加强,实验动物福利倍受人们的关注。进入21世纪后国际上又对从事实验动... 实验动物学是一门研究实验动物和动物实验的综合性学科。是生命科学研究的基础和支撑条件。随着社会经济的长足发展和生命科学研究的突飞猛进,国际交流与合作的不断加强,实验动物福利倍受人们的关注。进入21世纪后国际上又对从事实验动物饲养管理和动物实验的工作人员的防护问题提出了新的要求,这就要我们必须考虑到人与实验动物如何和谐相处,促进科学发展。既要做到加强动物福利,又要注意人的保护,找到二者之间的平衡点,加快实验动物科学的发展。 展开更多

关键词 实验动物 动物福利 人的保护

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Up and Down法与寇氏法测定破伤风毒素LD_(50)的比较 被引量：5

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作者 潘若文 马力 +3 位作者 张勇朝 张鹏飞 董洁 王魁 《中国比较医学杂志》 CAS 2012年第12期28-30,共3页

目的比较研究Up and Down法与寇氏法测定破伤风毒素LD50值。方法 NIH小鼠皮下注射破伤风毒素,分别使用寇氏法和Up and Down法计算LD50值。结果同一破伤风毒素经寇氏法计算得LD50值为4.97ng/Kg体重,Up and Down法计算LD50值为4.93 ng/Kg... 目的比较研究Up and Down法与寇氏法测定破伤风毒素LD50值。方法 NIH小鼠皮下注射破伤风毒素,分别使用寇氏法和Up and Down法计算LD50值。结果同一破伤风毒素经寇氏法计算得LD50值为4.97ng/Kg体重,Up and Down法计算LD50值为4.93 ng/Kg体重,95%置信区间为(4.71～5.13)ng/Kg体重。结论应用Up and Down法可测出与寇氏法相同结果的LD50值,且动物使用数量仅用8只。 展开更多

关键词 寇氏法 Up and Down法 破伤风毒素 LD50

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增加环境丰富化模具对实验豚鼠生长及行为的影响 被引量：6

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作者 马力 张鹏飞 +2 位作者 潘若文 赵天保 赵红娜 《中国比较医学杂志》 CAS 2012年第12期60-62,66,共4页

目的在实验豚鼠饲养盒内增加梯形和管形两种不同的模具,进行环境丰富化模具对豚鼠生长及行为影响的研究。方法每组豚鼠饲养4周,每周称1次体重,记录体重变化趋势,并观察豚鼠行为变化。结果放入模具的豚鼠生长情况优越于对照组,管形模具... 目的在实验豚鼠饲养盒内增加梯形和管形两种不同的模具,进行环境丰富化模具对豚鼠生长及行为影响的研究。方法每组豚鼠饲养4周,每周称1次体重,记录体重变化趋势,并观察豚鼠行为变化。结果放入模具的豚鼠生长情况优越于对照组,管形模具优于其他实验组。结论增加环境丰富化模具有利于豚鼠生长,且管形模具更接近豚鼠自然洞穴状态,更加有利于豚鼠实现自然躲藏行为和良好的生长、生活。 展开更多

关键词 环境丰富化 豚鼠 生长 行为

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NIH小鼠纤维腺瘤流行病学及病理学诊断

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作者 潘若文 马力 +2 位作者 张鹏飞 翟三姗 原增泉 《中国比较医学杂志》 CAS 2012年第12期23-24,F0003,共3页

目的对本单位封闭群NIH小鼠发生的皮下肿瘤进行诊断。方法统计发病率、发病体重、分娩胎次等信息,并切除肿瘤组织制作病理切片。结果该肿瘤发病率为1.32%,病理切片诊断为纤维腺瘤。结论本单位饲养繁殖的NIH小鼠发生皮下肿瘤诊断为纤维腺... 目的对本单位封闭群NIH小鼠发生的皮下肿瘤进行诊断。方法统计发病率、发病体重、分娩胎次等信息,并切除肿瘤组织制作病理切片。结果该肿瘤发病率为1.32%,病理切片诊断为纤维腺瘤。结论本单位饲养繁殖的NIH小鼠发生皮下肿瘤诊断为纤维腺瘤,其发病原因需进一步研究探索。 展开更多

关键词 NIH小鼠 纤维腺瘤 流行病学 病理学

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医学生物材料——纤维蛋白胶产业化

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《生物技术产业》 2006年第2期56-57,共2页

一、产品发展简史 纤维蛋白胶，英文名： Fibrin Sealant or Fibrin Glue（Human）for Surgery Lyophilized（简写FS 或 FG）．是一种医学生物黏合剂．在国外已经被许多外科医生长期地、大量地使用在临床上。FS是一种广谱、多功能的... 一、产品发展简史 纤维蛋白胶，英文名： Fibrin Sealant or Fibrin Glue（Human）for Surgery Lyophilized（简写FS 或 FG）．是一种医学生物黏合剂．在国外已经被许多外科医生长期地、大量地使用在临床上。FS是一种广谱、多功能的外科辅材，用于止血、黏合组织和携带药物，特别适于处理难度大的创伤。 展开更多

关键词 纤维蛋白胶 生物材料 医学 产业化 发展简史 黏合剂 英文名 生长期 多功能 外科

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