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脑出血后神经细胞线粒体DNA缺失的实验研究 被引量:6
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作者 李晓峰 张媚 +4 位作者 郭远瑾 李嫚 梅元武 王铁建 李吕力 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2011年第2期168-171,共4页
目的观察大鼠脑出血后神经细胞线粒体DNA(mtDNA)缺失突变与氧化应激水平的相关性。方法 SD大鼠110只,随机分为正常组10只,脑出血组和假手术组各50只,Rosenherg法建立大鼠脑出血模型,后2组术后12h、1、2、4和7 d时观察,每个时间点10只,巢... 目的观察大鼠脑出血后神经细胞线粒体DNA(mtDNA)缺失突变与氧化应激水平的相关性。方法 SD大鼠110只,随机分为正常组10只,脑出血组和假手术组各50只,Rosenherg法建立大鼠脑出血模型,后2组术后12h、1、2、4和7 d时观察,每个时间点10只,巢氏PCR技术检测大鼠神经细胞mtDNA缺失突变率,荧光实时定量PCR技术定量分析mtDN^(4834 bp)缺失含量,硫代巴比妥酸比色法和黄嘌呤氧化法检测脑组织丙二醛含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果脑出血组大鼠神经细胞mtDNA^(4834 bp)片断缺失总发生率54%,明显高于假手术组(P<0.0)5);与假手术组相应时间点比较,脑出血组神经细胞mtDNA^(4834 bp)平均缺失率明显升高(P<0.05);与假手术组和正常组比较,脑出血组SOD活性明显降低,丙二醛含量明显升高(P<0.05)。结论大鼠脑出血后,mtDNA^(4834 bp)缺失与氧化应激水平相关,mtDNA^(4834 bp)缺失突变可能是脑出血后迟发性神经细胞损伤机制之一。 展开更多
关键词 脑缺血 DNA 线粒体 神经元 突变 氧化性应激 超氧化物歧化酶 聚合酶链反应 丙二醛
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褪黑素对脑出血大鼠基质金属蛋白酶表达及神经功能的影响 被引量:9
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作者 李晓峰 郭远瑾 +4 位作者 王郑 陈渊 陈志 李燕华 李吕力 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2014年第6期641-645,共5页
目的观察褪黑素对脑出血大鼠神经功能缺损及血肿周围组织基质金属蛋白酶(MMP)表达的影响。方法将SD雄性大鼠85只,随机分为正常组10只、假手术组25只、模型组25只、褪黑素组25只;后2组建立脑出血模型,后3组随机于12h、1、2、4和7d处理,... 目的观察褪黑素对脑出血大鼠神经功能缺损及血肿周围组织基质金属蛋白酶(MMP)表达的影响。方法将SD雄性大鼠85只,随机分为正常组10只、假手术组25只、模型组25只、褪黑素组25只;后2组建立脑出血模型,后3组随机于12h、1、2、4和7d处理,每个时间点5只。修正神经功能缺损评分(NSS)对各组大鼠进行神经功能评估;透射电子显微镜观察出血侧皮质微血管形态;RT-PCR技术定量分析脑组织MMP-2、MMP-9mRNA表达。结果褪黑素组1~7dNSS低于模型组(P<0.05);褪黑素组和模型组12h^4dMMP-2mRNA水平均逐渐升高,褪黑素组7dMMP-2mRNA明显低于模型组(P<0.05);模型组MMP-9mRNA 2d显著升高,褪黑素组MMP-9mRNA峰值1d出现,7d再次升高,并明显高于模型组(P<0.05)。结论褪黑素能够改善脑出血大鼠神经功能,对脑出血具有保护作用,其机制可能与褪黑素通过调控MMP-2和MMP-9转录,减轻血管源性脑水肿相关。 展开更多
关键词 褪黑激素 脑出血 基质金属蛋白酶类 血肿
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人14-3-3 γ基因的腺病毒载体的构建及其在PC12细胞中的表达 被引量:4
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作者 陈小武 陈志斌 +3 位作者 王埮 袁昆雄 王淑荣 孙圣刚 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期44-49,共6页
目的:构建携带人14-3-3γ基因的重组腺病毒表达载体并确定其对PC12细胞的感染效率。方法:采用PCR方法,从Top10/pHis-14-3-3γ质粒中扩增14-3-3γDNA序列,将14-3-3γ基因定向克隆到穿梭质粒载体pAdTrack-CMV,经与腺病毒骨架质粒pAdEasy-... 目的:构建携带人14-3-3γ基因的重组腺病毒表达载体并确定其对PC12细胞的感染效率。方法:采用PCR方法,从Top10/pHis-14-3-3γ质粒中扩增14-3-3γDNA序列,将14-3-3γ基因定向克隆到穿梭质粒载体pAdTrack-CMV,经与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1载体同源重组后得到携带人14-3-3γ基因的重组腺病毒(pAd/14-3-3γ),采用PCR的方法对重组腺病毒进行鉴定,转染HEK293细胞进行包装和扩增,氯化铯密度梯度离心法纯化,半数组织培养感染剂量(50%tissue culture infective dose,TCID50)方法测定重组腺病毒的滴度。体外感染PC12细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)和Western Blot检测14-3-3γ蛋白的表达。结果:克隆得到人14-3-3γ基因,经PCR鉴定和测序证实结果正确,成功构建得到高滴度的重组腺病毒,并能高效感染PC12细胞。结论:本实验成功构建了表达14-3-3γ的复制缺陷型重组腺病毒Ad-14-3-3,为用14-3-3γ基因治疗帕金森病奠定了基础。 展开更多
关键词 14-3-3γ 腺病毒载体 基因治疗 PC12细胞
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中国脑血管病临床管理指南(第2版)(节选)——第2章卒中组织化管理推荐意见 被引量:15
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作者 楼敏 丁晶 +8 位作者 张玉生 胡波 万艳 张珂萌 费贝尼 徐炳东 谭泽锋 徐安定 中国卒中学会中国脑血管病临床管理指南撰写工作委员会 《中国卒中杂志》 2023年第7期822-828,共7页
卒中是我国成人致死、致残的首位病因,给患者及社会发展带来了沉重负担。组织化管理方法能够一定程度上提升卒中医疗质量,但医疗机构后勤服务支撑能力的异质性为卒中组织化管理的效果带来不确定影响。为进一步完善卒中组织化管理模式,... 卒中是我国成人致死、致残的首位病因,给患者及社会发展带来了沉重负担。组织化管理方法能够一定程度上提升卒中医疗质量,但医疗机构后勤服务支撑能力的异质性为卒中组织化管理的效果带来不确定影响。为进一步完善卒中组织化管理模式,提升卒中治疗的科学性及系统性,本指南就院前急救系统及卒中急诊的组织化管理、急诊多学科协作团队的管理、绿色通道的持续质量改进、卒中单元及卒中门诊的组织化管理、卒中中心的区域协同网络建设、医疗质量评估与改进等多个方面,形成了推荐意见。 展开更多
关键词 卒中 组织化管理 建议 多学科团队 卒中单元
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臭苜蓿根提取物对巨噬细胞血红素氧合酶-1表达的影响 被引量:1
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作者 李晓峰 董艳玲 +3 位作者 郭远瑾 容琼文 李燕华 李吕力 《海南医学院学报》 CAS 2009年第6期569-571,575,共4页
目的:探讨血红素氧合酶-1在LPS诱导急性炎症中的表达及臭苜蓿根提取物的干预作用。方法:通过脂多糖(LPS)干预RAW264.7细胞系建立炎症细胞模型。实时荧光定量RT-PCR法检测血红素氧合酶-1(HO-1)的基因表达差异,Westernblot法测定HO-1的蛋... 目的:探讨血红素氧合酶-1在LPS诱导急性炎症中的表达及臭苜蓿根提取物的干预作用。方法:通过脂多糖(LPS)干预RAW264.7细胞系建立炎症细胞模型。实时荧光定量RT-PCR法检测血红素氧合酶-1(HO-1)的基因表达差异,Westernblot法测定HO-1的蛋白表达量。结果:臭苜蓿根提取物明显升高巨噬细胞HO-1的mRNA表达水平,Westernblot结果显示,臭苜蓿根提取物干预后HO-1的蛋白表达水平也明显升高。结论:臭苜蓿根提取物能提高巨噬细胞HO-1基因的表达,促进HO-1的释放而发挥一定的抗炎作用。 展开更多
关键词 臭苜蓿根提取物 炎症 巨噬细胞 血红素氧合酶-1
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美满霉素抑制脂多糖诱导的小胶质细胞诱导型一氧化氮合酶的表达及其相关机制 被引量:1
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作者 顾昊 沈伟 孙圣刚 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期188-193,共6页
目的:探讨美满霉素(minocycline,MC)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小胶质细胞一氧化氮(NO)生成和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响及其相关分子机制。方法:LPS或联合MC刺激BV-2细胞,酶联免疫法检测培养上清中NO水平,免疫... 目的:探讨美满霉素(minocycline,MC)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小胶质细胞一氧化氮(NO)生成和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响及其相关分子机制。方法:LPS或联合MC刺激BV-2细胞,酶联免疫法检测培养上清中NO水平,免疫细胞化学观察iNOS的蛋白含量,RT-PCR技术评价iNOS的mRNA表达,免疫印迹研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的蛋白水平和磷酸化变化。结果:LPS(100 ng/ml)组NO含量显著升高(P<0.05),且伴随iNOS蛋白和mRNA水平的明显上调,与对照组相比有显著性差异(P<0.01)。MC(10μmol/L)预处理(MC+LPS组)能明显抑制上述变化,NO含量、iNOS蛋白和mRNA水平较LPS组均显著下调(P均<0.01),但明显高于对照组(P均<0.05)。LPS也能诱导p38MAPK磷酸化,与对照组相比差异显著(P<0.01),而MC预处理(MC+LPS组)能拮抗p38MAPK的磷酸化,较LPS组显著下调(P<0.01),同时实验各组p38MAPK蛋白水平保持基本一致。结论:美满霉素能通过下调p38MAPK信号途径,抑制脂多糖刺激的小胶质细胞iNOS基因表达及NO生成,对脂多糖诱导的小胶细胞损伤有明显保护作用。 展开更多
关键词 美满霉素 脂多糖 小胶质细胞 一氧化氮 诱导型一氧化氮合酶 P38丝裂原活化蛋白激酶
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