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SETD5介导AKT1磷酸化调控结肠癌细胞的迁移和5-FU敏感性 被引量：1
1
作者 黄开禹 史建国 程勇 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期586-591,共6页
目的:探讨含SET结构域蛋白5(SETD5)对结肠癌细胞增殖、迁移和对5-氟尿嘧啶(5-FU)药物敏感性的影响及机制。方法:常规培养结肠癌细胞,用Lipofectamine 2000将siSETD5-NC、si-SETD5-1~3质粒转染至HT-29细胞中,将其分为对照组(未处理)、si-... 目的:探讨含SET结构域蛋白5(SETD5)对结肠癌细胞增殖、迁移和对5-氟尿嘧啶(5-FU)药物敏感性的影响及机制。方法:常规培养结肠癌细胞,用Lipofectamine 2000将siSETD5-NC、si-SETD5-1~3质粒转染至HT-29细胞中,将其分为对照组(未处理)、si-SETD5-NC组、si-SETD5组和si-SETD5+SC79组,si-SETD5+SC79组HT-29细胞转染质粒的同时用10µmol/L SC79处理。qPCR法检测NCM460、HT-29和LoVo细胞中SETD5 mRNA表达,流式细胞术、细胞划痕法、WB法和CCK-8法分别检测各组HT-29细胞的凋亡情况、迁移能力、相关蛋白的表达,以及对5-FU的敏感性。结果:SETD5 mRNA在HT-29、LoVo细胞中均呈高表达(均P<0.01)。在HT-29细胞中成功地敲减了SETD5 mRNA(P<0.01)。敲减SETD5 mRNA可明显抑制HT-29细胞的增殖活性(P<0.01)、迁移能力(P<0.01)、相关蛋白(SETD5、p-PI3K、p-AKT1、p-mTOR蛋白)的表达(均P<0.01)、促进细胞凋亡(P<0.01),且提高其对5-FU的敏感性(P<0.01),这些作用均可被AKT激活剂SC79部分阻挡(P<0.05或P<0.01)。结论:SETD5在HT-29、LoVo细胞中高表达,SETD5通过PI3K/AKT1通路促进结肠癌HT-29细胞的增殖、迁移,且降低其对5-FU的敏感性,SETD5是结肠癌临床诊断、治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 结肠癌 含有SET结构域蛋白5 蛋白激酶B磷酸化 增殖 迁移 5-氟尿嘧啶 耐药
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结直肠癌中miR-330-3p-RUVBL1信号轴对肿瘤细胞增殖、凋亡的影响 被引量：3
2
作者 黄开禹 穆磊 +1 位作者 王向阳 王辉 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期517-523,共7页
目的探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中miR-330-3p-RUVBL1信号轴对肿瘤增殖、凋亡的影响。方法分析Oncomine数据库中结直肠癌RUVBL1 mRNA的表达情况;利用Kaplan-Meier生存曲线分析RUVBL1 mRNA表达水平与CRC患者生存预后之间的相关... 目的探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中miR-330-3p-RUVBL1信号轴对肿瘤增殖、凋亡的影响。方法分析Oncomine数据库中结直肠癌RUVBL1 mRNA的表达情况;利用Kaplan-Meier生存曲线分析RUVBL1 mRNA表达水平与CRC患者生存预后之间的相关性;免疫组化法检测临床CRC标本癌组织和正常结直肠组织RUVBL1蛋白的表达情况。荧光素酶报告基因实验分析RUVBL1与miR-330-3p的靶向关系;荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测CRC临床标本癌组织和正常结直肠组织miR-330-3p的表达情况;利用脂质体转染结直肠癌HT-29细胞,过表达或沉默miR-330-3p的表达;运用CCK-8法检测过表达miR-330-3p对HT-29细胞活力的影响和对顺铂敏感性变化,利用流式细胞仪检测过表达miR-330-3p对HT-29凋亡的影响;利用Western blot检测转染miR-330-3p后HT-29细胞中RUVBL1蛋白的表达情况和细胞凋亡相关蛋白的表达情况。结果数据库分析结果显示RUVBL1 mRNA在CRC中高表达;RUVBL1基因的表达水平与结直肠癌患者生存预后之间存在相关性,RUVBL1高表达患者的总体生存率明显低于低表达RUVBL1的患者(P=0.0077);免疫组化结果显示RUVBL1在CRC组织中的表达水平较正常结直肠组织明显增高;qRT-PCR结果显示CRC临床标本癌组织中miR-330-3p的表达水平明显低于正常结直肠组织(P<0.01);过表达miR-330-3p的HT-29细胞中RUVBL1的表达明显下调,细胞内促凋亡蛋白Bax、cleaved-Caspase-3的蛋白表达水平均上调,而Bcl-2表达水平下降;过表达miR-330-3p的HT-29细胞凋亡增加,且对顺铂的敏感性增强。结论RUVBL1在CRC中高表达,其表达水平与CRC患者生存预后相关;RUVBL1是miR-330-3p的潜在靶点,miR-330-3p可能通过抑制RUVBL1表达促进结直肠癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 结直肠癌 Oncomine数据库 miR-330-3p RUVBL1
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腹腔热灌注化疗对进展期结直肠癌患者肠黏膜屏障功能的影响 被引量：9
3
作者 姜旭勉 陈炜 +5 位作者 郑威强 魏凯 杨佳 史建国 吴川清 陶凯雄 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期82-85,108,共5页
目的通过对比进展期结直肠癌患者行腹腔热灌注化疗和未进行腹腔热灌注化疗围手术期血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)、内毒素(ET)的水平,探讨腹腔热灌注化疗对患者肠道黏膜屏障功能的影响。方法选取华中科技大学同济医学院附属武汉市... 目的通过对比进展期结直肠癌患者行腹腔热灌注化疗和未进行腹腔热灌注化疗围手术期血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)、内毒素(ET)的水平,探讨腹腔热灌注化疗对患者肠道黏膜屏障功能的影响。方法选取华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院2018年7月至2019年12月进展期结直肠癌患者62例,随机分为观察组(热灌注化疗组,HIPEC组)和对照组(非热灌注化疗组,Non-HIPEC组)各31例。两组均行腹腔镜下结直肠癌根治性切除术,HIPEC组分别于手术完成即刻、术后第3天进行腹腔热灌注化疗治疗,Non-HIPEC组均未进行腹腔热灌注化疗治疗,其它治疗两组均相同;采用酶法检测两组患者手术前1天及手术后第1、4、6、10天外周静脉血血清DAO、D-LA、ET水平。结果HIPEC组、Non-HIPEC组手术后第1天、第4天、第6天血清DAO、D-LA水平较术前明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05);术后第4天、第6天血清ET水平较术前有升高,差异有统计学意义(均P<0.05)。HIPEC组术后第1天、第4天、第6天血清DAO、D-LA水平较Non-HIPEC组明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05);而两组术后血ET水平比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论进展期结直肠癌患者手术后腹腔热灌注化疗可导致其肠道黏膜损伤和通透性增加,对肠道黏膜屏障功能造成一过性损伤。 展开更多
关键词 结直肠癌 腹腔热灌注化疗 肠道黏膜屏障功能 二胺氧化酶 D-乳酸 内毒素
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