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题名CD151通过囊泡内化再循环调控血管通透性的机制
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作者
范诗浪
蒋卢映
章子璇
季萌萌
左后娟
刘竞搏
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机构
武汉科技大学附属天佑医院心血管内科
华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院(武汉市妇幼保健院)儿童保健科
华中科技大学同济医学院
华中科技大学同济医学院附属同济医院心血管内科
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出处
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025年第2期218-225,233,共9页
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基金
国家自然科学基金(编号:81873535)
湖北省自然科学基金(编号:2020CFB573)。
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文摘
目的探究CD151通过调控囊泡内化再循环对血管通透性的影响及机制。方法野生型小鼠和CD151敲除小鼠分别分为WT-con组、WT-模型组、KO-con组和KO-模型组,每组6只。WT-模型组和KO-模型组采用腹腔注射脂多糖(LPS)制备脓毒症急性肺损伤(ALI)模型,WT-con组和KO-con组腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS)作为对照。造模后24 h,通过Miles实验测定肺血管通透性;将沉默CD151表达的siRNA(si-CD151)和阴性对照si-NC转入EA.hy 926细胞,分别观察基础条件及血管内皮生长因子(VEGF-A)刺激条件下,内皮细胞层在不同时间点对FITC-dextran的通透性;CD151敲低组和对照组内皮细胞行转录组测序;免疫荧光检测各组细胞CD151分布及内化;Western bolt及RT-qPCR检测CD151敲低组及对照组VE-cadherin表达情况,免疫荧光检测各组细胞VE-cadherin分布及内化。结果Miles实验结果提示,WT-模型组小鼠肺组织中染料渗出相较WT-con组增加(P<0.01),KO-模型组小鼠肺组织中染料渗出相较WT-模型组增加(P<0.05)。内皮细胞层通透性检测结果提示,在VEGF-A刺激30、60和120 min后,CD151敲低组对FITC-dextran的通透性显著高于对照组(P<0.05)。转录组测序结果提示,内皮细胞中CD151与囊泡介导的转运存在密切关联。Western bolt和RT-qPCR结果提示,CD151敲低的内皮细胞中VE-cadherin在蛋白和mRNA水平表达较对照组显著下降(均P<0.01)。免疫荧光染色结果提示,在VEGF-A刺激后,与对照组比较,CD151表达下降显著破坏细胞-细胞连接处VE-cadherin的表达,降低了CD151和VE-cadherin在核周区域的共定位。结论CD151的缺失影响内皮细胞囊泡内化再循环,影响VE-cadherin的表达与内化活动,进而影响血管通透性。
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关键词
急性肺损伤
CD151
内化再循环
内皮细胞
血管通透性
VE-CADHERIN
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Keywords
acute lung injury
CD151
internalized recycling
endothelial cells
vascular permeability
VE-cadherin
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分类号
R6311.2
[医药卫生—外科学]
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